土壤 硝基芳烃的测定 高效液相色谱法DB23／T 2488—2019.pdf

I C S 1 3.0 8 0Z 1 8DB23地 方 标 准D B 2 3/T 2 4 8 8 2 0 1 9土 壤 硝 基 芳 烃 的 测 定 高 效 液 相 色 谱 法（报批稿）2 0 1 9-1 1-2 0 发 布 2 0 1 9-1 2-1 9 实 施黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局发 布D B 2 3/T 2 4 8 8 2 0 1 9I目 次前 言.I I1 范 围.12 规 范 性 引 用 文 件.13 方 法 原 理.14 试 剂 和 材 料.15 仪 器 和 设 备.26 样 品.27 分 析 步 骤.38 结 果 计 算 和 表 示.39 精 密 度 和 准 确 度.41 0 质 量 保 证 与 质 量 控 制.51 1 注 意 事 项.5附 录 A（规 范 性 附 录）方 法 的 检 出 限 和 测 定 下 限.6附 录 B（资 料 性 附 录）目 标 物 的 基 本 信 息 和 保 留 时 间.7附 录 C（资 料 性 附 录）方 法 的 精 密 度 和 准 确 度.8D B 2 3/T 2 4 8 8 2 0 1 9I I前 言本 标 准 依 据 G B/T 1.1-2 0 0 9 给 出 的 规 则 编 写。本 标 准 由 黑 龙 江 省 生 态 环 境 厅 提 出 并 归 口。本 标 准 参 与 起 草 单 位：哈 尔 滨 市 环 境 监 测 中 心 站，黑 龙 江 科 瑞 检 测 技 术 有 限 公 司。本 标 准 起 草 人:王 伟 华、陈 莹、王 娜、刘 蕊、张 万 峰、白 昕、腾 世 长、陈 姝 蓉、张 京、孟 冰 冰、张景 欣、王 雅 辉、屈 红 艳、张 立 彬。D B 2 3/T 2 4 8 8 2 0 1 91土 壤 硝 基 芳 烃 的 测 定 高 效 液 相 色 谱 法1 范 围本 标 准 规 定 了 测 定 土 壤 中 硝 基 芳 烃 的 高 效 液 相 色 谱 法。本 标 准 适 用 于 土 壤 中 硝 基 苯（N B）、1,3-二 硝 基 苯（1,3-D N B）、1,3,5 三 硝 基 苯（1,3,5-T N B）、邻硝 基 甲 苯（2-N T）、间 硝 基 甲 苯（3-N T）、对 硝 基 甲 苯（4-N T）、2,4-二 硝 基 甲 苯（2,4-D N T）、2,6-二 硝 基 甲 苯（2,6-D N T）、4-氨 基-2,6-二 硝 基 甲 苯（4-A m-D N T）、2-氨 基-4,6-二 硝 基 甲 苯（2-A m-D N T）等 1 0 种 硝 基 芳 烃 的 测 定。本 标 准 中，当 取 样 量 为 2 0.0 g 时，1 0 种 硝 基 芳 烃 的 方 法 检 出 限 为 0.0 1 m g/k g 0.0 6 m g/k g，测 定 下 限为 0.0 4 m g/k g 0.2 4 m g/k g，具 体 结 果 详 见 附 录 A。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的。凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件，仅 所 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文件。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件，其 最 新 版 本（包 括 所 有 的 修 改 单）适 用 于 本 文 件。