肥料中2,4-D的测定　高效液相色谱法DB37／T 3755-2019.pdf

ICS 65.080 G 20 DB37 山东省 地 方 标 准 DB 37/T 37552019 肥料中2,4-D 的测定 高效 液相色谱 法 Determination of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid in fertilizers by high performance liquid chromatography 2019-12-05 发布 2020-01-05 实施 山 东 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB37/T 3755 2019 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范 性引 用文 件.1 3 方法 提要.1 4 试剂 和材 料.1 5 仪器.1 6 分析 步骤.2 6.1 样 品制 备.2 6.2 提取.2 6.3 测定.2 6.4 空 白试 验.2 6.5 结 果表 述.2 6.6 允 许差.3 附 录 A（资 料性 附录）2，4-D 基本 信息.4 附 录 B（资 料性 附录）标 准物 质液 相色 谱图.5 DB37/T 3755 2019 II 前 言 本标准 按照GB/T 1.1 2009 给出 的规 则起 草。本标准 由山 东省 市场 监督 管理局 提出 并组 织实 施。本标准 由山 东化 工标 准化 技术委 员会 归口。本标准 起草 单位：山东 省 产品质 量检 验研 究院、菏 泽金正 大生 态工 程有 限公 司、中国 人民 解放 军疾病预防 控制 中心、山 东农 业大学。本标准 主要 起草 人：刘爽、张娟、张 灿、刘倩 倩、朱海荣、田 静、于燕 萍、尹畅、程彬、商 姗 姗、郑树林、王 景超、邹 惠玲、苏本 玉、李成 亮。DB37/T 3755 2019 1 肥 料中 2,4-D 的测 定 高 效液相色 谱法 警 告：本标 准有 可 能涉 及 到 有 害 物质、危 险 操作 和设 备 的 安全。本 标 准并 未指 出 所 有可 能的 安 全问题。使用者有责任 采取 适当的安全和健康措 施，并保证符合国家有关 法规 规定的要求。1 范围 本标准 规定 了肥 料中2,4-D 的液相 色谱 检测 方法。本标准 适用 于水 溶肥 料、复混肥 料、掺混 肥料、配 方肥料 中2,4-D 的检 测。称样量 为1.0 g 时，方法 中2,4-D 的检 出限 为3 mg/kg。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于 本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 6682 分 析实 验室 用 水规格 和实 验方 法 3 方法提 要 试样中2,4-D 用甲 醇进行 超 声提取，在选 定的 工作条 件下，用高效 液相 色谱仪（配有 二极管 阵列 检测器）进行 测定，外 标法 定量。4 试剂和 材料 本标准 中试 验用 水应 符合GB/T 6682 中 一级 用水 的规 格。4.1 乙酸铵：色 谱纯。4.2 甲醇：色谱 纯。4.3 乙腈：色谱 纯。4.4 10 mM 乙酸 铵水 溶液：称 取 0.771 g 乙酸 铵加 水稀 释至 1 000 mL。4.5 2,4-D 标准 品：已知 质量 分数，w98.0%。4.6 2,4-D 标准 溶液：称 取 0.01 g（精 确至0.000 1 g）2,4-D 标准 品，定容 至10 mL，用 甲醇（4.2）配制成 浓度 为1 000 mg/L 的标准 溶液，现 用现 配。5 仪器 5.1 高效液 相色 谱仪：配 有二 极管阵 列检 测器（PDA），色谱数 据处 理机 或色 谱工 作站。5.2 涡旋混 合器。5.3 高速离 心机：最 高转 速不 低于 6 000 r/min。5.4 超声波 清洗 器。