番茄晚疫病诊断与防治技术规程DB22／T 3635-2024.pdf
ICS 65.020.20 CCS B 05 22 吉林省地方标准 DB22/T 3635 2024 番茄晚疫 病诊断与 防治技术 规程 Technical code of practice for diagnosis and integrated managenment of tomato late blight 2024-4-25 发布 2024-06-01 实施 吉林省市 场 监督 管 理厅 发 布 DB22/T 3635 2024 I 前 言 GB/T 1.1 2020 1 DB22/T 3635 2024 1 番 茄晚疫 病诊断与 防治技 术规程 1 范围 2 规范性 引用 文件 GB/T 8321 NY/T 1276 DB22/T 3495 2023 3 术语和 定义 番茄晚 疫病 tomato late blight Phytophthora infestans Mont.de Bary 聚合酶 链式 反应 polymerase chain reaction，PCR DNA 4 诊断与 防治 流程 1 DB22/T 3635 2024 2 图1 番茄晚 疫病 诊断 与防 治流 程 5 病害诊 断 症状识 别 5.1.1 样本采 集 5.1.2 病害症 状 a)A.1 b)A.2 DB22/T 3635 2024 3 c)A.3 病原鉴 定 5.2.1 显微观 察 5.2.1.1 徒手制 片 a)b)c)5.2.1.2 镜检 3 5 2 B.1 22.5 m 40 m 17.5 m 22.5 m B.2 5.2.2 分子检 测 5.2.2.1 病原菌 分离 培养 5.2.2.1.1 75%30 s 3%2 min 3 min,3 5 mm2 10 mm2 5.2.2.1.2 4 PDA,25 3 d 5 d PDA B.3 5.2.2.2 DNA 提取 DB22/T 3495 2023 C.1 DNA 5.2.2.3 PCR 扩增 ITS 区域 DNA ITS 4/ITS 5 ITS 4 5-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3/ITS 5 5-GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3 ITS PCR C.1 ITS 750 bp 760 bp C.1 5.2.2.4 序列比 对 PCR GenBank BLAST 95%ITS 754 bp C.3 6 病害综 合防 治 防治原 则 DB22/T 3635 2024 4 防治方 法 6.2.1 选择抗 病品 种 6.2.2 加强栽 培管 理 6.2.2.1 合理轮 作 3 6.2.2.2 清洁田 园 6.2.2.3 土壤消 毒 80 kg/667 m2 100 kg/667 m2 6.2.2.4 田间管 理 6.2.3 设施生 态防 控 6.2.3.1 降低湿 度 60%85%6.2.3.2 调控温 度 25 28 13 18 13 6.2.4 化学防 治 6.2.4.1 农药选 用与 管理 GB/T 8321 NY/T 1276 E 6.2.4.2 施药方 法 6.2.4.2.1 烟雾法 12.5%340 g/667 m2 400 g/667 m2 3 DB22/T 3635 2024 5 6.2.4.2.2 喷雾法 7 d 10 d 1 2 3 D.1 7 记录与 档案 2,DB22/T 3635 2024 6 A A 附录A（资料 性）番茄晚 疫病 典型 症状 图片 A.1 A.3 图A.1 叶部症 状 图A.2 茎部症 状 图A.3 果实症 状 DB22/T 3635 2024 7 B 附录B（资料 性）番茄晚 疫病 病原 菌显 微形 态及菌 落形 态 B.1 病原菌 显微 形态 B.1 B.2 图A.4 病原菌 游动 孢子 囊梗（显 微镜倍 数 40 10）A.5 病原菌 游动 孢子 囊（显微 镜倍 数40 10）B.2 病原菌 菌落 形态 PDA B.3 图A.6 PDA 培 养基 上的 菌落 形态（左：正面 右：反 面）DB22/T 3635 2024 8 B C 附录C（规范 性）病原菌 分子 鉴定 C.1 PCR 反 应体 系和 参数 C.1.1 反应体 系 ITS4 TIS5 0.5 L PCR mix 5 L DNA 1 L dd H2O 3 L 10 L C.1.2 反应参 数 C.1.2.1 94 3 min 94 30 s 55 50 s 72 1 min 35 72 10 min 4 C.1.2.2 PCR 1%0.5 TBE 100 V 30 min 40 min C.1.2.3 50 ng/L C.2 PCR 扩 增产 物检 测 PCR ITS 750 bp 760 bp C.1 M 图B.1 ITS 序列 PCR 扩增 产物 电 泳检测 对照 图 DB22/T 3635 2024 9 C.3 番茄晚 疫病 原菌 ITS 全序列 PCR ITS 754 bp 1 AACCGTTTCA ACCCAATAGT TGGGGGTCTT ACTTGGCGGC GGCTGCTGGC TTTATTGCTG 61 GCGGCTACTG CTGGGCGAGC CCTATCAAAA GGCGAGCGTT TGGACTTCGG TCTGAGCTAG 121 TAGCTTTTTT ATTTTAAACC CTTTACTTAA TACTGATTAT ACTGTGGGGA CGAAAGTCTC 181 TGCTTTTAAC TAGATAGCAA CTTTCAGCAG TGGATGTCTA GGCTCGCACA TCGATGAAGA 241 ACGCTGCGAA CTGCGATACG TAATGCGAAT TGCAGGATTC AGTGAGTCAT CGAAATTTTG 301 AACGCATATT GCACTTCCGG GTTAGTCCTG GAAGTATGCC TGTATCAGTG TCCGTACAAC 361 AAACTTGGCT TTCTTCCTTC CGTGTAGTCG GTGGAGGAGA TGCCAGATGT GAAGTGTCTT 421 GCGGTTGGTT TTCGGACCGA CTGCGAGTCC TTTTAAATGT ACTAAACTGT ACTTCTCTTT 481 GCTCCAAAAG TGGTGGCATT GCTGGTTGTG GACGCTGCTA TTGTAGCGAG TTGGCGACCG 541 GTTTGTCTGC TGCGGCGTTA ATGGAGAAAT GCTCGATTCG TGGTATGGTT GGCTTCGGCT 601 GAACAATGCG CTTATTGGGT GATTTTCCTG CTGTGGCGTG ATGGACTGGT GAACCATGGC 661 TCTTTAGCTT GGCATTTGAA TCGGCTTTGC TGTTGCGAAG TAGAGTGGCG GCTTCGGCTG 721 CCGAGGGTCG ATCCATTTGG GAAATGTTGT GTAC DB22/T 3635 2024 10 C D 附录D（资料 性）防治番 茄晚 疫病 药剂 D.1 表D.1 药剂种 类及 使用 方法 1 50%33 g 40 g 2 70%180 g 270 g 3 50%170 g 230 g 4 40%80 g 100 g 5 70%60 g 120 g 6 36%100 g 117 g 7 25%84 g 125 g 8 50%162 g 186 g 9 50%67 g 100 g 10 60%40 g 60 g 11 50%40 g 50 g 12 75%175 g 200 g 13 68%100 g 120 g 14 51%100 mL 133 mL 15 40%30 mL 40 mL DB22/T 3635 2024 11 D E 附录E（规范 性）农药管 理 E.1 采购 a)b)c)d)e)f)g)E.2 贮存 E.3 包装物 处理 3