H J/T 1 6 6 土 壤 环 境 监 测 技 术 规 范H J 6 1 3 土 壤 干 物 质 和 水 分 的 测 定 重 量 法3 方 法 原 理土 壤 中 的 硝 基 芳 烃 用 乙 腈 或 甲 醇 萃 取 后，取 上 清 液 用 高 效 液 相 色 谱 分 离，紫 外 检 测 器 检 测，根 据 保留 时 间 定 性，外 标 法 定 量。4 试 剂 和 材 料除 非 另 有 说 明，分 析 时 均 使 用 符 合 国 家 标 准 的 分 析 纯 试 剂 和 实 验 用 水。4.1 乙 腈（C H 3 C N）：H P L C 级。4.2 甲 醇（C H 3 O H）：H P L C 级。4.3 硝 基 芳 烃 标 准 贮 备 液：=1 0 0 0 m g/L。使 用 有 证 标 准 溶 液（硝 基 苯、1,3-二 硝 基 苯、1,3,5 三 硝 基 苯、邻 硝 基 甲 苯、间 硝 基 甲 苯、对 硝 基 甲苯、2,4-二 硝 基 甲 苯、2,6-二 硝 基 甲 苯、4-氨 基-2,6-二 硝 基 甲 苯、2-氨 基-4,6-二 硝 基 甲 苯），于-1 0 下 冷藏、避 光 保 存，或 参 照 标 准 溶 液 证 书 进 行 保 存。使 用 时 应 恢 复 至 室 温 并 摇 匀。4.4 硝 基 芳 烃 标 准 使 用 液：=1 0.0 m g/L。用 乙 腈（4.1）或 甲 醇（4.2）稀 释 硝 基 芳 烃 标 准 贮 备 液（4.3），于 4 下 冷 藏、避 光 保 存。4.5 石 英 砂：3 0 0 8 3 0 m（5 0 2 0 目）。D B 2 3/T 2 4 8 8 2 0 1 92在 马 弗 炉 中 4 0 0 下 灼 烧 4 h，置 于 干 燥 器 中 冷 却 至 室 温，转 移 至 磨 口 玻 璃 瓶 中 保 存。5 仪 器 和 设 备5.1 高 效 液 相 色 谱 仪：配 套 紫 外 检 测 器，具 有 梯 度 洗 脱 功 能。5.2 色 谱 柱：填 料 为 O D S（十 八 烷 基 硅 烷 键 合 硅 胶），填 料 粒 径 5 m，柱 长 2 5 0 m m，内 径 4.6 m m的 反 相 色 谱 柱 或 其 它 性 能 相 近 的 色 谱 柱。5.3 采 样 瓶：具 聚 四 氟 乙 烯 内 衬 盖 的 2 5 0 m l 螺 纹 棕 色 玻 璃 瓶。5.4 提 取 瓶：1 0 0 m l，具 聚 四 氟 乙 烯-硅 胶 衬 垫 螺 旋 盖 的 玻 璃 瓶。5.5 水 平 振 荡 器：振 荡 频 率 5 0 2 5 0 次/m i n 左 右。5.6 超 声 波 提 取 器：3 5 H z，有 效 高 频 功 率 至 少 为 1 4 0 W，水 浴 温 度 能 控 制 在 3 0 5 及 5 0 5。5.7 玻 璃 注 射 器：可 装 0.4 5 m 滤 膜。5.8 离 心 机：转 速 1 0 0 0 3 0 0 0 r/m i n。5.9 便 携 式 冷 藏 箱：控 温 4 以 下。5.1 0 天 平：感 量 为 0.0 1 g。5.1 1 一 般 实 验 室 常 用 仪 器 和 设 备。6 样 品6.1 样 品 采 集 和 保 存按 照 H J/T 1 6 6 的 相 关 规 定 进 行 土 壤 样 品 的 采 集 和 保 存。用 铁 铲 或 不 锈 钢 勺 将 样 品 尽 快 采 集 至 采 样 瓶（5.3）中，并 填 满。快 速 清 除 掉 样 品 瓶 螺 纹 及 外 表 面 上 黏 附 的 样 品，密 封 样 品 瓶，避 光 保 存。如 不 能及 时 分 析，于 4 以 下 冷 藏，避 光 保 存，在 5 d 内 完 成 提 取。6.2 试 样 的 制 备除 去 样 品 中 的 枝 棒、叶 片、石 子 等 异 物，称 取 2 0 g（准 确 至 0.1 g）均 质 化 土 壤 鲜 样 于 提 取 瓶（5.4）中，加 入 4 0 m l 乙 腈（4.1）或 甲 醇（4.2）后，盖 上 盖 子，密 封。