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水质 粪大肠菌群的测定 酶底物法DB61/T 1138-2018.pdf

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水质 粪大肠菌群的测定 酶底物法DB61/T 1138-2018.pdf

I C S 1 3.0 6 0.7 0Z 1 6DB61陕 西 省 地 方 标 准D B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 8水 质 粪 大 肠 菌 群 的 测 定 酶 底 物 法W a t e r q u a l i t y D e t e r m i n a t i o n o f f e c a l c o l i f o r m s E n z y m e s u b s t r a t e m e t h o d2 0 1 8-0 4-1 2 发 布 2 0 1 8-0 5-1 2 实 施陕 西 省 质 量 技 术 监 督 局发 布D B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 8I目 次前 言.I I1 范 围.12 规 范 性 引 用 文 件.13 术 语 和 定 义.14 方 法 原 理.15 试 剂 与 材 料.16 仪 器 与 设 备.27 样 品.28 分 析 步 骤.39 结 果 计 算 与 表 示.41 0 质 量 保 证 和 质 量 控 制.51 1 废 物 处 理.5附 录 A(资 料 性 附 录)酶 底 物 法 培 养 基 的 基 本 成 分.6附 录 B(规 范 性 附 录)粪 大 肠 菌 群 检 数 表.7附 录 C(规 范 性 附 录)5 1 孔 定 量 孔 板 M P N 表.8附 录 D(规 范 性 附 录)9 7 孔 定 量 孔 板 M P N 表.1D B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 8I I前 言本 标 准 按 照 G B/T 1.1 2 0 0 9 和 H J 1 6 8 2 0 1 0 给 出 的 规 则 起 草。本 标 准 由 陕 西 省 环 境 监 测 中 心 站 和 陕 西 省 环 境 保 护 厅 提 出。本 标 准 由 陕 西 省 环 境 保 护 厅 归 口。本 标 准 起 草 单 位:陕 西 省 环 境 监 测 中 心 站。本 标 准 主 要 起 草 人:许 锋、张 会 强、刘 敏、周 弛、吴 卫 东、马 文 鹏、张 秦 铭、宁 西 翠、许 伊 蕾、张静 雪。本 标 准 由 陕 西 省 环 境 监 测 中 心 站 负 责 解 释。本 标 准 首 次 发 布。联 系 信 息 如 下:单 位:陕 西 省 环 境 监 测 中 心 站电 话:0 2 9-8 5 4 2 9 1 2 7地 址:陕 西 省 西 安 市 雁 塔 区 西 影 路 1 0 6 号邮 编:7 1 0 0 5 4D B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 81水 质 粪 大 肠 菌 群 的 测 定 酶 底 物 法1 范 围本 标 准 规 定 了 水 中 粪 大 肠 菌 群 测 定 的 酶 底 物 法 的 术 语 和 定 义、方 法 原 理、试 剂 与 材 料、仪 器 与 设备、样 品、分 析 步 骤、结 果 计 算 与 表 示、质 量 保 证 和 质 量 控 制、废 物 处 理 的 要 求。本 标 准 适 用 于 地 表 水、生 活 污 水 和 废 水 中 粪 大 肠 菌 群 的 测 定。当 接 种 量 为 3 0 0 m L 时,方 法 的 检 出 限 为 3 M P N/L,检 测 范 围 为 3 M P N/L 2 3 0 M P N/L;当 接 种 量 为 1 0 0 m L时,方 法 的 检 出 限 为 1 0 M P N/L,采 用 5 1 孔 定 量 孔 板 的 检 测 范 围 为 1 0 M P N/L 2 0 0 5 M P N/L,采 用 9 7 孔 定 量 孔板 的 检 测 范 围 为 1 0 M P N/L 2 4 1 9 6 M P N/L。