大花萱草工厂化育苗生产技术规程DB13／T 2283-2015.pdf

ICS 65.020.20 B 05 DB13 河 北 省 地 方 标 准 DB 13/T 22832015 大花萱草工厂化育苗生产技术规程 2015-12-25发布 2016-02-01实施 河北省质量技术监督局 发 布 DB13/T 22832015 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由河北省林业厅提出。本标准起草单位：河北省林业科学研究院。本标准主要起草人：赵玉芬、储博彦、尹新彦、李金霞、刘满光、郝建清、张永信、徐晓娜、张军霞、李国松、王乃泽。DB13/T 22832015 1 大花萱草工厂化育苗生产技术规程 1 范围 本标准规定了大花萱草工厂化育苗生产的组培工厂的设计要求、所需的仪器设备及化学试剂、生产工艺流程、生根与移栽管理、质量分级及包装、标志、运输等内容。本标准适用于大花萱草工厂化育苗生产。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。LY/T 2063-2012 萱草种苗生产技术规程 NY/T 2306-2013 花卉种苗组培快繁技术规程 3 组培工厂的设计要求、所需的设备、器材及试剂 按照 NY/T 2306-2013中4.14.2执行。4 瓶苗生产工艺流程 4.1 品种选择 选择市场流行的品种，见附录A。4.2 母株资源保存 将大花萱草母株种植在特定区域，加强肥水管理，确保植株健壮，防治病虫害，减少植株表面附带的微生物和害虫。4.3 培养基选择与母液配制 4.3.1 培养基选择 根据大花萱草不同品种和外植体部位选择合适的培养基种类和激素配比。以MS和1/2 MS(大量元素减半)为基本培养基。参见附录B。4.3.2 基本培养基母液配制和保存 按照 NY/T 2306-2013附录G执行。4.3.3 植物生长调节剂的母液配制和保存 删 除的内容:培养车间与育苗区的设计带 格式 的.1删 除的内容:设计要求.2带 格式 的.3删 除的内容:清晰删 除的内容:清新的地点。.4批 注 A1:这个词过大，包含了前面.5批 注 A2:此处依然是应该包括表格.6批 注 A3:没有单位 批 注 A4:这些也没有单位 批 注 A5:这些也没有单位，下同 删 除的内容:大花萱草品种选择与母.7带 格式 的:字体颜色:自动设置删 除的内容:.1 删 除的内容:大花萱草如红运、莎曼、.8批 注 A6:品种名应加单引号 带 格式 的.9带 格式 的.10删 除的内容:材料管理带 格式 的.11带 格式 的.12删 除的内容:大花萱草组培的带 格式 的.13带 格式 的.14删 除的内容:.1 带 格式 的.15带 格式 的.16带 格式 的.17删 除的内容:材料生长发育阶段删 除的内容:.2 带 格式 的.18带 格式 的.19带 格式 的.20带 格式 的.21删 除的内容:7.2 带 格式 的.22带 格式 的.23DB13/T 22832015 2 按照 NY/T 2306-2013附录H执行。4.4 培养容器和接种器械的清洗 按照 NY/T 2306-2013中6.1和6.2 执行。4.5 培养基制作 4.5.1 配制 根据培养基成分准备好蒸馏水、琼脂、蔗糖和各类母液等。制作1L培养基加蒸馏水700mL（按所需容量的70%左右），再加入琼脂4gL-16 gL-1，加热搅拌使琼脂融化。加砂糖30gL-1，糖溶解后，根据预配母液取量，再根据要求加入激素若干，并充分搅拌均匀后，加蒸馏水定容至1L。用pH计或pH试纸测pH值，用0.1molL-1的HCl或0.1 molL-1的NaOH调节pH至为5.86.0。生产中根据所需容量按比例配置。4.5.2 分装 根据不同需要定量分装，如150mL的培养瓶，每瓶分装约30mL40mL。分装培养基时勿将培养基沾在培养瓶瓶口。4.5.3 高压灭菌 培养基分装后应在10h内进行湿热灭菌；灭菌条件一般在1.1kgcm-21.2kgcm-2、121下，灭菌18min20min。4.5.4 贮存 灭菌后的培养基应注明培养基编号及配制日期，储存于培养基储藏室内，存储时间不应超过10d。4.6 接种操作 按照NY/T 2306-2013中10.110.11执行。4.7 培养室操作 按照NY/T 2306-2013中11.111.5执行。4.8 外植体选择、灭菌及接种 4.8.1 外植体的选择 从健康植株上选取1.5cm2.5cm花蕾做外植体最好。也可采用大花萱草的茎芽、幼嫩花序轴上带节点区段为外植体。4.8.2 外植体消毒 将整理好的外植体，用餐具洗涤剂溶液浸泡并振荡5min10min，然后自来水冲洗30min。在超净台上将预处理后的外植体放在有盖容器中，倒入75%酒精溶液中浸泡10s30s，用无菌水冲洗外植体3次。