ICS 65.150 B 52 DB34 安 徽 省 地 方 标 准 DB 34/T 24782015 中华草龟亲本质量要求 The quality standard of parental Chinese reevesii 文稿版次选择 2015-09-08 发布 2015-10-08 实施安徽省质量技术监督局 发 布 DB34/T 24782015 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本标准由安徽省农业大学提出。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：安徽农业大学、安徽蓝田特种龟鳖有限公司、无为县水产局、南陵县渔业渔政管理中心。本标准起草人：韦众、奚业文、张晓华、陈德贵、曹全民、丁淑荃、项旭东、刘映彬、金根东、章星明、任青松。DB34/T 24782015 1 中华草龟亲本质量要求 1 范围 本标准给出了中华草龟（Chinemys reevesii）亲本质量的定义与术语、亲本种质、亲本选择要求。本标准适用于中华草龟的种质检测与亲本选择。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 18654.1 养殖鱼类种质检验 第1部分:检验规则 GB/T 18654.2 养殖鱼类种质检验 第2部分:抽样方法 GB/T 18654.3 养殖鱼类种质检验 第3部分:性状测定 GB/T 18654.4 养殖鱼类种质检验 第4部分:年龄与生长的测定 GB/T 18654.12 养殖鱼类种质检验 第12部分:染色体组型分析 GB/T 18654.13 养殖鱼类种质检验 第13部分:同工酶电泳分析 3 术语和定义 下列术语和定义适合于本文件。3.1 背甲长 背甲（中线）前缘至背甲后缘的直线距离。3.2 背甲宽 背甲中段左、右侧外缘的距离。3.3 体高 龟体中部的最大垂直高度。3.4 腹甲长 腹甲（中线）前缘至腹甲后缘的距离。DB34/T 24782015 2 3.5 腹甲宽 腹甲左、右外缘间的距离。3.6 眼间距 两眼眶上缘之间的距离。3.7 前肢长 前肢自然伸长时，从基部到末端的距离。3.8 后肢长 后肢自然伸长时，从基部到末端的距离。3.9 尾长 从尾基部到尾末端的距离。4 亲本种质 4.1 学名与分类 4.1.1 学名 中华草龟Chinemys reevesii。4.1.2 分类 脊索动物门（Chordata）、脊椎动物亚门（Subphylum）、爬行纲（Reptilia）、龟鳖目（Chelonia）、龟科（Testudinidae）、水龟属（Clemmys）。4.2 外形形态 体为长椭圆形，背甲稍隆起，有 3 条纵棱，脊棱明显；头翠绿或墨绿色，前部皮肤光滑，后部具细鳞；腹甲平坦，后端具缺刻；颈部、四肢及裸露皮肤部分为灰黑色或黑橄榄色，四肢较扁平，趾间具有全蹼。雄性体型较小，尾长，有臭味，性成熟时背甲以及腹甲墨黑色，皮肤墨绿纹消退，变黑色；雌性背甲由浅褐色到深褐色，腹甲棕黑色，尾较短，体无异味。中华草龟外部形态见图1。DB34/T 24782015 3 图1 中华草龟外部形态 4.3 可量性状 不同阶段中华草龟可量性状实测比值见表1。抽样参照 GB/T 18654.2 的规定执行，性状测参照按GB/T 18654.3 的规定执行。形态参数间的相互关系参见附录A。表1 中华草龟的可量比例性状（平均值标准差）形态参数 后备龟(3+)亲龟(8+)雌龟(976 g)雄龟(8910 g)雌龟(56858 g)雄龟(426125 g)背甲宽/背甲长 0.6760.028 0.6640.033 0.6640.027 0.6750.043 体高/背甲长 0.3920.115 0.4370.026 0.4190.122 0.4420.036 腹甲长/背甲长 0.8720.032 0.8570.051 0.9420.039 0.9320.047 腹甲宽/背甲长 0.5770.032 0.5800.033 0.6190.026 0.5920.036 眼间距/背甲长 0.1120.026 0.0970.012 0.0770.004 0.0950.011 前肢长/背甲长 0.4160.070 0.4320.065 0.4230.128 0.4380.127 后肢长/背甲长 0.5080.073 0.5200.051 0.4420.242 0.4690.193 尾长/背甲长 0.3810.041 0.4170.034 0.2770.085 0.2730.124 4.4 生长 中华草龟的背甲长、背甲宽、背甲高及体重之间关系见表2。