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的。凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件,仅 所 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本文 件。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件,其 最 新 版 本(包 括 所 有 的 修 改 单)适 用 于 本 文 件。G B/T 5 7 5 0.1 2 生 活 饮 用 水 标 准 检 验 方 法 微 生 物 指 标G B/T 6 6 8 2 分 析 实 验 室 用 水 规 格 和 试 验 方 法3 术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件。3.1粪 大 肠 菌 群 f e c a l c o l i f o r m s粪 大 肠 菌 群,又 称 耐 热 大 肠 菌 群(t h e r m o t o l e r a n t c o l i f o r m s)。是 一 种 通 常 在 4 4.5 下 培 养 发酵 乳 糖 产 酸 产 气、需 氧 及 兼 性 厌 氧 的 革 兰 氏 阴 性 无 芽 胞 杆 菌。3.2最 可 能 数 m o s t p r o b a b l e n u m b e r;M P N基 于 泊 松 分 布 的 一 种 间 接 计 数 方 法。4 方 法 原 理粪 大 肠 菌 群 在 邻 硝 基 苯-D-吡 喃 半 乳 糖 苷(O N P G)培 养 基 上 培 养 产 生-D-半 乳 糖 苷 酶(-D-g a l a c t o s i d a s e),该 酶 可 以 分 解 色 源 底 物 释 放 出 黄 色 的 邻 硝 基 苯 酚,通 过 颜 色 变 化 定 性,M P N 法 定量。5 试 剂 与 材 料D B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 825.1 除 非 另 有 说 明,所 用 试 剂 均 为 分 析 纯,水 为 符 合 G B/T 6 6 8 2 中 规 定 的 一 级 水。5.2 培 养 基 选 择 市 售 商 品 化 酶 底 物 法 试 剂,或 自 行 配 制 培 养 基,基 本 成 分 参 照 附 录 A。5.3 硫 代 硫 酸 钠(N a2S2O3)。5.4 乙 二 胺 四 乙 酸 二 钠(E D T A-N a2)。5.5 氯 化 钠(N a C l)。5.6 硫 代 硫 酸 钠 溶 液:(N a2S2O3)0.1 0 g/m L。注:称 取 硫 代 硫 酸 钠(5.2)1 0 g,适 量 水 溶 解,定 容 至 1 0 0 m L,临 用 现 配。5.7 乙 二 胺 四 乙 酸 二 钠(E D T A-N a2)溶 液:(C1 0H1 4N2O8N a2 2 H2O)0.1 5 g/m L。注:称 取 乙 二 胺 四 乙 酸 二 钠(5.3)1 5 g,适 量 水 溶 解,定 容 至 1 0 0 m L,摇 匀,常 温 下 可 存 放 3 0 d。5.8 灭 菌 生 理 盐 水:(N a C l)=0.9%(m/v)。注:称 取 氯 化 钠(5.4)0.9 g,适 量 水 溶 解,定 容 至 1 0 0 m L,经 1 2 1 高 压 蒸 汽 灭 菌 2 0 m i n,备 用。6 仪 器 与 设 备6.1 采 样 瓶:5 0 0 m L 棕 色 磨 口 玻 璃 瓶。6.2 恒 温 培 养 箱:4 4.5 0.5。6.3 高 压 蒸 汽 灭 菌 器:1 2 1、0.1 0 1 M p a。6.4 冰 箱:0 4。6.5 恒 温 干 燥 箱:0 3 0 0。6.6 程 控 定 量 封 口 机:带 5 1 孔 和 9 7 孔 胶 托。6.7 5 1 孔 和 9 7 孔 定 量 孔 板:无 菌。6.8 1 0 0 m L 无 菌 取 样 瓶。