ICS 65.020.10 CCS B 05 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 3482 2024 设施沙杵 菇菌种制 作技术规 程 Technical code of strain manufacture for shachu mushroom 2024-06-14 发布 2024-07-14 实施 内蒙古自 治区市 场 监督管理 局 发 布 DB15/T 3482 2024 I 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标 准化 工作 导则 第1 部分：标准 化文 件的 结构 和起草 规则 的 规 定起草。本文件 由内 蒙古 自治 区果 蔬标准 化技 术委 员会（SAM/TC 25）归 口。本文件 起草 单位：内蒙 古 自治区 农牧 业技 术推 广中 心、内蒙 古农 业大 学、内 蒙 古自治 区农 牧业 科学院、内 蒙古 自治 区重 点项 目资金 保障 中心、鄂 尔多 斯市达 拉特 旗农 牧业 综合 行政执 法大 队。本文件 主要 起草 人：鲍红 春、李 志平、李 小雷、于 传宗、贺龙、庞 杰、李文 彪、蒙 可、肖强、贾 晓东、曹慧、刘 艳梅、王 志 林、邓海 峰、王建 民、温 波、焦洁、王 猛、石雅 君、关 美花、季 祥、肖杰、郭芳颖、孔令 江、白佳 琦、董子涵、吕 艳霞、张 文光。DB15/T 3482 2024 1 设施沙杵 菇菌种 制作技术 规程 1 范围 本文件 规定 了设 施沙 杵菇 菌种生 产要 求、菌种 制备、检验、贮 存技 术要 求。本文件 适用 于设 施沙 杵菇 各级菌 种生 产。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款。其 中，注日 期的 引用 文件，仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件；不注 日期 的引 用文件，其 最新 版本（包 括所有 的修 改单）适 用 于 本文件。NY/T 528 食用 菌菌 种生 产技术 规程 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。沙杵菇 shachu mushroom 又名沙 棒槌菇、沙 锤子菇，属于 伞菌 纲、伞 菌亚 目、伞菌 科、鬼 伞属，为 毛 头鬼伞 的一个 变种，因其形 似沙 槌而 得名。菌种 spawn 生长在 适宜 基质 上具 结实 性的菌 丝培 养物，包 括母 种、原 种和 栽培 种。母种 stock culture 经分离、纯 化、杂交、诱 变 等各种 方法 选育 得到 的具 有结实 性菌 丝培 养物 及其 继代培 养物，也 称 一级种。原种 preculture spawn 由母种 移植、扩 大培 养而 成的菌 丝体 纯培 养物，也 称为二 级种。栽培种 spawn DB15/T 3482 2024 2 由原种 移植、扩 大培 养而 成的菌 丝体 纯培 养物，也 称为三 级种。4 生产要 求 技术人 员 菌种生 产的 技术 人员 是经 过培训 能够 掌握 专业 知识、制作 菌种 达到 相关 技术 要求的。场地选 择 严格按 照NY/T 528 执 行。设施、设备 4.3.1 原材料 库 通风、防雨、防 潮、防虫、防鼠、防 火、防杂 菌污 染等。4.3.2 配料室、分 装室 水电方 便，通风 良好、空 间充足，配 料室 配磅 秤、天平、搅拌 机，分装 室配 分装器 等。4.3.3 灭菌室 水电安 全方 便、通风 良好、空间 充足，配有 高压 灭 菌锅或 灭菌 柜、消防 等设 施。如 果使 用煤、天然气加热，要 求灭 菌设 施的 出料门 与加 热灶 有隔 断设 施。4.3.4 冷却室 及接 种室 洁净、防尘。冷却 室通 风 良好，配紫 外灯；接种 室 门口设 缓冲 间或 风淋 室，配有超 净工 作台、接 种枪、高 压泵、酒 精灯、紫 外灯、防火 设备 等。4.3.5 培养室 洁净、水电 畅通、通 风良 好，配 有恒 温培 养箱 或培 养架、摇床、发 酵罐、空 调、杀 菌设 备等。4.3.6 检验室 水电方 便，利于 装备 相应 的检验 设备 和仪 器。容器 4.4.1 母种 玻璃试 管（18 mm 180 mm 或20 mm 200 mm）或平 板 培养皿（90 mm 90 mm 或70 mm 70 mm），试管塞带 有砂 芯或 者不 带砂 芯的硅 胶塞。