表2 中华草龟的个体形态参数间的相互关系 性别 形态参数 关系式（n=84）雌龟 背甲长（L1）与体重（W）的关系 W=0.190*L12.974（r=0.962）背甲宽（L2）与体重（W）的关系 W=0.794*L12.874（r=0.959）雄龟 背甲长（L2）与体重（W）的关系 W=0.115*L13.081（r=0.964）背甲宽（(L1)与体重（W）的关系 W=0.714*L2 2.880（r=0.956）4.5 遗传特性 细胞遗传学特性和生化遗传学特性指标参见附录B。DB34/T 24782015 4 5 亲本选择 5.1 来源 作为繁殖亲本，应选择长江中下游自然种群。野生草龟、温室草龟和常温池塘草龟的辨别见表3。表3 温室草龟、常温池塘草龟和野生草龟的辨别 指标 野生草龟 常温池塘草龟 温室草龟 生长环境 自然环境 温室 1 年常温池 34 年 全温室 生长速度 缓慢 较快 快 体色 头部翠绿或墨绿色，肤色较深，壳色较鲜艳。头部可见绿色，壳或有浅铁锈色 肤色泽苍白，壳缺乏质感 壳生长纹 生长纹细密 有冬眠，生长纹较宽 无冬眠，无或具放射状假生长纹 腹甲 粗糙而厚实 较光滑 光滑而较薄 警觉性 惧人 惧人不明显 不惧人 5.2 年龄 自然种群，雌雄龟性成熟均为 5+龄。亲本选择雌龟 6+15+龄，雄龟 5+10+龄为宜。年龄测定以龟背甲盾片上同心环纹的多少来推算，参照 GB/T 18654.4 的规定执行。5.3 体重 雌龟600 g，雄龟250 g。5.4 体征 成熟的雄龟全身变成黑色，气味浓烈，尾部粗壮，爪子有力；成熟的雌龟仍是原来棕褐色，体表光滑，颜色稍深，背厚，爪子基部肥厚，脂肪堆积明显。5.5 产卵期 5 月底至 9 月份为产卵期，产卵高峰为 6 月份至 8 月份。5.6 繁殖力 雌亲龟年产卵 34 次，每次产 38 枚。DB34/T 24782015 5 A A 附 录 A（资料性附录）中华草龟的个体形态参数间的相互关系 A.1 雌龟 A.1.1 背甲长（L1）与体重（W）的关系 W=0.190*L12.974（r=0.962）A.1.2 背甲宽（L2）与体重（W）的关系 W=0.794*L22.874（r=0.959）A.2 雄龟 A.2.1 背甲长（L1）与体重（W）的关系 W=0.115*L13.081（r=0.964）A.2.2 背甲宽（L2）与体重（W）的关系 W=0.714*L22.880（r=0.956）A.3 式中单位 W 雌龟体重（g）W 雄龟体重（g）L1 背甲长（cm）L2 背甲宽（cm）DB34/T 24782015 6 B B 附 录 B（资料性附录）中华草龟的遗传学特性 B.1 细胞遗传学特性 B.1.1 染色体 体细胞染色体数：2n=52，臂数 NF=80。B.1.2 核型 根据对龟二倍体染色体长度、相对长度和臂比的统计结果，可将核型分为 A、B、C 三组，A：9 对中部和亚中部着丝粒染色体；B：5 对亚端部和端部着丝粒染色体；C：12 对微小染色体。核型公式：18 ITI+10 st+24 t（染色体核型见图B.1）。染色体核型分析参照 GB/T 18654.12 的规定执行。图B.1 中华草龟染色体核型图 B.2 生化遗传学特性 B.2.1 平板电泳分析 对肌肉、肝脏中 3 种同工酶进行聚丙烯酰胺平板电泳分析。恒压电泳，分离胶浓度 5.7。同工酶电泳分析参照 GB/T 18654.13 的规定执行。B.2.1.1 乳酸脱氢酶（LDH）中华草龟在肌肉中表现为 5 条谱带，其中 2 条强带，3 条弱带（见图B.2），在肝脏中有 4 条谱带（见图B.3）。DB34/T 24782015 7 图B.2 中华草龟肌肉中乳酸脱氢酶电泳图谱 图B.3 中华草龟肝脏中乳酸脱氢酶电泳图谱 B.2.1.2 苹果酸脱氢酶（MDH）中华草龟 MDH 同工酶在肌肉中表现为 5 条谱带，其中 3 条强带，2 条弱带（见图B.4）；肝脏有 3 条谱带（图B.5）。图B.4 中华草龟肌肉中苹果酸脱氢酶电泳图谱 图B.5 中华草龟肝脏中苹果酸脱氢酶电泳图谱 DB34/T 24782015 8 B.2.1.3 酯酶（EST）中华草龟肌肉中有 3 条谱带，其中 1 条强带，2 条弱带（见图B.6），在肝脏中则为 3 条强带，2 条弱带（见图B.7）。图B.6 中华草龟肌肉中酯酶电泳图谱 图B.7 中华草龟肝脏中酯酶电泳图谱 B.3 检测规则与结果判定 参照 GB/T 18654.1 的规定执行。_