6.9 试 管:1 5 m m 1 5 0 m m,带 透 气 胶 塞。6.1 0 标 准 阳 性 比 色 盘。6.1 1 移 液 管:1 m L、1 0 m L,也 可 采 用 体 积 可 调 式 移 液 器。6.1 2 锥 形 瓶:5 0 0 m L。6.1 3 量 筒:1 0 0 m L。6.1 4 移 液 管、试 管、量 筒、采 样 瓶 等 均 需 包 扎 后 经 1 2 1 高 压 蒸 汽 灭 菌 2 0 m i n,备 用。7 样 品7.1 样 品 采 集7.1.1 与 其 他 项 目 一 同 采 样 时,先 单 独 采 集 微 生 物 样 品。采 样 瓶(6.1)不 得 用 水 样 洗 涤,按 照 无 菌操 作 的 要 求 采 集 水 样 于 灭 菌 的 采 样 瓶 中。7.1.2 采 集 江、河、湖、库 等 地 表 水 时,可 握 住 瓶 子 下 部 直 接 将 带 塞 采 样 瓶 插 入 水 中,距 水 面 约 1 0 c m 1 5 c m 处,瓶 口 朝 水 流 方 向,拔 玻 璃 瓶 塞,使 水 样 灌 入 瓶 内 然 后 盖 上 瓶 塞,将 采 样 瓶 从 水 中 取 出。如 果没 有 水 流,可 握 住 瓶 子 水 平 前 推。采 样 后 瓶 内 要 留 足 够 的 空 间,一 般 采 样 量 为 采 样 瓶 容 量 的 8 0%左 右。采 好 水 样 后,迅 速 盖 好 瓶 盖 并 扎 上 无 菌 包 装 纸。7.1.3 从 龙 头 装 置 采 集 样 品 时,要 选 用 完 好 无 损 的 龙 头,采 水 前 将 龙 头 打 开 至 最 大,放 水 3 m i n 5 m i n;然 后 将 龙 头 关 闭,用 火 焰 灼 烧 约 3 m i n 灭 菌,开 足 龙 头,再 放 水 1 m i n。采 样 时 控 制 水 流 速 度。7.1.4 采 集 地 表 水、废 水 样 品 及 一 定 深 度 的 水 样 时,可 使 用 灭 菌 过 的 专 用 采 样 装 置 采 样。在 同 一 采 样点 进 行 分 层 采 样 时,应 自 上 而 下 进 行。D B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 837.2 样 品 保 存样 品 在 1 0 以 下 冷 藏 运 输,运 输 时 间 不 超 过 6 h。实 验 室 接 样 后 不 能 立 即 展 开 检 测 的,应 将 样 品 放入 0 4 冰 箱(6.4)保 存,在 2 h 内 检 测。7.3 干 扰 和 消 除酸 性 样 品,应 在 分 析 前 按 无 菌 操 作 要 求 调 节 样 品 p H 值 至 7.0 8.0。在 采 样 瓶 灭 菌 前 加 入 0.4 m L 硫 代硫 酸 钠 溶 液(5.5)以 除 去 余 氯 对 细 菌 的 抑 制 作 用;在 采 样 瓶 灭 菌 前 加 入 1.2 m L 乙 二 胺 四 乙 酸 二 钠(E D T A-N a2)溶 液(5.6)以 除 去 重 金 属 对 细 菌 的 抑 制 作 用。8 分 析 步 骤8.1 水 样 接 种 量水 样 充 分 混 匀 后,根 据 水 样 污 染 的 程 度 确 定 水 样 的 接 种 量,水 样 的 接 种 量 可 参 考 表 1。表 1 水 样 接 种 量 参 考 表水样类型接种量(m L)3 0 0 1 0 0 1 0 1 1 0-11 0-21 0-31 0-41 0-51 0-6地表水(湖、库)地表水(江、河)生活污水 废水(工业废水)废水 医疗机构排放污水(处理前)废水 医疗机构排放污水(处理后)废水(畜禽养殖业等排放废水)注:接种量为 1 0-11 0-6m L 时,需要稀释或逐级稀释,稀释方法见8.2.2。8.2 接 种8.2.1 清 洁 水 样8.2.1.1 接 种 量 为 3 0 0 m L 时,接 种 水 样 为 2 份 1 0 0 m L 和 1 0 份 1 0 m L。