人参中人参多糖的测定 分光光度法DB22／T 1685-2012.pdf

ICS 67.050 X 04 备案号：35976-2013 DB22 吉林省 地方标准 DB 22/T 1685 2012 人参中人参多糖的测定 分光光度法 Determination of ginseng polysaccharides in Ginseng Spectrophotometric method 2012 12 21发布 2013 01 01实施 吉林省质量技术监督局 发布 DB22/T 1685 2012 1 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009和 GB/T 20001.4-2001给出的规则起草。本标准由吉林省卫生厅提出并归口。本标准起草单位：吉林省卫生监测检验中心、吉林省现代检测技术工程研究中心。本标准起草人：杨大鹏、方赤光、刘思洁、姜楠、郭金芝、周丽、丛婳婳。DB22/T 1685 2012 2 人参中人参多糖的测定 分光光度法 1 范围 本标准规定了人参中人参多糖含量的分光光度测定方法。本标准适用于鲜人参、生晒参中人参多糖含量的测定。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的 版 本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版 本（包括 所 有 的 修改 单）适用于本文件。GB/T 6682 分 析实 验 室 用 水 规 格 和 试 验方法 3 原理 试料 中人参多糖 经水解醇沉后,产 生 醛 糖 衍 生 物,在这种强酸条 件下 与苯酚反 应生 成橙色衍 生 物,衍 生 物在波长 486 nm处比色，外 标法定量。4 试剂和材料 除另有 规定 外，所用 试剂均为 分 析纯，试 验用 水符合 GB/T 6682规定的 三级水要求。4.1 硫酸。4.2 乙醇溶液（80%）：20 mL水 中 加入无水乙醇 80 mL,混匀。4.3 葡萄 糖标准 品（C6H12O6，CAS号：50-99-7）：纯 度 99.0%。4.4 葡萄 糖 储备液（10 mg/mL）:准 确称取 105 干燥至恒重 的 葡萄 糖标准 品 1.0000 g,置 于 100 mL容 量 瓶 中,溶解 并 稀释至刻 度,配成 10 mg/mL的标准 储备液。4.5 葡萄 糖 使 用 液（0.1 mg/mL）:吸上述（4.4）储备液 1 mL定 容至 100 mL,配成 0.1 mg/ml的工 作 液。4.6 苯酚溶液（50 g/L）:取优级苯酚试剂 5.0 g加水溶液稀释至 100 mL容 量 瓶 中，混匀。在 4 冰 箱 中 保存一个月。5 仪器 5.1 分光光度 计：精 度 为 0.001 g。5.2 电子天平：感 量 0.00001 g。5.3 高速离 心 机：转速 10000 r/min。5.4 恒 温 水 浴锅。5.5 超声 波 提 取 器：功率密 度 0.3 W/cm2。DB22/T 1685 2012 3 6 试样制备 取 适量人参 样 品 将 其 粉碎，烘 干备 用。7 分析步骤 7.1 提取 准 确称取上述 6制 备 的 样 品 2.00 g置 于 100 mL容 量 瓶 中，加 70 mL水，在 超声 波 中 萃 取 30 min,将 提取液 放 入 100 水 浴 中提 取 4 h,冷却 至室 温，定 容至 100 ml容 量 瓶 中,取 5 mL提 取液加乙醇溶液（4.2）15 mL混匀，在 高速离 心 机 上 以 10000 r/min的 速 度 离 心 10 min，弃去 上 清 液，再 分 别 用 5 mL乙醇溶液（4.2）混匀 离 心 两次，分 别弃去 上 清 液，残渣 用 水溶解与 100 mL容 量 瓶 中，为 待 测 液，备 用。7.2 测定 取 2 mL上述 7.1中的 待 测 溶液 于 25 mL具塞 刻 度 试 管 中,加入 5%苯酚溶液 1.0 mL摇 匀,快速 加入硫酸溶液（注：加入硫酸 前，做好防护措施，注 意安全）5 mL，振摇 5 min,放 置 10 min,置 沸 水 浴 中 加 热 20 min,取 出 冷却 至室 温,于 486 nm,以 试剂 空白 为 参 比 测定 吸 光度。7.3 标准工作曲线的绘制 精密移 取葡萄 糖标准 液（4.6），0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2,1.4,1.6 mL于 25 mL具塞 刻 度 试 管 中,加水至 2.0 mL再各 加 5%苯酚溶液 1.0 ml摇 匀,迅速 加入 浓 H2SO4溶液 5 mL振摇 5 min,放 置 10 min,置 沸 水 浴 中 加 热 20 min,取 出 冷却 至室 温,于 486 nm,以 试剂 空白 为 参 比 测定 吸 光度。8 结果计算 1000 1000=mf CX1V.(1)式 中：X 人参多糖 DE的 0析纯 含量，单位 为 克每 100克（g/100 g）；C1根据 标准 曲线回 归方程 查 出人参多糖的含量,单位 为 微克每毫升（g/mL）；f 溶液 的 稀释 倍数；V 溶液 的定 容 体积,单位 为 毫升（mL）；m 样 品 的 取 样 量，单位 为 克（g）。9 精密度 9.1 重复性 在重 复性 条 件下 获得 的 两次独 立 测定 结果 的 绝 对 差值 不 得超 过算 术 平 均 值 的 10%。9.2 再现性 在重 现 性 条 件下 获得 的 两次独 立 测定 结果 的 绝 对 差值 不 得超 过算 术 平 均 值 的 10%。DB22/T 1685 2012 4 10 线性范围和定量限 本标准方法的 线性 范围 为 0 g 160 g，定量 限 为 0.01 g/kg。_