再用0.1%的HgCl 2溶液浸泡8min10min，或者5%次氯酸钠溶液浸泡20min30min，用无菌水冲洗35次后备用。升汞安全管理方法按照危险化学品安全管理条例执行。删 除的内容:.24带 格 式 的.25带 格 式 的.26删 除的内容:（2）植物生长物.27带 格 式 的.28删 除的内容:大花萱草组培的带 格 式 的.29带 格 式 的.30删 除的内容:8.1 带 格 式 的.31删 除的内容:g带 格 式 的.32删 除的内容:.带 格 式 的:字体颜色:自动设置,上标删 除的内容:l加热搅拌使琼脂融化。.33删 除的内容:.2 带 格 式 的.34带 格 式 的.35删 除的内容:.3 带 格 式 的.36带 格 式 的.37删 除的内容:（1）带 格 式 的.38删 除的内容:在对培养基进行高压灭菌.39带 格 式 的.40删 除的内容:/cm2m-21.2kgcm-2.41删 除的内容:.3 带 格 式 的:字体颜色:自动设置删 除的内容:9 选取外植体.42带 格 式 的.43带 格 式 的.44带 格 式 的.45删 除的内容:准备删 除的内容:消毒剂的配制和安全使用：.46带 格 式 的.47带 格 式 的.48删 除的内容:10.2 接种人员应在.49带 格 式 的.50带 格 式 的.51批 注 A7:图1 这些应该都是接种操.52带 格 式 的.53删 除的内容:.2 带 格 式 的.54带 格 式 的.55带 格 式 的.56删 除的内容:将大花萱草的花蕾和茎芽.57带 格 式 的:字体颜色:自动设置删 除的内容:.3 带 格 式 的.58DB13/T 22832015 3 4.8.3 外植体接种 在超净工作台上用手术刀和镊子将外植体切割成所需大小，一般切去花蕾顶部，留花托近1.0cm左右，纵切为2块；茎芽1.0cm1.5cm，幼嫩花序轴上带节点区段取0.5cm1.0cm。接种到初代培养基上。每瓶接种1个外植体。将品种代号、培养基类型、接种人员以及接种日期认真标示到瓶上；放入培养室进行培养。4.9 初代培养 培养温度为232，光照强度1000 lux1500 lux，每日光照12h14h。外植体在初代培养基 培养1周后，花托基部开始膨大。培养3周后，形成淡黄或浅绿光滑的愈伤组织。4.10 继代培养 4.10.1 不定芽分化 将愈伤组织转接到继代培养基上，诱导不定芽分化，培养条件同4.9。4.10.2 不定芽增殖与继代 当瓶苗增加到一定数量和规模后，降低分裂激素的浓度，进行丛生芽分化培养，可采用丛生芽切割小芽团大芽团丛生芽循环增殖的方式。150mL的培养瓶接种数量为5块/瓶，要排放均匀、整齐。每3周继代1次，增殖系数宜控制在35。4.11 生根培养 当芽丛生长到3cm4cm左右即可进行生根培养。将丛生芽切割单株接种于生根培养基中，在150mL的培养瓶接种数量为10株/瓶。培养15d20d后，当幼苗基部长出35条新根，根长2cm3cm长时，就可进行炼苗移栽。5 瓶苗质量要求 5.1 整体感 苗粗壮、叶片大小协调、有层次感、色泽正常，叶色具原品种特性，无玻璃化。5.2 根系 有新鲜根系（一般3条以上），长势好、色白健壮，根长适中，基部无愈伤组织。5.3 苗高 苗高适中，一般4cm6cm。5.4 叶片数 具有适宜和正常的叶片数，一般不少于3片。5.5 整齐度 同一批次90%以上的苗高达到要求的高度。删 除的内容:12 外植体接种操.59带 格式 的.60带 格式 的.61删 除的内容:带 格式 的:段,行距:单倍行距删 除的内容:从高温电热灭菌器中取.62批 注 A8:为什么不另起一行？如上.63删 除的内容:将大花萱草的花蕾和茎.64带 格式 的.65批 注 A9:.66删 除的内容:个人编号删 除的内容:12.4 关机.67带 格式 的.68带 格式 的.69带 格式 的.70批 注 A10:建议相同级别的题目统.71删 除的内容:组培带 格式 的.72删 除的内容:培养温度为23带 格式 的.73删 除的内容:小时14h。外植体在.74删 除的内容:大花萱草带 格式 的.75带 格式 的.76删 除的内容:不定芽带 格式 的.77带 格式 的.78删 除的内容:基删 除的内容:诱导不定芽分化的培养.79删 除的内容:带 格式 的.80带 格式 的.81删 除的内容:分化与丛生芽带 格式 的:段,行距:单倍行距删 除的内容:将愈伤组织转接到分化.82带 格式 的:字体颜色:自动设置删 除的内容:（1）先打开培养瓶盖.83删 除的内容:（2）每取一丛生芽.84带 格式 的.85带 格式 的.86删 除的内容:大花萱草组培苗的删 除的内容:丛芽删 除的内容:培养20 d后可长到.87删 除的内容:大花萱草组培苗带 格式 的:字体颜色:自动设置带 格式 的.88带 格式 的.89带 格式 的.90带 格式 的.91带 格式 的.92删 除的内容:基本带 格式 的.93带 格式 的.94DB13/T 22832015 4 6 炼苗 将生根瓶苗置于驯化室中进行光照适应性锻炼，温度控制在232，经过3d4d的闭口锻炼后，进入移栽阶段。