经 短 暂 手 摇 后，将 提 取 瓶 置 于 水 平 振 荡器（5.5）上，振 荡 1 8 h 后，静 止 沉 降 3 0 m i n，取 上 层 清 液 待 测。如 有 必 要，上 层 清 液 可 经 0.4 5 m 滤 膜（5.7）过 滤 或 离 心 机（5.8）离 心 后 待 测。也 可 以 采 用 超 声 波（5.6）提 取，在 3 0 5 下 超 声 提 取 1 8 h，或 在 5 0 5 下 超 声 提 取 5 h，静 止 沉 降 3 0 m i n，取 上 层 清 液 待 测。在 提 取 过 程 中，水 浴 的 水 位 应 至 少比 提 取 瓶 中 的 溶 剂 位 高 出 1 c m。提 取 后 的 目 标 物 如 不 能 及 时 分 析，可 于 4 条 件 下 暗 处 冷 藏 存 放，保 存 7d。6.3 空 白 试 样 的 制 备以 石 英 砂（4.5）代 替 样 品，按 照 与 试 样 的 制 备（6.2）相 同 的 步 骤 进 行 空 白 试 样 的 制 备。6.4 干 物 质 含 量 的 测 定D B 2 3/T 2 4 8 8 2 0 1 93按 照 H J 6 1 3 测 定 土 壤 样 品 干 物 质 含 量。7 分 析 步 骤7.1 色 谱 参 考 条 件进 样 量：1 0 l；柱 温：3 0；流 速：1.0 m l/m i n；流 动 相 A：甲 醇；流 动 相 B：水；检 测 波 长：2 5 4 n m。梯 度 洗 脱 程 序 见 表 1。表 1 梯 度 洗 脱 程 序时间（m i n）A%B%0 5 8 4 23 0 4 8 5 23 5 6 0 4 03 8 1 0 0 04 0 5 8 4 24 5 5 8 4 27.2 标 准 曲 线 的 建 立分 别 量 取 5 l、1 0 l、2 0 l、5 0 l、1 0 0 l 的 硝 基 芳 烃 标 准 使 用 液（4.4），用 乙 腈（4.1）或 甲 醇（4.2）稀 释，制 备 5 个 浓 度 点 的 标 准 系 列，硝 基 芳 烃 的 质 量 浓 度 分 别 为 0.0 5 g/m l、0.1 0 g/m l、0.2 0 g/m l、0.5 0 g/m l 和 1.0 0 g/m l（此 为 参 考 浓 度），由 低 浓 度 到 高 浓 度 依 次 对 标 准 系 列 溶 液 进 样，以 标 准 系 列 溶 液 中目 标 物 组 分 浓 度 为 横 坐 标，以 其 对 应 的 峰 面 积（峰 高）为 纵 坐 标，建 立 标 准 曲 线。在 推 荐 的 仪 器 条 件 下，1 0 种 硝 基 芳 烃 目 标 物 在 C 1 8 柱 上 的 色 谱 图 保 留 时 间 见 附 录 B。7.3 试 样 测 定按 照 与 标 准 曲 线 的 建 立（7.2）相 同 的 步 骤 进 行 试 样（6.2）的 测 定。7.4 空 白 试 验按 照 与 试 样 测 定（7.3）相 同 的 步 骤 进 行 空 白 试 样（6.3）的 测 定。8 结 果 计 算 和 表 示8.1 定 性 分 析根 据 样 品 中 目 标 物 与 标 准 系 列 中 目 标 物 的 保 留 时 间 进 行 定 性，可 采 用 标 准 添 加 法、不 同 波 长 下 的 吸收 比 或 扫 描 紫 外 吸 收 光 谱 等 方 法 辅 助 定 性。8.2 结 果 计 算土 壤 样 品 中 硝 基 芳 烃 的 含 量（m g/k g），按 照 公 式（1）进 行 计 算。dmim wvi.(1)D B 2 3/T 2 4 8 8 2 0 1 94式 中：i 样 品 中 组 分 i 的 含 量，m g/k g；i 标 准 曲 线 中 所 得 组 分 i 的 浓 度，g/m l；v 提 取 液 体 积（乙 腈 或 甲 醇 体 积+样 品 含 水 量），m l；m 样 品 量（湿 重），g；dmw 土 壤 样 品 干 物 质 含 量，%。