8.2.1.2 量 取 2 份 1 0 0 m L 水 样,分 别 加 入 2 个 1 0 0 m L 无 菌 取 样 瓶(6.8)中,各 加 入 2.7 g 0.5 g 酶 底物 法 试 剂(5.1),充 分 混 匀 溶 解;量 取 1 0 0 m L 灭 菌 生 理 盐 水(5.7),加 入 2 份 2.7 g 0.5 g 酶 底 物 法试 剂(5.1),充 分 混 匀 溶 解,分 装 于 1 0 个 无 菌 试 管(6.9)中,每 管 含 1 0 m L 溶 液。量 取 1 0 份 1 0 m L水 样 接 种 于 上 述 1 0 个 含 1 0 m L 溶 液 的 试 管 中,加 塞 密 封。8.2.2 受 污 染 水 样8.2.2.1 接 种 量 为 1 0 0 m L 时,用 无 菌 取 样 瓶(6.8)量 取 1 0 0 m L 水 样,加 入 2.7 g 0.5 g 酶 底 物 法 试 剂(5.1),充 分 混 匀 溶 解,将 溶 解 液 倒 入 5 1 孔 或 9 7 孔 定 量 孔 板(6.7)中(根 据 水 样 污 染 程 度 选 择 合适 的 孔 板),排 除 气 泡 后 用 程 控 定 量 封 口 机(6.6)进 行 封 口。8.2.2.2 接 种 量 1 0 0 m L 时,以 1 0-4为 例,取 1 m L 水 样 加 入 1 0 0 m L 无 菌 取 样 瓶 中,用 灭 菌 生 理 盐 水(5.7)稀 释 定 容 至 刻 度 线,混 匀,再 取 稀 释 后 的 水 样 1 m L,重 复 上 述 操 作,以 下 操 作 按 照 8.2.2.1 进 行。D B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 848.3 培 养将 8.2.1 和 8.2.2 中 接 种 后 的 取 样 瓶、试 管 或 孔 板 放 入 恒 温 培 养 箱 中 4 4.5 0.5 培 养 2 4 h 2 h。8.4 对 照 试 验8.4.1 空 白 试 验用 灭 菌 生 理 盐 水(5.7)代 替 样 品 按 照 8.2 和 8.3 进 行 测 定。8.4.2 阳 性 及 阴 性 对 照8.4.2.1 粪 大 肠 菌 群 测 定 的 阳 性 菌 株 为 大 肠 埃 希 氏 菌(E s c h e r i c h i a.c o l i),阴 性 菌 株 为 产 气 肠 杆 菌(E n t e r o b a c t e r a e r o g e n e s)。8.4.2.2 标 准 菌 株 的 菌 悬 液 浓 度 建 议 使 用 0.3 麦 氏 浓 度 值 0.4 麦 氏 浓 度 值,取 适 量 后 按 照 8.2.2.2进 行 接 种,按 8.3 培 养 后,大 肠 埃 希 氏 菌 呈 现 阳 性 反 应,产 气 肠 杆 菌 呈 现 阴 性 反 应。8.5 结 果 判 读取 样 瓶、试 管 或 孔 板 经 培 养 后,对 照 阳 性 比 色 盘(6.1 0),水 样 变 黄 判 断 为 粪 大 肠 菌 群 阳 性,不变 色 判 断 为 粪 大 肠 菌 群 阴 性。记 录 取 样 瓶、试 管 阳 性 个 数,5 1 孔 定 量 孔 板(6.7)记 录 大 孔 阳 性 数,9 7孔 定 量 孔 板(6.7)分 别 记 录 大 孔 和 小 孔 阳 性 数。9 结 果 计 算 与 表 示9.1 结 果 计 算9.1.1 接 种 量 为 3 0 0 m L根 据 8.5 中 取 样 瓶 和 试 管 阳 性 个 数,查 M P N 表(附 录 B)可 得 每 升 水 样 中 粪 大 肠 菌 群 M P N 数。9.1.2 接 种 量 1 0 0 m L根 据 8.5 中 5 1 孔 定 量 孔 板 阳 性 数,查 5 1 孔 M P N 表(附 录 C);根 据 8.5 中 9 7 孔 定 量 孔 板 大 孔 和 小 孔 的阳 性 数,查 9 7 孔 M P N 表(附 录 D)。再 根 据 样 品 的 稀 释 度,按 公 式(1)换 算 为 每 1 L 水 样 中 粪 大 肠 菌 群 的浓 度。fMPNC1 0 值.(1)式 中:C 每 升 水 样 中 粪 大 肠 菌 群 数,M P N/L;值 MPN 查 5 1 孔 或 9 7 孔 M P N 表 所 得 数,M P N/1 0 0 m L;f 接 种 样 品 的 稀 释 度。9.2 结 果 表 示测 定 结 果 应 保 留 二 位 有 效 数 字,大 于 等 于 1 0 0 时 以 科 学 计 数 法 表 示,单 位 为 M P N/L。D B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 851 0 质 量 保 证 和 质 量 控 制1 0.1 实 验 室 应 设 置 阳 性 对 照、阴 性 对 照 和 空 白 对 照。1 0.2 每 批 培 养 基 应 按 本 标 准 8.4 的 要 求 采 用 有 证 标 准 菌 株 进 行 阳 性、阴 性 对 照 试 验(见 表 2)。1 0.3 宜 选 用 市 售 商 品 化 培 养 基,以 减 少 配 制 中 产 生 的 误 差。1 0.4 应 定 期 使 用 有 证 标 准 物 质/样 品 进 行 质 量 控 制。1 0.5 每 批 样 品 至 少 测 定 1 0%的 平 行 双 样,检 测 结 果 以 算 数 平 均 值 计。表 2 阳 性、阴 性 对 照 菌 株 参 考 表菌株名称 英文名 菌株编号大肠埃希氏菌 E s c h e r i c h i a c o l i C I C C 2 4 1 7 6产气肠杆菌 E n t e r o b a c t e r a e r o g e n e s C I C C 1 0 2 9 3 或 A T C C 1 3 0 4 81 1 废 物 处 理使 用 后 的 器 皿 及 废 弃 物 应 经 1 2 1 高 压 蒸 汽 灭 菌 3 0 m i n 处 理。D B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 86A A附 录 A(资 料 性 附 录)酶 底 物 法 培 养 基 的 基 本 成 分A.1 酶 底 物 法 培 养 基 的 基 本 成 分酶 底 物 法 培 养 基 参 照 G B/T 5 7 5 0.1 2 中 规 定 的 基 本 成 分 进 行 配 制,见 表 A.1。表 A.1 酶 底 物 法 培 养 基 的 基 本 成 分成分 分子式或缩写 含量硫酸铵(N H4)2S O45.0 g硫酸锰 M n S O40.5 m g硫酸锌 Z n S O40.5 m g硫酸镁 M g S O41 0 0 m g氯化钠 N a C l 1 0 g氯化钙 C a C l25 0 m g亚硫酸钠 N a2S O34 0 m g两性霉素 B A m p h o t e r i c i n B 1 m g邻硝基苯-D-吡喃半乳糖苷 O N P G 5 0 0 m g4-甲基伞形酮-D-葡萄糖醛酸苷 M U G 7 5 m g茄属植物提取物 S o l a n i u m 萃取物 5 0 0 m gN-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸钠盐 H E P E S 钠盐 5.3 gN-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸 H E P E S 6.9 g水 H2O 1 0 0 0 m LD B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 87B B附 录 B(规 范 性 附 录)粪 大 肠 菌 群 检 数 表B.1 粪 大 肠 菌 群 检 数 表粪 大 肠 菌 群 检 数 表 见 表 B.1。表 B.1 粪 大 肠 菌 群 检 数 表1 0 m L 水样的阳性管数1 0 0 m L 水样的阳性瓶数0 1 21 L 水样中粪大肠菌群数 1 L 水样中粪大肠菌群数 1 L 水样中粪大肠菌群数0 3 4 1 11 3 8 1 82 7 1 3 2 73 1 1 1 8 3 84 1 4 2 4 5 25 1 8 3 0 7 06 2 2 3 6 9 27 2 7 4 3 1 2 08 3 1 5 1 1 6 19 3 6 6 0 2 3 01 0 4 0 6 9 2 3 0D B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 88C C附 录 C(规 范 性 附 录)5 1 孔 定 量 孔 板 M P N 表C.1 5 1 孔 定 量 孔 板 M P N 表5 1 孔 定 量 孔 板 M P N 表 见 表 C.1。表 C.1 5 1 孔 定 量 孔 板 M P N 表阳性孔数 M P N 值 9 5%可信范围下限 9 5%可信范围上限0 1 0.0 3.71 1.0 0.3 5.62 2.0 0.6 7.33 3.1 1.1 9.04 4.2 1.7 1 0.75 5.3 2.3 1 2.36 6.4 3.0 1 3.97 7.5 3.7 1 5.58 8.7 4.5 1 7.19 9.9 5.3 1 8.81 0 1 1.1 6.1 2 0.51 1 1 2.4 7.0 2 2.11 2 1 3.7 7.9 2 3.91 3 1 5.0 8.8 2 5.71 4 1 6.4 9.8 2 7.51 5 1 7.8 1 0.8 2 9.41 6 1 9.2 1 1.9 3 1.31 7 2 0.7 1 3.0 3 3.31 8 2 2.2 1 4.1 3 5.21 9 2 3.8 1 5.3 3 7.32 0 2 5.4 1 6.5 3 9.42 1 2 7.1 1 7.7 4 1.62 2 2 8.8 1 9.0 4 3.92 3 3 0.6 2 0.4 4 6.32 4 3 2.4 2 1.8 4 8.72 5 3 4.4 2 3.3 5 1.22 6 3 6.4 2 4.7 5 3.92 7 3 8.4 2 6.4 5 6.62 8 4 0.6 2 8.0 5 9.5D B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 89表 C.1(续)2 9 4 2.9 2 9.7 6 2.53 0 4 5.3 3 1.5 6 5.63 1 4 7.8 3 3.4 6 9.03 2 5 0.4 3 5.4 7 2.53 3 5 3.1 3 7.5 7 6.23 4 5 6.0 3 9.7 8 0.13 5 5 9.1 4 2.0 8 4.43 6 6 2.4 4 4.6 8 8.83 7 6 5.9 4 7.2 9 3.73 8 6 9.7 5 0.0 9 9.03 9 7 3.8 5 3.1 1 0 4.84 0 7 8.2 5 6.4 1 1 1.24 1 8 3.1 5 9.9 1 1 8.34 2 8 8.5 6 3.9 1 2 6.24 3 9 4.5 6 8.2 1 3 5.44 4 1 0 1.3 7 3.1 1 4 6.04 5 1 0 9.1 7 8.6 1 5 8.74 6 1 1 8.4 8 5.0 1 7 4.54 7 1 2 9.8 9 2.7 1 9 5.04 8 1 4 4.5 1 0 2.3 2 2 4.14 9 1 6 5.2 1 1 5.2 2 7 2.25 0 2 0 0.5 1 3 5.8 3 8 7.65 1 2 0 0.5 1 4 6.1 D B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 81D D附 录 D(规 范 性 附 录)9 7 孔 定 量 孔 板 M P N 表D.1 9 7 孔 定 量 孔 板 M P N 表9 7 孔 定 量 孔 板 M P N 表 见 表 D.1、表 D 2 和 表 D 3。表 D.1 9 7 孔 定 量 孔 板 M P N 表(小 孔 阳 性 孔 数 0 1 6)大孔阳性孔数小孔阳性孔数0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 60 1 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 1 0.0 1 1.0 1 2.0 1 3.0 1 4.1 1 5.1 1 6.11 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.1 8.1 9.1 1 0.1 1 1.1 1 2.1 1 3.2 1 4.2 1 5.2 1 6.2 1 7.32 2.0 3.0 4.1 5.1 6.1 7.1 8.1 