7 组培苗移栽及管理 7.1 基质选择与消毒 采用50孔或72孔穴盘育苗，基质可选用泥炭土：珍珠岩：蛭石=3:1:1，用80%多菌灵可湿性粉剂0.5g.L-1溶液或0.3%0.5%高锰酸钾溶液喷透备用。7.2 瓶苗处理 用镊子从瓶中轻轻取出生根苗，放在盛有20左右的温水中，将附着在根上的培养基清洗掉，洗时注意不能伤根，用80%多菌灵杀菌剂0.5g.L-1的溶液中浸泡10min。7.3 穴盘苗的移栽 用竹签等工具在事先准备好的穴盘上打容纳根系的孔，将组培苗的根顺延下去，栽植深度3cm4cm。移栽后用细喷雾器喷水，使根系和基质紧密接触。插牌注明品种和日期。7.4 苗期管理 7.4.1 温湿度及光照的管理 移栽初期，保持空气相对湿度80%左右，温度1825。光照强度控制在90molm-2s-1180 molm-2s-1（5000lx10000lx）；当试管苗再生新根后增加光照强度，降低空气湿度至60%左右，培育40d50d后，当试管苗根系发达、植株健壮、叶片达到10cm15cm左右即可出圃。7.4.2 施肥 当试管苗正常生长后，可进行叶面喷肥，喷施1/10MS大量元素溶液加0.1%的KH 2PO 4溶液。8 穴盘苗的质量标准 8.1 整体感：苗健壮、挺拔和新鲜，形态完整、叶片大小协调，叶色具原品种特性、有光泽。8.2 根系状况：具有完整而发达的根系，根系充满盆孔，能轻易拨出而基质不散。8.3 苗高：一般 10cm15cm。8.4 叶片数：具有较多的叶片数，一般 4片以上。8.5 整齐度：同5.5。8.6 病虫害损伤：无检疫性病虫害，亦无病虫害危害症状。9 包装、标志和运输 删 除的内容:16.6 培养基污染状.97带 格 式 的:字体颜色:自动设置带 格 式 的.98带 格 式 的.99删 除的内容:大花萱草组培苗的瓶练删 除的内容:带 格 式 的:字体颜色:自动设置带 格 式 的.100删 除的内容:大花萱草组培苗的带 格 式 的:字体颜色:自动设置带 格 式 的.101带 格 式 的:字体颜色:自动设置,上标删 除的内容:8.2 带 格 式 的.102带 格 式 的.103带 格 式 的.104删 除的内容:带 格 式 的.105带 格 式 的.106带 格 式 的.107删 除的内容:18.4 基质选择.108带 格 式 的.109删 除的内容:组培苗带 格 式 的.110带 格 式 的.111带 格 式 的.112带 格 式 的.113删 除的内容:18带 格 式 的.114删 除的内容:25之间带 格 式 的.115带 格 式 的.116带 格 式 的.117带 格 式 的.118带 格 式 的.119删 除的内容:大花萱草移载苗的带 格 式 的:字体颜色:自动设置删 除的内容:带 格 式 的.120带 格 式 的.121带 格 式 的:字体颜色:自动设置DB13/T 22832015 5 9.1 包装 将穴盘装在小纸箱内，再将小纸箱装入大纸箱中，每箱装4张穴盘，高温季节，包装箱内最好加冰袋。9.2 标志 每箱应贴上标签，注明品种、等级、规格、数量、产地、出苗日期、注意事项等。9.3 运输 装车时切勿倒置，用厢式货车运输以避免日晒、雨淋，运输途中温度保持1025，保持湿度30%60%，5d内到达目的地。删 除的内容:1.1带 格式 的:一级条标题,行距:单倍行距带 格式 的:段,缩进:首行缩进:0 字符,行距:单倍行距删 除的内容:.2 带 格式 的:字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号带 格式 的:一级条标题,行距:单倍行距删 除的内容:.3 带 格式 的:字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号带 格式 的:一级条标题,行距:单倍行距删 除的内容:10 15 带 格式 的:字体颜色:自动设置带 格式 的:字体颜色:自动设置带 格式 的:字体颜色:自动设置DB13/T 22832015 6 A A 附 录 A（资料性附录）市场流行品种及主要特征 A.1 市场流行品种及主要特征见表A.1。表A.1 品种 主要特征 海尔范Hemerocallis Frans Hals 根茎短，常肉质。株高约 63.6cm，叶基生、宽线形，叶宽 2.3cm，长达 94cm，背面有龙骨突起，绿色。花上位，内花被红色，花肋黄色，外花被黄色，花喉黄色；复色花。花径 12cm，为百合状花冠，花被基部合生呈筒状；花薹从中部抽出，螺旋状聚伞花序，花葶粗壮，高 71.2cm，每葶可着花 15 朵，花期 6 月下旬至 7 月下旬。生命力强盛，分蘖能力强，耐瘠薄、抗病虫害能力强。奶油卷 Hemerocallis Betty Woods 根茎短，常肉质。