土 壤 样 品 中 干 物 质 含 量dmw和 2w，分 别 按 照 式（2）和（3）进 行 计 算：100)()m(w0 10 2m mmdm.(2)100)()m(w0 22 12 m mm.(3)式 中：dmw 土 壤 样 品 中 的 干 物 质 含 量，%；2w 土 壤 样 品 中 的 含 水 量，%；0m 带 盖 容 器 的 质 量，g；1m 带 盖 容 器 及 新 鲜 土 壤 试 样 的 总 质 量，g；2m 带 盖 容 器 及 烘 干 土 壤 的 总 质 量，g。测 定 结 果 精 确 至 0.1%。8.3 结 果 表 示测 定 结 果 小 数 位 数 与 方 法 检 出 限 保 持 一 致，最 多 保 留 三 位 有 效 数 字。9 精 密 度 和 准 确 度9.1 六 家 实 验 室 的 精 密 度 统 计 结 果对 浓 度 为 0.5 0 m g/k g、4 0.0 m g/k g 的 实 际 土 壤 加 标 样 品 进 行 6 次 平 行 测 定，目 标 物 的 实 验 室 内 相 对 标准 偏 差 分 别 为：2.6%1 0%，2.2%1 0%；实 验 室 间 相 对 标 准 偏 差 分 别 为：7.7%1 6%，5.1%1 6%；重 复 性 限 范 围 分 别 为：0.0 9 m g/k g 0.1 2 m g/k g，5.4 5 m g/k g 8.1 2 m g/k g；再 现 性 限 范 围 分 别 为：0.1 2m g/k g 0.2 2 m g/k g，7.9 3 m g/k g 1 7.4 m g/k g，具 体 结 果 详 见 附 录 C。9.2 六 家 实 验 室 的 准 确 度 统 计 结 果对 浓 度 为 0.5 0 m g/k g、4 0.0 m g/k g 的 实 际 土 壤 加 标 样 品 进 行 6 次 平 行 测 定，目 标 物 的 加 标 回 收 率 分 别为：7 4.0%1 1 5%，7 4.2%1 1 5%，具 体 结 果 详 见 附 录 C。D B 2 3/T 2 4 8 8 2 0 1 951 0 质 量 保 证 与 质 量 控 制1 0.1 空 白 测 定本 标 准 规 定 每 2 0 个 样 品 或 每 批 次（少 于 2 0 个 样 品/批）应 至 少 测 定 一 个 实 验 室 空 白 样 品，目 标 物 浓度 应 小 于 方 法 检 出 限。如 果 目 标 物 有 检 出，需 查 找 原 因。1 0.2 校 准本 标 准 规 定 标 准 曲 线 至 少 需 5 个 浓 度 点，校 准 曲 线 的 相 关 系 数 应 大 于 等 于 0.9 9 5，每 2 0 个 样 品 或 每 批次（少 于 2 0 个 样 品/批）分 析 1 次 标 准 曲 线 中 间 点，其 测 定 结 果 与 标 准 曲 线 相 应 点 标 准 值 的 相 对 误 差 不 超过 2 0%，否 则 应 查 找 原 因 或 重 新 绘 制 标 准 曲 线。1 0.3 平 行 样 测 定本 标 准 规 定 每 2 0 个 样 品 或 每 批 次（少 于 2 0 个 样 品/批）至 少 分 析 一 个 平 行 样，单 次 平 行 样 测 定 结 果相 对 偏 差 应 小 于 等 于 3 0%。1 0.4 加 标 样 测 定每 2 0 个 样 品 或 每 批 次（少 于 2 0 个 样 品/批）至 少 分 析 1 个 基 体 加 标 样，样 品 中 目 标 物 加 标 回 收 率 应 在6 0%1 2 0%之 间。1 1 注 意 事 项1 1.1 实 验 中 产 生 的 废 物 应 集 中 收 集 分 类 保 管，并 送 具 有 资 质 的 单 位 统 一 处 置。