ICS 67.120.30 B 50 DB37 山东省 地 方 标 准 DB 37/T 3626 2019 水产品中 石油烃的 测定 Determination of petroleum hydrocarbons in fishery products 2019-07-23 发布 2019-08-23 实施 山 东 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB37/T 3626 2019 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范 性引 用文 件.1 3 方法 原理.1 4 分子 荧光 分光 光度 法.1 4.1 试 剂和 材料.1 4.2 仪 器和 设备.2 4.3 样品.2 4.4 分 析步 骤.2 4.5 结 果计 算与 表示.2 4.6 检 出限、回 收率 和精 密度.3 5 紫外 分光 光度 法.3 5.1 试 剂和 材料.3 5.2 仪 器和 设备.3 5.3 分 析步 骤.3 5.4 结 果计 算与 表示.3 5.5 检 出限、回 收率 和精 密度.4 DB37/T 3626 2019 II 前 言 本标准 按GB/T 1.1-2009 给 出的规 则起 草。请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利，本文 件的 发布机 构不 承担 识别 这些 专利的 责任。本标准 由山 东省 农业 农村 厅 提出 并监 督实 施。本标准 由山 东省 渔业 标准 化技术 委员 会(TC 03)归口。本标准 起草 单位：山 东省 海洋资 源与 环境 研究 院、山东省 海洋 环境 监测 中心。本标准 主要 起草 人：孙 珊、齐 延民、马元 庆、张昀 昌、王 立明、赵玉 庭、由丽 萍、李 佳蕙、董晓 晓、白艳艳、苏 博、何鑫、张 秀珍。DB37/T 3626 2019 1 水 产品中 石油烃的 测定 1 范围 本标准 规定 了测 定水 产品 中石油 烃的 分子 荧光 分光 光度法、紫 外分 光光 度法。本标准 适用 于鱼 类、甲壳 类、贝 类等 主要 水产 品可 食用部 分中 石油 烃的 测定。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于 本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 6682 分 析实 验室 用 水规格 和试 验方 法 GB 17378 海洋 监测 规范 GB/T 30891 水 产品 抽样 规范 3 方法原 理 试样用 氢氧化 钠-乙 醇水 溶 液皂化，用二 氯甲 烷萃取 并用氧 化铝吸 附，蒸发二 氯甲烷 后使用 合适 溶剂溶解；在 激发 波长310 nm，发 射波 长345 nm 处 进行 荧光分 光光 度测 定；在波 长225 nm 处进 行紫 外分 光光度测 定。4 分子荧 光分 光光 度法 4.1 试剂和 材料 除非另 有说 明，所有 试剂 均为分 析纯，水 为GB/T 6682 规定 的二 级水。4.1.1 氢氧化 钠：优级 纯。4.1.2 无水乙 醇：优级 纯。4.1.3 氯化钠。4.1.4 二氯甲 烷：优级 纯。4.1.5 氧化铝：100 目200 目，取氧化 铝于 陶瓷 蒸发 皿，置于马 弗炉 内550 下 加 热 4 h，在炉 内 冷却至 约200 后，移入 干 燥器中 冷却 至室 温，于磨 口玻璃 瓶内 加盖 保存。4.1.6 无水硫 酸钠：优 级纯，处 理过程 见 4.1.5。4.1.7 环己烷：优 级纯，荧 光强 度应不 超过 标准 油品(0.1 mg/mL)相对 荧光 强度 的 1%。4.1.8 氢氧化 钠溶 液：称取 氢氧 化钠(4.1.1)240 g 溶于 水 中，加 水 至 1 000 mL。4.1.9 氯化钠 溶液：饱 和溶 液。4.1.10 石油类 标准 储备 液(1 000 mg/L)。4.1.11 石油类 标准 使用 液(100 g/mL)：移 取5.00 mL 石 油 类标准 储备 液(4.1.10)于 50 mL 容 量瓶中，用 环己 烷(4.1.7)稀 释至标 线，混匀。DB37/T 3626 2019 2 4.1.12 玻璃层 析柱：内 径10 mm，长约 200 mm，清洗 干净，干燥后 在柱 头装 入少 许玻 璃毛或 脱脂 棉，待用。4.1.13 吸附柱：将 使用 二氯 甲烷(4.1.4)浸泡 的氧 化铝(4.1.5)缓慢 倒入 玻璃 层析 柱(4.1.12)，填 充高度约 为100 mm，再 加入 无 水硫酸 钠(4.1.6)，填充 高度约 为 10 mm。4.2 仪器和 设备 4.2.1 分子荧 光光 度计：分 辨 率1.0 nm，狭 缝1 nm 20 nm，波长 范 围200 nm 500 nm，并 配有1 cm 石英比 色皿。4.2.2 分析天 平：感 量0.001 g；4.2.3 旋转蒸 发器；4.2.4 恒温摇 床：频 率90 rpm 150 rpm，控温 范围30 50；4.2.5 实验室 常用 仪器 和设 备。4.3 样品 样品的 采集 和保 存等 按照GB 17378、GB/T 30891 的 规 定执行。