ICS 65.020.20 CCS B 61 45 广 西 壮 族 自 治 区 地 方 标 准 DB45/T 2801 2023 大黄精组 培苗生 产技 术规程 Code of practice for tiss culture seedling of Polygonatum kingianum 2023-12-26 发布 2024-02-01 实施 广西壮族 自治区 市场监 督管理 局 发 布 DB45/T 2801 2023 I 前 言 本文件按照GB/T 1.1 2020 标准化 工作导则 第1 部分：标准化文 件的结构 和起草规则 的规定起草。请注意本文 件的某些 内容可能 涉及专利。本文件 的发 布机构不承 担识别专 利的责任。本文件由 广 西壮族自 治区农业 农村厅提 出、归口 并宣 贯。本文件起草 单位：桂 林亦元生 现代生物 技术有限 公司。本文件主要 起草人：苏钰琴、廖红梅、莫燕兰、汤雪 莲、黎颖菁、蒋臻韬、蒋玉梅、吴优利。DB45/T 2801 2023 1 大黄精组 培苗生 产技术 规程 1 范围 本文件规定了 大 黄精（Polygonatum kingianum）组 培苗生产的程序，界 定了大 黄精组培苗 的术语和定义，规 定了培育 技术、包 装、运输 的技术要 求，给出了生产 档案的操 作指示。本 文件适用 于 广西壮 族自治区 行政区域 内 大黄精 组培 苗 生产。2 规范性引用 文件 下列文件中 的内容通 过文中的 规范性引 用而构成 本文 件必不可少 的条款。其中，注日 期的引用 文件，仅该日期对 应的版本 适用于本 文件；不 注日期的 引用 文件，其最 新版本（包括所有 的修改单）适用于 本文件。GB/T 6543 运输包装 用单瓦楞 纸箱和双 瓦楞纸 箱 GB/T 8321（所有部分）农药 合理使用 准则 GB 15569 农业植物 调运检疫 规程 LY/T 2290 林木种苗 标签 3 术语和定义 下列术语和 定义适用 于本文件。3.1 大黄精 Polygonatum kingianum 又名滇黄精、德保黄 精，属百 合科黄精 属植物。4 组培苗繁育 外植体选取 4.1 从4年生的 块 状根茎 中，筛选出 遗传性状 稳定、无病 虫 危害、重量 2.4 kg、单个结节 重量 0.26 kg、长 10 cm、宽3 cm 6 cm的 根茎。记录 4.2 每份外植体 材料按株 系 建立信 息档案，包括品种 名称、种植地点、海拔高 度、田间 环境概况、取材时间和取材 人员等，必要时对 取材的外 植体进行 全株 拍照。灭菌前处理 4.3 将大黄精 根茎 用清水洗 净，用75 酒精进行 表面消毒，用解剖刀切 取3 cm 5 cm的隐芽，将外层 鳞片剥掉35 层，放入 消毒瓶中，每瓶放3 6 个芽。DB45/T 2801 2023 2 灭菌 4.4 在超净工作台中，带上防 护胶手套，向消毒瓶中 加入0.1 氯化汞溶 液，氯化汞 溶液没过 外植体，振荡消毒8 min10 min，然后 用无菌水 冲洗4次以 上。废液处理 4.5 灭菌后的 氯化汞 溶液集中 收集，将pH 调至810，加 入过量的硫化钠，生成硫 化汞沉淀，再加入共沉淀剂硫酸 亚铁，静 止24 h 排除清 液，残渣 用焙烧 法 回收汞。诱导培养 4.6 在超净工作台 上，用解 剖刀将隐 芽上的 鳞 片 全部剥开，切取0.5 cm1.5 cm大 小的生长 点，接种 在诱导培养基（附 录A）中，拧紧瓶盖，放入培养 室中 培养，培养室温 度保 持在2428，当外植 体萌发新芽时，每天光照8 h 10 h，强度 为1800 lx 2200 lx，培养20 d30 d，得到丛 生芽。按 附录B的表B.1记载组培 生产情况。继代培养 4.7 在超净工作台上，将丛生芽切成1 cm大小的单芽，转入增殖培养基（附录A）中，以单芽触到培养基表面为宜。在暗室培养至长出新芽时加强光照，每天用1800 lx2200 lx的光连续照10 h，培养室温度白天保持 在2528，夜 间保持在20 25，得到丛生芽。按 附录B 的表B.1 记录 组培 生产情 况。生根培养 4.8 在超净工作 台上，将继 代苗切 成1 cm2 cm 大 小的单芽，转接入生根 培养基（附录A）中，放入暗 室培养，至单芽长 出新芽新 根时加强 光照，每天 光照10 h，强度为1 800 lx2 200 lx，白天温度 保持在24 28，夜间保 持20 24，直至 长出3 条根系 以上、叶绿茎 粗、苗 高达培 养瓶2/3。按附录B的表B.1记载组培生 产情况。5 营养杯苗繁 育 大棚选址及 要求 5.1 温室大棚方 位应背风 向阳，排 灌良好，大棚覆盖 材料 采用透光性 强、保温 性好的塑 料薄膜、阳光板或玻璃等，配备喷淋、控温、调湿及遮 阳设备和 防虫 网 等设施。遮阳网的 遮光度为70 90。