奶油卷叶丛高 45cm50cm，叶宽 2cm3cm 米，属常绿型，重瓣，呈牡丹型，鹅黄色，直径可达 8cm10cm，变种呈浅酱黄色。花葶从中部抽出，花葶粗壮，高 40cm45cm，每葶可着花 68 朵。花期 6 月下旬至 8 月中下旬。为大花萱草珍品，分蘖能力差，喜阳光，耐半阴，抗旱、抗寒、抗病虫能力强，适应性广。红运Hemerocallis Baltimore Oriole 根茎短，常肉质。株高约 32.4cm，叶基生、宽线形，叶宽 2.6cm，长达 51.8cm，背面有龙骨突起，深绿色。花上位，红色，花喉黄色。花径 8cm10cm，为百合状花冠，花被基部合生呈筒状；花薹从中部抽出，螺旋状聚伞花序，花葶粗壮，高 50cm，每葶可着花 1015 朵，花期 6 月中下旬至8 月上旬。生长势强，分蘖能力中等，喜阳光，耐半阴，抗旱、抗寒、抗病虫能力强，适应性广。东方不败Hemerocallis Peachy Pink Repeater 根茎短，常肉质。叶丛高 35cm40cm，叶基生、宽线形、对排成两列，宽 2cm3cm，长可达 50cm以上，背面有龙骨突起，嫩绿色。花上位，复色，花瓣外卷呈粉红色，有光泽，皱褶，花心带有金黄晕，色泽娇艳。花朵硕大花径 10 cm 12.5cm，裂片翻卷，为百合状花冠，花被基部合生呈筒状；花薹从中部抽出，螺旋状聚伞花序，花葶粗壮，高 40 cm50cm，每葶可着花 613 朵，花期 6 月中旬至 8 月中旬。生长势强，分蘖能力强，喜阳光，耐半阴，抗旱、抗寒、抗病虫能力强，适应性广。红宝Hemerocallis Pardon Me 根茎短，常肉质。株丛高 35cm40cm，具短根状茎，叶长 30cm40cm，叶宽 2cm3cm，叶片浓密。螺旋状聚伞花序，花上位，单瓣，深红色，花被基部合生呈筒状；花径约 5cm6cm，花葶从中部抽出，高 40cm 左右，每个花序可着花 10 朵以上。花期 6 月8 月。分蘖能力强，喜阳光，耐半阴，抗旱、抗寒、抗病虫能力强，适应性广。盛夏红酒Hemerocallis Summer Wine 根茎短，常肉质。植株高 48.4cm，叶基生、宽线形、对排成两列，宽 22.9cm，长可达 50.8cm 以上，背面有龙骨突起，嫩绿色。花上位，红色，花喉黄绿色，为复色花。花径 14cm，裂片翻卷，为百合状花冠，花被基部合生呈筒状；花薹从中部抽出，螺旋状聚伞花序，花葶粗壮，高 49cm，每葶可着花 813 朵，花期 6 月上旬至 8 月中旬。生长势强，分蘖能力强，喜阳光，耐半阴，抗旱、抗寒、抗病虫能力强，适应性广。DB13/T 22832015 7 B B 附 录 B（资料性附录）大花萱草不同品种外植体选择及培养基配方 B.1 大花萱草不同品种外植体选择及培养基配方见B.1。表B.1 单位：mg.L-1 品种 外植体 初代培养基 增殖培养基 生根培养基 海尔范Hemerocallis Frans Hals 花蕾 1/2MS+6-BA2.03.0+IBA0.2 MS+6-BA1.5+IBA0.2 MS+6-BA0.3+IBA0.1 1/2MS+IBA0.5 茎芽、带节点 的 花 序轴区段 1/2MS+6-BA1.5 2.0+IBA0.2 奶油卷 Hemerocallis Betty Woods 花蕾 1/2MS+6-BA3.0+IBA0.2 MS+6-BA1.5+IBA0.2 MS+6-BA0.3+IBA0.1 1/2MS+IBA0.5 茎芽、带节点 的 花 序轴区段 1/2MS+6-BA2.0+IBA0.2 红运Hemerocallis Baltimore Oriole 花蕾 1/2MS+6-BA2.03.0+IBA0.2 MS+6-BA1.5+IBA0.2 MS+6-BA0.3+IBA0.1 1/2MS+IBA0.3 茎芽、带节点 的 花 序轴区段 1/2MS+6-BA1.5+IBA0.2 东方不败Hemerocallis Peachy Pink Repeater 花蕾 1/2MS+6-BA1.52.0+IBA0.2 MS+6-BA1.5+IBA0.2 MS+6-BA0.3+IBA0.1 1/2MS+IBA0.5 茎芽、带节点 的 花 序轴区段 1/2MS+6-BA1.5+IBA0.2 红宝Hemerocallis Pardon Me 花蕾 1/2MS+6-BA1.52.0+IBA0.2 MS+6-BA1.5+IBA0.2 MS+6-BA0.5+IBA0.1 1/2MS+IBA0.5 茎芽、带节点 的 花 序轴区段 1/2MS+6-BA1.5+IBA0.2 盛夏红酒Hemerocallis Summer Wine 花蕾 1/2MS+6-BA3.0+IBA0.2 MS+6-BA1.5+IBA0.2 MS+6-BA0.3+IBA0.1 1/2MS+IBA0.5 茎芽、带节点 的 花 序轴区段 1/2MS+6-BA2.0+IBA0.2 _ 页 1:1 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:18:00 章标题,缩进:首行缩进:0 厘米 页 1:2 删除的内容 微软用户 2015-05-17 16:55:00 设计要求（1）组培车间应建在干燥、通风透光、空气 1 页 1:3 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:18:00 章标题,行距:单倍行距 页 1:4 删除的内容 微软用户 2015-05-17 16:55:00 清新的地点。