DB37/T 3755 2019 2 5.5 金属试 验筛：0.5 mm。5.6 分析天 平：精 度0.1 mg。5.7 有机相 微孔 滤膜：0.45 m。6 分析步 骤 6.1 样品制 备 固体样 品：将样 品粉 碎，过0.5 mm试 验筛，待 用。液体样 品混 匀后 直接 称取。6.2 提取 称取0.1 g1.0 g（精确 至0.000 1 g）样品 至离 心 管中，加入8 mL甲 醇（4.2），涡 旋1 min，超声30 min，以6 000 r/min 高速离 心10 min，放 至室 温后，定容 至10 mL，取1 mL上清 液过0.45 m 有机相滤膜，待 测。6.3 测定 6.3.1 液相色 谱操 作条 件 推荐的 液相 色谱 条件 如下：a)色谱柱：250 mm 4.6 mm（i.d.）不 锈钢 柱，内 装RP18 5.0 m 填充 物（或 具有相 同柱 效的其他反 相色 谱柱）；b)检测波 长：283 nm；c)柱箱温 度：35；d)流动相：（乙 腈：乙酸 铵水溶 液）=60：40；e)流速：0.8 mL/min；f)进样量：10 L。上述液 相色 谱操 作条 件，系典型 操作 参数。可 根据 不同仪 器特 点，对给 定的 操作参 数作 适当 调 整，以期获 得最 佳效 果。典型 的2，4-D标 准物 质液 相色 谱图见 图B.1。6.3.2 标准曲 线绘 制 分别移 取2,4-D 标准 溶液（4.6）0.01 mL、0.05 mL、0.25 mL、0.50 mL 和1.00 mL 至10 mL 容 量瓶 中，甲醇（4.2）定 容，配制 成 浓度分 别为1 mg/L、5 mg/L、25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L 的标 准工 作溶 液，按色谱 条件（6.3.1）进 行 测定，以色谱 峰峰 面积为 纵坐标，对应 的溶 液浓度 为横坐 标作图，绘 制标 准工作曲 线。6.3.3 试样测 定 取适量 待测 液（6.2），按 照色谱 条件（6.3.1）进行 测定，记录 色谱 峰的 保留 时间和 峰面 积，外标法定量，同 时进 行平 行试 验。2,4-D 含量 高的 试样 可 取适量 试样 溶液 用甲 醇稀 释后进 行测 定。6.4 空白试 验 除不称 取试 样外，均 按上 述步骤 进行。6.5 结果表 述 DB37/T 3755 2019 3 试样中2，4-D含 量以 质量 分数X（%）表示，按 公式（1）计算：10010000 mD V c cX.(1)式中：c 由标 准曲 线查 得试 样溶液 中2,4-D 的浓 度，单 位为毫 克每 升（mg/L）；c0 由标 准曲 线查 得空 白溶液 中2,4-D 的浓 度，单 位为毫 克每 升（mg/L）；V 样品 的定 容体 积，单位为 升（L）；D 样品 稀释 倍数；m 样品 质量，单 位为 克（g）。计算结 果保 留两 位有 效数 字，取 平行 测定 结果 的算 术平均 值作 为测 定结 果。6.6 允许差 在重复 性条 件下 获得 的两 次平行 测定 结果 的绝 对差 值不应 超过 算术 平均 值的10%。DB37/T 3755 2019 4 A A 附 录 A（资料 性附 录）2，4-D 基 本信 息 2，4-D 基本 信息 见表A.1。表A.1 2，4-D 的 化学 名称、别 名、英文 名称、分 子式、CAS 号、结构 式、分子 量 中文名称 2，4-D 分子式 C8H6Cl2O3 化学名称 2，4-二氯苯氧乙酸 结构式 别名 2，4-D 酸；2，4-D；2，4-二 氯苯氧基乙酸；2，4-滴酸 CAS 号 94-75-7 英文名称 2，4-Dichlorophenoxyacetic acid 分子量 221.04 DB37/T 3755 2019 5 B B 附 录 B（资料 性附 录）标准物 质液 相色 谱图 标准物 质液 相色 谱图 见图B.1。注：1-未知；2-2，4-D。图B.1 2,4-D 标准 物质 液相 色谱 图 _