1 1.2 为 了 防 止 采 样 工 具 污 染，在 使 用 前 要 用 甲 醇、纯 净 水 充 分 洗 净。在 采 集 其 它 样 品 时，要 注 意 更 换采 样 工 具 和 清 洗 采 样 工 具，以 防 止 交 叉 污 染。1 1.3 在 样 品 的 保 存 和 运 输 过 程 中，要 避 免 沾 污，样 品 应 放 在 便 携 式 冷 藏 箱 中 冷 藏 贮 存。1 1.4 在 分 析 过 程 中 必 要 的 器 具、材 料、药 品 等 应 事 先 分 析 测 定 有 无 干 扰 目 标 物 测 定 的 物 质。器 具、材料 可 采 用 甲 醇 清 洗，尽 可 能 除 去 干 扰。1 1.5 试 样 提 取 时，应 注 意 提 取 瓶 的 密 封，避 免 由 于 振 荡 或 超 声 提 取 过 程 造 成 目 标 物 的 损 失。D B 2 3/T 2 4 8 8 2 0 1 96A A附 录 A（规 范 性 附 录）方 法 的 检 出 限 和 测 定 下 限A.1 目 标 物 的 检 出 限 和 测 定 下 限当 土 壤 取 样 量 为 2 0.0 g 时，1 0 种 目 标 物 的 方 法 检 出 限 和 测 定 下 限 见 表 A.1。表 A.1 方 法 的 检 出 限 和 测 定 下 限序号 目标物中文名称 检出限（m g/k g）测定下限（m g/k g）1 硝基苯 0.0 1 0.0 42 1,3-二硝基苯 0.0 2 0.0 83 1,3,5-三硝基苯 0.0 2 0.0 84 2-硝基甲苯 0.0 6 0.2 45 3-硝基甲苯 0.0 5 0.2 06 4-硝基甲苯 0.0 6 0.2 47 2,4-二硝基甲苯 0.0 2 0.0 88 2,6-二硝基甲苯 0.0 2 0.0 89 4-氨基-2,6-二硝基甲苯 0.0 2 0.0 81 0 2-氨基-4,6-二硝基甲苯 0.0 2 0.0 8D B 2 3/T 2 4 8 8 2 0 1 97B B附 录 B（资 料 性 附 录）目 标 物 的 基 本 信 息 和 保 留 时 间B.1 目 标 物 的 基 本 信 息 和 保 留 时 间目 标 物 的 C A S 号、英 文 名 称、简 称 及 保 留 时 间 见 表 B.1。表 B.1 目 标 物 的 C A S 号、英 文 名 称、简 称 及 保 留 时 间中文名称 C A S 号 英文名称 简称 保留时间（m i n）1,3,5-三硝基苯 9 9-3 5-4 1,3,5-T r i n i t r o b e n z e n e 1,3,5-T N B 6.4 3 91,3-二硝基苯 9 9-6 5-0 1,3-D i n i t r o b e n z e n e 1,3-D N B 8.6 4 14-氨基-2,6-二硝基甲苯 1 9 4 0 6-5 1-0 4-A m i n o-2,6-d i n i t r o t o l u e n e 4-A m-D N T 9.1 7 12-氨基-4,6-二硝基甲苯 3 5 5 7 2-7 8-2 2-A m i n o-4,6-d i n i t r o t o l u e n e 2-A m-D N T 9.5 9 5硝基苯 9 8-9 5-3 N i t r o b e n z e n e N B 1 0.7 3 92,6-二硝基甲苯 6 0 6-2 0-2 2,6-D i n i t r o t o l u e n e 2,6-D N T 1 1.5 0 62,4-二硝基甲苯 1 2 1-1 4-2 2,4-D i n i t r o t o l u e n e 2,4-D N T 1 1.7 5 62-硝基甲苯 8 8-7 2-2 2-N i t r o t