（2）培养车间主要包括:洗涤室、培养瓶晾干室、药品室（称量室）、培养基配制室、灭菌室、培养基储备室、更衣室、接种室、炼苗室、贮物室等，各车间要布局合理，形成一条连续、有序和通畅的生产流水线。（3）育苗区：出瓶后定植前主要采用温室大棚设施，包括组培苗的驯化移栽区和辅助用房（存放基质、遮阳网、工具）等。组培苗经驯化后定植到大田中。面积要求 大花萱草组培所需的仪器设备 仪器设备 大花萱草组培所需的仪器设备包括灭菌设备、培养设备和培养容器、实验设备A1等。不同规模大花萱草组培车间所需的仪器设备种类及数量如表2所示。表2 不同规模大花萱草组培车间所需的仪器设备种类及数量 仪器设备名称A2 年产50 年产100 年产200 1 灭菌设备、器械 1.1 50L 立式高压灭菌器 1 1 1 1.2 360L 卧式高压蒸汽 灭菌器 0 1 2A4 1.3 电热干燥箱 50cm60cm75cm 1 1 1 1.4 30W/40W紫外灯 若干 若干 若干 2 接种设备及器械 2.1 超净工作台 8 16 32 2.2 酒精灯 8 16 32 2.3 镊子 16 32 64A5 2.5 10刀片 若干 若干 若干 2.6 11刀片 若干 若干 若干 2.7 剪刀 8 16 32 2.8 不锈钢切割碟子 800 1600 3200 3 培养设备和培养容器 3.1 205L 光照培养箱 1 2 2 3.2 空调 5 10 20 3.3 培养架135mm50mm180mm，5层，100 200 400 3.4 晾瓶架，135mm50mm180mm，5层，5 10 10 3.5 组培专用托盘6249 4.5 1500 3000 6000 3.6 250mL 培养瓶 6 万 12万 24 万 3.7 试管 1000 2000 3000 4 实验设备 4.1 0.1mg/0210g 电子分析天平 1 1 1 4.2 0.01g/06000g 电子精密天平 1 1 1 4.3 标准型pH计 1 1 1 4.4 照度计 1 1 1 4.5 玻璃温度计 10 20 40 4.6 200L 冰箱 2 2 3 4.7 微波炉 2 2 2 4.8 单层小推车 10 20 40 4.9 双层小推车 10 20 40 4.10 操作台 2400mm750mm850mm 1 套 2套 2 套 4.11 药品柜 1 2 2 4.12 玻璃器皿柜 1 2 2 4.13 实验椅 10 20 40 4,15 小型去离子水设备 10-100L 1 1 1 5.2 玻璃器皿及器材 大花萱草组培所需的玻璃器皿及器材包括盛装器皿（烧杯、试剂瓶等）、计量器皿（量筒、容量瓶等）以及其他常用消耗品等。不同规模大花萱草组培车间所需的玻璃器皿及器材参见表3。表3 不同规模大花萱草组培车间所需的玻璃器皿及器材 品名 规格 年产 50 万 年产100万 年产200万烧杯 50mL/100mL/250mL/500mL/1000mL/2 套 3 套 3 套 白试剂瓶 25mL/250mL/500mL/1000mL/2000mL 2 套 5 套 5 套 棕色试剂瓶 125mL/250mL/500mL/1000mL/2000mL 2 套 5 套 5 套 量筒 0mL/100mL/250mL/500mL/1000mL 2 套 2 套 2 套 容量瓶 50mL/100mL/250mL/500mL/1000mL/2 套 2 套 2 套 棕色滴瓶 125mL 2 2 2 塑料洗瓶 500mL 2 2 2 搪瓷杯 28cm39cm 5 5 5 电饭煲 13L 1 1 1 电茶壶 5L 1 1 1 塑料框 54cm44cm7.2cm 2 5 5 称量纸 7575mm、500 张/包 1 包 1 包 1 包 称量纸 100100mm、500张/包 1 包 1 包 1 包 称量纸 150150mm、500张/包 1 包 1 包 1 包 pH 精密试 pH5.47，一联5本 5 本 5 本 5 本 定性滤纸 9cm，中速，100张/盒 5 盒 10 盒 10 盒 洗瓶刷 各式 若干 若干 若干 塑料大盆 2 4 4 三防套袖 大号/中号/小号，防水、防静电、防菌 10 20 40 乳胶手套 红/蓝色 若干 若干 若干 实验服（白 大号/中号/小号，实验室通用 5 10 10 接种三防工 大号/中号/小号，防水、防静电、防菌，10 20 40 实验帽 大号/中号/小号，白色 10 20 40 一次性手套 八寸、薄膜手套 若干 若干 若干 一次性口罩 若干 若干 若干 一次性鞋套 若干 若干 若干 脱脂纱布 0.8m15m、医用敷料级 5 10 20 凉拖鞋 各种尺码 10 20 40 棉拖鞋 各种尺码 10 20 40 页 1:5 批注 A1 Administrator 2015-12-30 10:26:00 这个词过大，包含了前面的设备，应具体，如器械、玻璃器皿等 页 1:6 批注 A2 Administrator 2015-12-30 10:26:00 此处依然是应该包括表格里的全部内容主题 页 1:7 删除的内容 微软用户 2015-05-18 09:47:00 大花萱草品种选择与母本材料管理 2 页 1:8 删除的内容 微软用户 2015-05-18 09:47:00 大花萱草如红运、莎曼、奶油卷A6等 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 1:10 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:19:00 一级条标题,行距:单倍行距 页 1:11 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:19:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 1:12 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:19:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 1:13 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:19:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 1:14 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:19:00 一级条标题,行距:单倍行距 页 1:15 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:24:00 二级条标题,段落间距段前:7.8 磅,段后:7.8 磅,行距:单倍行距 页 1:16 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:22:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 1:17 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:22:00 段,缩进:首行缩进:0 字符,行距:单倍行距 页 1:18 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:23:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 1:19 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:24:00 二级条标题,段落间距段前:7.8 磅,段后:7.8 磅,行距:单倍行距 页 1:20 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:23:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 1:21 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:24:00 二级条标题,段落间距段前:7.8 磅,段后:7.8 磅,行距:单倍行距 页 1:22 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:23:00 页 1:23 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:23:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 2:24 删除的内容 微软用户 2015-05-17 17:14:00（1）制作培养基前需先配制基本培养基母液，MS基本培养基母液配制比例参见表4。