大棚灭菌 5.2 移栽前7 d 10 d 将 温室大棚 密闭，采用硫磺 熏蒸法消 毒灭菌，按 每平方米 用硫磺4 g、多菌 灵0.2 g、锯末8 g，于傍晚时，每隔3 m的距 离堆放锯 末，摊平 后撒一层搅拌 均匀的硫 磺和多菌 灵，逐个 点燃，熏蒸24 h48 h，打开大 棚 门和边 膜通风透 气1 d2 d可 移栽。基质装杯 5.3 选取疏松、透 气、透水 的泥土,与充分腐 熟的农家 肥或 有机肥按 8:2 比例充 分拌匀成 基质，装 入8 cm8 cm的 营养杯，整齐摆放 于育苗 棚内，摆 放宽度100 cm120 cm，其间设 置30 cm 宽的工 作通道。DB45/T 2801 2023 3 炼苗 5.4 当年10 月至翌 年1月，将 生根的组 培瓶苗移 入大棚，整齐摆放炼苗7 d15 d。如遇晴 天，用遮光 率70 90 的遮阳网 进行遮阳；移栽前3 d 将瓶 盖打 开，用1百 菌清对小 苗喷雾消 毒。移栽 前1 d 向瓶苗内淋入适 量的洁净 水。移栽 5.5 采用 遮光率 为7090 的遮 阳网遮阳，将炼苗后 的 组培瓶苗取 出，洗净根部 培养基，移 栽到营养杯中，淋 透定根水，以根 不外露，根土 密接，植株固 定不倒为宜。苗床 上用塑料 薄膜搭制 小拱棚，应通风保湿，15 d后可 撤掉小拱 棚。大棚育苗技 术 5.6 5.6.1 环境要求 小苗长出新 芽和新根 前，晴天大 棚覆盖遮 阳网；小苗 长出新芽和 新根后揭 去遮阳网。棚内温度 宜保持在15 30。棚 内空气相 对湿度宜 持在60 80。5.6.2 水肥管理 每天早上或下午喷雾12 次，每次10 min 左右。当小 苗长出新芽时，每亩喷施0.1 的壮苗叶面肥60 kg；长 出一片以 上新叶时，每亩淋 施0.1 的 腐植 酸钾肥60 kg；长出 两片，分 别淋施0.3 的腐植 酸钾、复合肥（15:15:15）各1次，每667 m2施用60 kg。5.6.3 苗期病虫害 防治 大黄精苗期主要 受叶斑病，根腐病为 害。坚持预 防为 主，防治结合，以农业防 治、生物防 治为主，化学防治为 辅的原则。化学防 治时，所 用药剂应 符合GB/T 8321 的 规定，具 体防治方 法见附录C。苗木出圃 5.7 5.7.1 出圃时间 3月4月，气温应定 在15 以 上。5.7.2 苗木质量 苗高达到12 cm，茎杆直径 达到0.15 cm以上，具2 张以 上完全叶的 健壮苗。5.7.3 种苗检验检 疫 应按照GB 15569 执行。包装 5.8 种苗标签应 符合LY/T 2290 的规定；包装 箱材料 应符 合GB/T 6543 的规定。运输 5.9 运输车应具 遮避风雨 条件。运输途中，需 对苗木采 取 保湿、保 温、通 风、防日晒等 措施，农业植物检疫证书随 车同行。苗木运到 目的地后，放置于 阴凉 通风处。DB45/T 2801 2023 4 6 生产档案 对 外植体来 源、种苗 繁育各环 节、肥料（种类、施用 时间、施用 量、施用 方法）、农药（种 类、施用量、施用时 间和方法）、气象资料 及小气候 等进行详 细记录，并建 立生产档 案。按附录B 的表B.2 记录。DB45/T 2801 2023 5 A A 附录A（资料性）大黄精组培 培养基配 方 大黄精组培 培养基配 方见表A.1。表A.1 大黄精组培 培养基配 方 类别 培养 基配 方 诱导 培养 基 MS BA2.0 mg/L KT1.0 mg/L NAA0.1 mg/L 白糖3 琼脂4.5 g/L，pH5.8 增殖 培养 基 MS BA1.0 mg/L KT1.0 mg/L NAA0.1 mg/L 白糖3 琼脂4.5 g/L，pH5.8 生根 培养 基 1/2MS NAA1.0 mg/L IBA0.15 mg/L 活性 炭1.5 g/L 白糖3 琼脂4.5 g/L，pH5.8 DB45/T 2801 2023 6 B B 附录B（资料性）大黄精组培 生产档案 大 黄精组培 生产记录 表 见表B.1，营养杯 苗生产 档案 记录表见表B.2。表B.1 大黄精组培 生产记录 表 品种：实 验人：培养 阶段 培养 基配 方 培养 条件 记录 日期 生长 情况 记录 观察 表B.2 大黄精营养 杯苗生产 档案记录 表 No.:大棚 号：时 间：年 月 日 天气情况：气温/湿度：风力/风向：病虫 害情 况 防治 措施 有/无 病虫 害 病虫 害名 称 危害 程度 DB45/T 2801 2023 7 C C 附录C（资料性）大黄精组培 苗苗期主 要病虫的 化学防治 大黄精组培 苗苗期主 要病虫的 化学防治 见表C.1。表C.1 大黄精组培 苗苗期主 要病虫的 化学防治 主要 病虫 药剂 名称 剂型 防治 时期 施用 方法 施用 量/667 m2 叶斑 病 百菌 清 75 可湿 性粉 剂 发病 初期 喷雾 100 g120 g 代森 锰锌 80 可湿 性粉 剂 发病 初期 喷雾 60 g 根腐 病 大蒜 素 5微 乳剂 发病 初期 灌根 525 ml650 ml 枯草 芽孢 杆菌 1000 亿 芽孢/g 可湿 性粉 剂 发病 初期 灌根 20 g 25 g