4.4 分析步 骤 4.4.1 工作曲 线的 测定：a)分别量 取 0 mL、0.10 mL、0.30 mL、0.50 mL、0.70 mL、0.90 mL 油标 准使 用溶液(4.1.11)于具塞 圆底 瓶中；b)加入20 mL 氢氧 化钠 溶液(4.1.8)和20 mL 无水 乙醇(4.1.2)，放 入恒 温摇 床 于35 中避 光振荡5 h，至 混合 均匀；c)混合液 转入 锥形 分液 漏斗 中，用 10 mL 二氯 甲烷 洗涤 圆底瓶，合并 至锥 形 分 液 漏斗中，加 30 mL 饱和氯 化钠 溶液(4.1.9)和100 mL 水，剧 烈震 荡(注 意放气)，静置 分层(若 分 层不好，应 延长静置时 间)，收 集有 机相；d)用10 mL 二 氯甲 烷再 萃取 一次，合并 有机 相；e)35 45 旋 转蒸 发近 干，用 少量 二氯 甲烷 溶解，全量转 移至 吸附 柱(4.1.13)过柱，用10 mL二氯甲 烷 以2 mL/min 的 流 速淋洗，收 集全 部淋 洗液，旋转 蒸发 近干；f)氮吹吹 干，准确 加 入 10.0 mL 环 己烷 涡旋 混合，待 测；g)以1 mL 环 己烷(4.1.7)代 替样品，按 照步 骤4.4.1.b)4.4.1.f)制备 空 白试 样；h)将环己 烷溶 液(4.4.1.f)移入 1 cm 石 英比 色皿 内，按 选定的 仪器 参数 测定 相对 荧光强 度(Ii)；以同样 方法 测定 空白 试样(4.4.1.g)相 对荧 光强 度(Ib)；以 相对 荧光强 度(Ii-Ib)为纵 坐标，相应的石 油烃 的浓 度(g/mL)为横 坐标，绘 制工 作曲 线。4.4.2 试样的 测定：准 确称 取 2 g 5 g(精 确至0.001 g)试 样，按 照4.4.1.b)4.4.1.f)步 骤，制得分析试 样，然后 测定 分析 试样的 相对 荧光 强度(Is)，以(Is-Ib)值从 工作 曲 线上查 出相 应的 石油 烃的浓度。4.5 结果计 算与 表示 按下 式 计算 试样 中石 油烃：1=(m1V1)/M1.(1)式中：1 试样 中石 油烃的 质 量分数；m1 从工 作曲 线上 查得 的石油 烃的 浓度，单 位为 微克每 毫升(g/mL)；DB37/T 3626 2019 3 V1 环己 烷溶 液的 体积，单位 为毫 升(mL)；M1 样品 的称 取量，单 位为克(g)。4.6 检出限、回 收率 和精 密度 4.6.1 检出限 本方法 检 出 限为0.2 10-6，定量 限为0.6 10-6。4.6.2 回收率 本方法 回收 率范 围为90%110%。4.6.3 精密度 本方法 的批 内相 对标 准偏 差小于10%，批 间相 对 标 准偏差 小于10%。5 紫外分 光光 度法 5.1 试剂和 材料 5.1.1 正己烷：优 级纯，在 紫外 波长 225 nm 处，以 水作 参 比，透 光率 大 于90%。5.1.2 石油类 标准 使用 液(100 g/mL)：移 取5.00 mL 石 油 类标准 储备 液(4.1.11)于50 mL 容量 瓶中，用正己 烷稀 释至 标线，混 匀。5.2 仪器和 设备 5.2.1 紫外分 光光 度计：可 在 225 nm 进行 透光 率、吸光 度 检测，配 有1 cm 石 英比 色 皿。5.2.2 一般实 验室 常用 仪器 和设 备。5.3 分析步 骤 5.3.1 工作曲 线的 测定 分别量 取0 mL、0.10 mL、0.30 mL、0.50 mL、0.70 mL、0.90 mL 油 标准 使用 溶液(5.1.2)，按照4.4.1.b)4.4.1.e)步 骤，制 备浓 缩 液，并 以1 ml 正己 烷(5.1.1)代替 样品，制备 空白试 样浓缩 液；氮 吹近 干，准确加入10.0 mL 正 己烷涡 旋 振荡，混合均 匀；使用紫 外分光 光度计 在225 nm 处 测定其 吸光值(Ai)及空 白试样吸 光值(Ab)，将测定 数据以 吸光值(Ai-Ab)为 纵 坐标，相应的 石油 烃的浓 度(g/mL)为 横坐 标，绘制工作 曲线。5.3.2 试样的 测定 准确称 取2 g 5 g(精 确至0.001 g)试 样，按照4.4.1.b)4.4.1.e)步 骤，氮吹 近 干，准确 加入10.0 mL正己 烷涡旋 振荡，混合 均匀制 得分析 试样；测定 分析试 样的吸 光值(As)，以(As-Ab)值从 工作曲 线上查出 相应 的石 油烃 的浓 度。5.4 结果计 算与 表示 按下式 计算 试样 中石 油烃：2=(m2V2)/M2.(2)式中：DB37/T 3626 2019 4 2 试样 中石 油烃的 质 量分数；m2 从工 作曲 线上 查得 的石油 烃的 浓度，单 位为 微克每 毫升(g/mL)；V2 正己 烷溶 液的 体积，单位 为毫 升(mL)；M2 样品 的称 取量，单 位为克(g)。5.5 检出限、回 收率 和精 密度 5.5.1 检出限 本方法 检出 限为0.2 10-6，定量 限为0.6 10-6。5.5.2 回收率 本方法 回收 率范 围为90%110%。5.5.3 精密度 本方法 的批 内相 对标 准偏 差小于10%，批 间相 对标 准偏差 小于10%。_