4.4.2 原种 耐高温 高压 的带 有透 气盖（膜）玻璃 瓶或 聚丙 烯塑 料瓶（袋）。4.4.3 栽培种 耐高温 高压 的聚 丙烯 塑料 瓶（袋）。DB15/T 3482 2024 3 原料 葡萄糖、琼 脂、食用 菌专 用石膏 等化 学试 剂，麦麩、玉米 秸、玉米 芯、沙蒿 粉、羊 粪、马铃 薯等 要求新鲜、干 燥、无虫、无 霉变。5 菌种制 备 培养基 制备 5.1.1 母种 配方为 马玲 薯200 g(煮汁)、葡萄 糖20 g、琼 脂20 g、水 1000 mL。母 种分 装至试 管中，分 装量应掌握 在试 管长 度 的 1/4。5.1.2 原种和 栽培 种 配方为 玉米 秸 丝 35%、玉 米芯35%、羊 粪 28.5%、石 膏粉1.5%、含水 量 50%55%。装 入培 养基 不超玻璃菌 种瓶 或者 聚丙 烯塑 料菌种 瓶的 最大 刻度 线，分装至 瓶肩 处为 宜。不 论 哪种培 养方 式，管 口或 瓶 口必须干 净，均需 留有 一定 的空间，避 免在 菌种 运输 或者培 养的 过程 中造 成污 染。灭菌 母种培 养基 采用 高压 灭菌，在高 压 121 123（0.11 MPa 0.15 MPa）条件下 灭 菌 20 min 25 min，自 然冷 却 到 50 左右 时，取出 试管 摆放 成斜面 顶端 距试 管口 不超 试管长 度的 五分 之一。原种和 栽培 种培 养基 采用 常压或 高压 灭菌，在 高 压121 123（0.11 MPa 0.15 MPa）条件下灭 菌2 h 2.5 h。常 压 100 105 灭菌10 h 12 h，原 种和 栽培 种 取出备 用。接种 5.3.1 接前准 备 将试管 培养 基、原种、栽 培 种用常 压或 高压 灭菌 冷却 后的培 养基，从 容器 中取 出 后，放 入接 种室 内，消毒方 法可 以用 紫外 线灯 或1%的 过氧 乙酸 喷雾 消毒。消毒 时间 为紫 外线 杀菌15 min，过 氧乙 酸4 h，通入无菌 风，待室 内空 气无 味后就 可以 于超 净工 作台 内进行 接种 工作。5.3.2 母种 在菌丝 团与 菌蕾 上剥 取约1 mm 组 织接 入装 有PDA 培养 基的试 管中 培养。5.3.3 原种和 栽培 种 取出制 作好 的沙 杵菇 母种，在超 净化 工作 台内，取 一块母 种，迅速 放入 原种 培养基 内，盖上 原种 瓶盖。按 同样 步骤 取出 原种，进行 栽培 种接 种。培养 母种、原种、栽 培种 对培 养温度 有严 格的 要求，母 种培养 在25 环境 下，原 种和栽 培种 一般 控 制在21 23。6 检验 DB15/T 3482 2024 4 母种感 官检 验标 准见 表 1。表1 沙杵菇 母种 感官 检验 标准 指标 标 准 容器 洁净、无破损 棉塞或其它盖体 干燥、松紧适中、能达到透气和过滤作用 培养基装入量 为试管总容积的1/4，培养皿高 的1/41/3 菌 种 外 观 菌丝总生长量 长满斜面或平板 菌丝体颜色 浓白，菌落中心微黄 菌丝体形态 粗壮，气生菌丝多 菌丝体表面 生长均匀、舒展、平整 菌丝体分泌物 无 菌落边缘 整齐 杂菌菌落 无 斜面或平板背面外观 培养基湿润、无积水、颜色均匀、无暗斑、无色素 原种感 官检 验见 表 2。表2 沙杵菇 原种 感官 检验 标准 指标 标 准 容器 洁净、无破损 棉塞或其它盖体 干燥、松紧适中、能达到透气和过滤作用 培养基上表面距容器距离 5.0 cm 5.5 cm 菌 种 外 观 菌丝生长总量 长满培养基 菌丝体颜色 浓白、色泽一致 菌丝体形态 生长健壮，均匀、整齐 培养基及菌丝体 紧贴瓶壁、湿润不干缩 菌丝体分泌物 无 杂菌菌落 无 子实体原基 无 栽培种 感官 检验 标准 见 表3。DB15/T 3482 2024 5 表3 沙杵菇 栽培 种感 官检 验标 准 指标 标 准 容器 洁净、无破损 棉塞或其它盖体 干燥、松紧适中、能达到透气和过滤作用 培养基上表面距容器距离 5.0 cm 5.5 cm 菌 种 外 观 菌丝总生长量 长满培养基 菌丝体颜色 浓白、色泽一致 菌丝体形态 生长均匀、粗壮、整齐 培养基及菌丝体 紧贴瓶壁、湿润不干缩 菌丝体分泌物 无 杂菌菌落 无 子实体原基 无或出现数量5%7 贮存 菌种检 验完 成后 及时 贮存，详细 记录 各生 产环 节。贮 存空间 应避 光，适当 通风，并定期 进行 杀菌。母种 沙杵菇 的母 种培 养好 后可 以在3 5 条件 下贮存8个月。原种和 栽培 种 原种和 栽培 种贮 存的 方法 与母种 类似，时 间不 能超 过 50 d。