o l u e n e 2-N T 1 4.1 3 23-硝基甲苯 1 9 9 9-8-1 3-N i t r o t o l u e n e 3-N T 1 5.7 9 44-硝基甲苯 9 9-9 9-0 4-N i t r o t o l u e n e 4-N T 1 7.0 9 2D B 2 3/T 2 4 8 8 2 0 1 98C C附 录 C（资 料 性 附 录）方 法 的 精 密 度 和 准 确 度C.1 方 法 的 精 密 度 和 准 确 度方 法 的 实 验 室 内 相 对 标 准 偏 差、实 验 室 间 相 对 标 准 偏 差、重 复 性 限、再 现 性 限 和 加 标 回 收 率 等 精 密度 和 准 确 度 指 标 见 表 C.1。表 C.1 实 际 土 壤 样 品 加 标 精 密 度 和 准 确 度 汇 总 表目标物加标浓度（m g/k g）测试含量（m g/k g）实验室 内R S D（%）实验室间R S D（%）重复性限（m g/k g）再现性限（m g/k g）回收率均值（%）加标回收率PS P 2 N B0.5 0 0.4 2 4.2 9.5 8.0 0.0 9 0.1 2 8 4.2 8 4.2 1 34 0.0 3 5.9 4.4 8.8 5.1 6.6 7 7.9 3 8 9.6 8 9.6 91,3-D N B0.5 0 0.4 6 4.5 8.7 1 6 0.0 9 0.2 2 9 3.0 9 3.0 3 04 0.0 3 8.2 3.4 8.8 1 4 6.9 4 1 6.4 9 5.5 9 5.5 2 71,3,5-T N B0.5 0 0.4 8 4.2 9.1 1 0 0.0 9 0.1 6 9 6.1 9 6.1 2 04 0.0 3 7.2 2.8 7.0 1 6 5.4 5 1 7.4 9 3.1 9 3.1 3 02-N T0.5 0 0.5 3 3.9 9.8 8.2 0.1 1 0.1 6 1 0 5 1 0 5 1 74 0.0 3 8.2 3.0 8.2 1 5 6.1 8 1 6.7 9 5.5 9 5.5 2 83-N T0.5 0 0.4 7 4.0 9.7 1 4 0.1 0 0.2 0 9 4.9 9 4.9 2 64 0.0 3 4.3 3.0 8.2 6.6 5.7 2 8.2 3 8 5.8 8 5.8 1 14-N T0.5 0 0.4 9 7.0 9.6 7.7 0.1 2 0.1 5 9 7.0 9 7.0 1 54 0.0 3 7.0 2.2 9.1 1 1 5.9 2 1 3.1 9 2.6 9 2.6 2 12,4-D N T0.5 0 0.5 0 4.3 9.0 9.6 0.1 0 0.1 6 1 0 0 1 0 0 1 94 0.0 3 8.6 3.7 1 0 9.1 6.9 2 1 1.7 9 6.5 9 3.9 1 02,6-D N T0.5 0 0.4 9 5.3 1 0 9.6 0.1 2 0.1 7 9 7.4 9 7.4 1 94 0.0 4 0.5 3.1 9.8 8.5 8.1 2 1 2.1 1 0 1 1 0 1 1 74-A m-D N T0.5 0 0.5 1 2.6 9.8 8.7 0.1 1 0.1 6 1 0 2 1 0 2 1 84 0.0 4 0.2 2.8 8.4 8.3 6.0 1 1 0.8 1 0 0 1 0 0 1 72-A m-D N T0.5 0 0.4 9 4.1 9.8 1 5 0.0 9 0.2 2 9 7.6 9 7.6 2 94 0.0 3 7.4 3.6 8.2 1 1 6.6 5 1 3.4 9 3.5 9 3.5 2 2_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _