ICS 71.100.70 Y42 DB37 山东省 地 方 标 准 DB 37/T 3312 2018 化妆品中斑蝥素含量测定 气相色谱法 Determination of Cantharidin in Cosmetic by Gas Chromatography 2018-06-12 发布 2018-07-12 实施 山东省质量技术监督局 发布 DB37/T 3312 2018 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009 给出 的规则起 草。本标准由山 东省质量 技术监督 局提出。本标准由山 东化工标 准化技术 委员会归 口。本标准起草 单位：山 东省产品 质量检验 研究院、山东福瑞 达生物工 程有限公 司。本标准主要 起草人：刘 爽、于燕萍、刘倩倩、康 兆广、徐楠、刘莉、沈 荣静、朱海 荣、刘 金凤、王东岳、赵丽 芳、周莉 莉、张娟、杨 素珍。DB37/T 3312 2018 1 化妆品中斑蝥素含量测定 气相色谱法 1 范围 本标准规定 了化妆品 中斑蝥素 含量的气 相色谱测 定方法。本标准适用 于发用类 化妆品中 斑蝥素含 量测定方 法。该方法取样 量为2 g 时，检出限1 mg/kg，定量限5 mg/kg。2 规范性引用 文件 下列文件对 于本文件 的应用是 必不可少 的。凡是注 日期的引 用文件，仅所注日 期的版本 适 用于本文件。凡是不 注日期的 引用文件，其最新 版本（包 括所有的 修改单）适用于本 文件。GB/T 6682 分析实验 室用水规 格和试验 方法 3 方法提要 化妆品中的 斑蝥素用 三氯甲烷 萃取，用具 有氢火焰 离子化检 测 器的气 相色谱仪 测定，以 保 留时间定性，外标法 定量。4 试剂和材料 除另有说明 外，所用 试剂均为 色谱纯，水为GB/T 6682 规定 的一级水。4.1 高纯氮（99.999%）。4.2 高纯氢（99.999%）。4.3 高纯空气（99.999%）。4.4 三氯甲烷。4.5 氯化钠：分 析纯。4.6 斑蝥素标准 品，纯度 94.0%。4.7 斑蝥素标准 储备溶液(C10H12O4)=1 g/L：称 取斑蝥素 标准品 0.1 g（精 确至 0.0001 g）置于 100 mL 容量瓶中，三 氯甲烷定 容至刻度，储存于 玻璃瓶中。5 仪器 和设备 5.1 气相色谱仪：具氢火 焰离子化 检测器的 气相色谱 仪。5.2 分析天平：感 量 0.0001 g。6 分析步骤 6.1 样品预处理 DB37/T 3312 2018 2 6.1.1 液体样品 精确称取 2 g（精确 到 0.0001 g）样品 于试管中，氮吹至 近干，用 5 mL 水 溶解，并 转移 至 25 mL分液漏斗中，加入 0.5 g 氯化钠 溶 解，取 2 mL 三 氯甲烷分 两次润洗 盛有样品 的试管后 加 入到分液漏 斗中，震荡 30 s 后静置 分层，取 下层有机 相，定容至 2 mL，经 0.45 m 有机滤膜 过滤后，滤液待测。6.1.2 乳状样品 精确称取2 g（精 确到0.0001 g）样品 于25 mL烧杯 中，用5 mL 水 溶解，并 转移至25 mL 分 液漏斗中，加入0.5 g 氯化 钠 溶 解，取2 mL 三氯 甲烷先润 洗盛有样 品的烧杯 后加入 到分液 漏斗中，震 荡30 s 后静 置分层，取下 层有机相，定容至2 mL，经0.45 m有 机滤膜过 滤后，滤 液待测。6.2 色谱参考条 件 6.2.1 色谱柱：HP-5 毛 细管色谱 柱（30 mm 320 m 0.25 m）固定 相为(5%-苯基)-甲 基聚硅 氧烷。或具有相同 分离效果 的其它色 谱柱均可。6.2.2 进样口温度：230，不分流。6.2.3 检测器温度：300。6.2.4 柱温(程序 升温)：初 始温度 100，保 持 1 min，以 35 min 升到 160，保持 1 min，以 5 min 升到 200，保持 1 min，以 35 min 升到 280，保持 2 min。6.2.5 气体流量 载气(N2)：1.5 mL/min；空 气：300 mL/min；氢气：30 mL/min。6.2.6 进样量：1 L。6.3 标准曲线的 绘制 将 1 g/L 的斑 蝥素标准 储备液（4.7）梯 度稀释一 系列浓度 为5.00 mg/L、10.00 mg/L、50.0 mg/L、100 mg/L、200 mg/L 的标准 工作溶液。按色谱 条件（6.2）由 低到高依 次进样 测 定，以 色 谱峰峰面积 为纵坐标，对 应的溶液 浓度为横 坐标作图，绘制标 准工作曲 线。标准 物质色谱 图参见附 录A。6.4 试样测定 取预处理后 的待测液（6.1），按照色谱 条件（6.2）进行 测定，记 录色谱峰 的保留时 间 和峰面积，由色谱峰的 峰面积可 从标准曲 线上求出 斑蝥素的 浓度。样品 溶液中斑 蝥素的响 应值均应 在 仪器测定的 线性范围之内，斑蝥素 含量高 的试样可 取适量 待测液（6.1）用 三氯甲烷 稀释后 进行测定。同时进行空 白试验及平行 试验。6.5 分析结 果表述 斑蝥素的含 量 按式（1）计算，计算结 果应扣除 空白值：mV c c)(0（1）式中：样 品中 斑蝥 素 的质量 浓度，单 位为毫克 每千克（mg/kg）；c 标准曲 线查得样 品中 斑蝥 素 的浓度，单位为 毫克每升（mg/L）；c0 标准曲 线查得空 白中 斑蝥 素 的浓度，单位为 毫克每升（mg/L）；V 样品的 定容体积，单位为 毫升（mL）；m 样品质 量，单位 为克（g）。DB37/T 3312 2018 3 7 允许差 在重复性条 件下获得 的两次独 立测试结 果的绝对 差值不得 超过算术 平均值的 10%。DB37/T 3312 2018 4 A A 附 录 A（资料性附 录）标准物质气 相色谱图 图A.1 斑螯素标准 物质气相 色谱图 _