ICS 65.020.01 CCS B 15 13 河北省 地 方 标 准 DB 13/T 5977 2024 柴胡根腐病抗性鉴定技术规程 2024-06-24 发布 2024-07-24 实施 河北省市场监督管理局 发 布 DB 13/T 5977 2024 I 前 言 本文件 按照GB/T 1.1-2020 标准化 工作 导则 第1 部 分：标 准化 文件的 结构和 起草 规则 的规定起草。本文件由河 北省农业 农村厅提 出。本文件起 草单 位：河 北工程 大学、邯郸 市农业 综合行 政执 法支队、河北 农业 大学、河北 省农林科学院。本文件主要 起草人：李朋 朋、魏学军、刘 会芬、李浩然、刘极一、李生 辉、李倩、金池、刘蕾、董金皋、李 耀发。DB 13/T 5977 2024 1 柴胡根腐病抗性鉴定技术规程 1 范 围 本文件规 定了 柴胡根 腐病抗 性鉴 定的 接 种体制 备、抗 性鉴 定圃设 置、接 种、病情调 查、抗性评价要求。本文件适用 于柴胡根 腐病的抗 性鉴定。2 规范性引用 文件 本文件没有 规范性引 用文件。3 术语和定义 本文件没有 需要界定 的术语和 定义。4 接种体制备 病原物分离、鉴定 4.1.1 利用组织分 离法和单 胞分离技 术，从患 病植株根 部典型病 斑上分离、纯化根 腐病病原 菌。4.1.2 分离物进行 形态学和 分子生物 学鉴定、柯赫氏法 则验证及 致病性测 定。4.1.3 纯化菌株 4 低温保存备 用。接种体繁殖 4.2.1 将 PDA 平板培养 的病原菌 接种于经 高压灭菌 的高粱粒 培养基，25 黑暗培 养 5 d 7 d 后，菌丝布满高 粱粒。4.2.2 用灭菌水淘 洗高粱粒 过滤后制 成孢子悬 浮液。4.2.3 悬浮液中分 生孢子浓 度调至每 毫升 1106个。5 抗性鉴定圃 设置 鉴定圃 鉴定圃应具 备良好的 自然发病 条件，周 边设置保 护行。鉴定设计 鉴定材料随 机排列或 顺序排列，重复3次，每重复 种植两行，设1组 已知感病 对照材料。种植要求 鉴定小区行 长3 m，行距15 cm 20 cm，株距7 cm10 cm。土壤肥 力水平和 耕作管理 与大田 生产相同。6 接种 接种时期 选择二年生 柴胡，6 月 上旬接种。接种方法 DB 13/T 5977 2024 2 选用2 mL注射器分4 次，距 植株周围2 cm 土壤注射 浓度为每 毫升1106个的 分生孢子 悬浮液，每株2 mL。接种前后的 田间管理 接种前3 d 应进行 田间浇灌，或 有效降雨 后接种，接种 后每周浇 灌一次。期间 不使用杀 菌 剂。施肥和除草同 大田管理。7 病情调查 调查时间 接种40 d开始调查，2 d内完成。调查方法 每个重复 随机 调查30 株柴胡 植株的 根部 进行发 病情况 调查，记录 病级，病级的 划分 按表1 进行。表1 柴胡抗根腐 病鉴定病 情级别划 分 病情指数计 算 按式（1）进 行病情指 数计算。式中：DI 病情 指数；s 各病 情级别的 代表数值；n 各病 情级别的 植株数，单位为株；N 调查 总株数，单位为株；S 最高 病情级别 的代表数 值。8 抗性评价 鉴定有效性 判别 若感病对照 品种达到 感病级别（病情指 数 20.01），该 批次鉴定 有效。病情级 别 症状描 述 0 根部正 常、无病 斑 1 根部病 斑面 积1/4 以下 2 根部病 斑面 积1/4 1/2 3 根部病 斑面 积1/2 3/4 4 根部病 斑面 积3/4 以上）1（100）（S Nn sDIDB 13/T 5977 2024 3 抗性评价标 准 依据鉴定材 料发病程 度（病情 指数）确 定其抗性 水平，评 价标准见 表2。表2 柴胡对根腐 病抗性的 评价标准 病情指 数 抗性 0 免疫 0.01 10.00 高抗 10.01 20.00 抗 20.01 30.00 感 30.01 高感