表4 MS基本培养基母液配制 母液名称 编号 化试名称 mg/L 扩大倍数 扩 大 后称 量(mg)母液定溶体积(mL)配制培养基吸取 大量元素 A NH 4NO 3 1650 20 33000 1000 50 KNO 3 1900 20 38000 CaCl 22H 2O 440 20 8800 MgSO 47H 2O 370 20 7400 KNO 3 1900 20 38000 KH 2PO 4 170 20 3400 铁盐 B FeSO 47H 2O 27.8 100 2780 1000 10 Na 2EDTA2H 2O 37.3 100 3730 微量元素 C MnSO 44H 2O 22.3 100 2230 500 5 ZnSO 47H 2O 8.6 100 860 H 3BO 3 6.2 100 620 KI 0.83 100 83 Na 2MoO 42H 2O 0.25 100 25 CuSO 45H 2O 0.025 100 2.5 CoCl 26H 2O 0.025 100 2.5 有机成分 D 甘氨酸 2 200 400 1000 5 盐酸硫胺素B 1 0.1 200 20 盐酸吡哆酸B 6 0.5 200 100 烟酸 0.5 200 100 有机成分 E 肌醇 100 50 5000 500 10（2）母液配制应用去离子水。（3）母液保存要求：母液保存应置于4左右的冰箱内。母液保存期应不超过15天。（4）母液容器上应贴好标签，注明名称、配制日期，发现标签不明或母液中有沉淀、浑浊或变色现象应停止使用。7.3 植物生长物质的母液配制（1）植物生长物质的母液配制浓度0.1 mg/ml1.0 mg/ml，植物生长物质的母液配制方法参见表5。表5 植物生长物质的母液配制方法 类 别 种 类 配制方法 常用浓度 细胞分裂素 6-BA 先用少量0.1mol/L 的盐酸（HCl）溶解，然后加蒸馏水定容。0.12.0 生长素 IAA 先用少量0.1mol/L 的KOH或NaOH溶解，然后加蒸馏水定容 0.11.0 0.55.0 IBA 0.051.0 0.25.0 NAA 0.010.5 0.22.0 页 2:25 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:25:00 一级条标题,行距:单倍行距 页 2:26 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:25:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 2:27 删除的内容 微软用户 2015-05-17 17:01:00（2）植物生长物质的母液保存要求：母液配制好后贴好标签，按规定要求保存，保存期应不超过2 个月。页 2:28 带格式的 微软用户 2015-05-18 14:25:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 2:29 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:32:00 字体:五号,(国际)Times New Roman,复杂文种字体:Times New Roman 页 2:30 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:32:00 二级条标题,段落间距段前:7.8 磅,段后:7.8 磅,到齐到网格,图案:清除 页 2:31 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:32:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 2:31 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:32:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 2:32 带格式的 微软用户 2015-05-18 10:01:00 字体:字体颜色:自动设置,(国际)宋体 l 页 2:33 删除的内容 微软用户 2015-05-18 10:01:00 l 页 2:33 删除的内容 微软用户 2015-05-18 10:01:00 l 页 2:33 删除的内容 微软用户 2015-05-18 10:01:00 l 页 2:33 删除的内容 微软用户 2015-05-18 10:01:00 l 页 2:34 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:33:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 2:35 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:33:00 二级条标题,段落间距段前:7.8 磅,段后:7.8 磅,行距:单倍行距 页 2:36 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:33:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 2:37 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:33:00 二级条标题,段落间距段前:7.8 磅,段后:7.8 磅,行距:单倍行距 页 2:38 带格式的 微软用户 2015-05-17 17:53:00 段,缩进:首行缩进:0 字符,行距:单倍行距 页 2:39 删除的内容 微软用户 2015-05-17 17:51:00 在对培养基进行高压灭菌时，应同时放入无菌水、玻璃器皿、金属器械等与培养基一块进行高压灭菌。页 2:40 带格式的 微软用户 2015-05-18 10:03:00 字体:字体颜色:自动设置,(国际)宋体 页 2:41 删除的内容 微软用户 2015-05-18 10:03:00/页 2:41 删除的内容 微软用户 2015-05-18 10:03:00/页 2:41 删除的内容 微软用户 2015-05-18 10:03:00/页 2:42 删除的内容 微软用户 2015-05-18 09:51:00 9 选取外植体 于晴天，从健康植株上选取1.52.5cm 的花蕾为外植体最好。也可采用大花萱草的茎芽为外植体。页 2:43 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:33:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 2:44 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:33:00 一级条标题,行距:单倍行距 页 2:45 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:33:00 字体:黑体,字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 2:45 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:33:00 字体:黑体,字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 2:46 删除的内容 微软用户 2015-05-18 09:51:00 消毒剂的配制和安全使用：（1）配备专用的有害液体处理池的单位可使用升汞进行外植体的表面灭菌处理；（2）升汞溶液的配制浓度为0.1%；（3）溶液装在棕色玻璃瓶中贮存。2.1 页 2:47 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:33:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 2:48 带格式的 微软用户 2015-05-17 18:13:00 字体颜色:自动设置,复杂文种字体:小四 页 2:49 删除的内容 微软用户 2015-05-17 18:05:00 10.2 接种人员应在更衣室更换拖鞋、穿白大褂（或接种服），戴上帽、口罩后进入接种室（或经过风淋室后进入接种室）。10.3接种人员在接种之前应准备酒精灯或电热灭菌器、75%酒精或新洁尔灭、无菌脱脂棉或纱布以及接种器械、培养基、接种用苗等。10.4 超净工作台（或洁净无菌接种室）提前30 min开机通风，同时打开操作间、更衣间及缓冲间的紫外灯，一般灭杀菌30 min 后，关掉紫外灯；关紫外线灯15 min20 min 后人员才可进入室内。10.5 提前15 min打开接种用电热灭菌器。超净工作台用75%酒精或0.1%新洁尔灭仔细擦一遍。10.6 操作人员洗手后，用75%酒精喷手于操作台内吹干，勿双手互擦。A7 1 2.2 页 2:50 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:33:00 一级条标题,定义网格后自动调整右缩进,段落间距段前:0 磅,段后:0 磅,行距:单倍行距 页 2:51 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:33:00 字体:黑体,字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 2:51 带格式的 微软用户 2015-05-19 09:33:00 字体:黑体,字体颜色:自动设置,复杂文种字体:五号 页 2:52 批注 A7 Administrator 2015-12-30 10:2