9.2 1 0.2 1 1.2 1 2.2 1 3.3 1 4.3 1 5.4 1 6.4 1 7.4 1 8.53 3.1 4.1 5.1 6.1 7.2 8.2 9.2 1 0.3 1 1.3 1 2.4 1 3.4 1 4.5 1 5.5 1 6.5 1 7.6 1 8.6 1 9.74 4.1 5.2 6.2 7.2 8.3 9.3 1 0.4 1 1.4 1 2.5 1 3.5 1 4.6 1 5.6 1 6.7 1 7.8 1 8.8 1 9.9 2 1.05 5.2 6.3 7.3 8.4 9.4 1 0.5 1 1.5 1 2.6 1 3.7 1 4.7 1 5.8 1 6.9 1 7.9 1 9.0 2 0.1 2 1.2 2 2.26 6.3 7.4 8.4 9.5 1 0.6 1 1.6 1 2.7 1 3.8 1 4.9 1 6.0 1 7.0 1 8.1 1 9.2 2 0.3 2 1.4 2 2.5 2 3.67 7.5 8.5 9.6 1 0.7 1 1.8 1 2.8 1 3.9 1 5.0 1 6.1 1 7.2 1 8.3 1 9.4 2 0.5 2 1.6 2 2.7 2 3.8 2 4.98 8.6 9.7 1 0.8 1 1.9 1 3.0 1 4.1 1 5.2 1 6.3 1 7.4 1 8.5 1 9.6 2 0.7 2 1.8 2 2.9 2 4.1 2 5.2 2 6.39 9.8 1 0.9 1 2.0 1 3.1 1 4.2 1 5.3 1 6.4 1 7.6 1 8.7 1 9.8 2 0.9 2 2.0 2 3.2 2 4.3 2 5.4 2 6.6 2 7.71 0 1 1.0 1 2.1 1 3.2 1 4.4 1 5.5 1 6.6 1 7.7 1 8.9 2 0.0 2 1.1 2 2.3 2 3.4 2 4.6 2 5.7 2 6.9 2 8.0 2 9.21 1 1 2.2 1 3.4 1 4.5 1 5.6 1 6.8 1 7.9 1 9.1 2 0.2 2 1.4 2 2.5 2 3.7 2 4.8 2 6.0 2 7.2 2 8.3 2 9.5 3 0.71 2 1 3.5 1 4.6 1 5.8 1 6.9 1 8.1 1 9.3 2 0.4 2 1.6 2 2.8 2 3.9 2 5.1 2 6.3 2 7.5 2 8.6 2 9.8 3 1.0 3 2.2D B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 82表 D.1(续)1 3 1 4.8 1 6.0 1 7.1 1 8.3 1 9.5 2 0.6 2 1.8 2 3.0 2 4.2 2 5.4 2 6.6 2 7.8 2 9.0 3 0.2 3 1.4 3 2.6 3 3.81 4 1 6.1 1 7.3 1 8.5 1 9.7 2 0.9 2 2.1 2 3.3 2 4.5 2 5.7 2 6.9 2 8.1 2 9.3 3 0.5 3 1.7 3 3.0 3 4.2 3 5.41 5 1 7.5 1 8.7 1 9.9 2 1.1 2 2.3 2 3.5 2 4.7 2 5.9 2 7.2 2 8.4 2 9.6 3 0.9 3 2.1 3 3.3 3 4.6 3 5.8 3 7.11 6 1 8.9 2 0.1 2 1.3 2 2.6 2 3.8 2 5.0 2 6.2 2 7.5 2 8.7 3 0.0 3 1.2 3 2.5 3 3.7 3 5.0 3 6.3 3 7.5 3 8.81 7 2 0.3 2 1.6 2 2.8 2 4.1 2 5.3 2 6.6 2 7.8 2 9.1 3 0.3 3 1.6 3 2.9 3 4.1 3 5.4 3 6.7 3 8.0 3 9.3 4 0.61 8 2 1.8 2 3.1 2 4.3 2 5.6 2 6.9 2 8.1 2 9.4 3 0.7 3 2.0 3 3.3 3 4.6 3 5.9 3 7.2 3 8.5 3 9.8 4 1.1 4 2.41 9 2 3.3 2 4.6 2 5.9 2 7.2 2 8.5 2 9.8 3 1.1 3 2.4 3 3.7 3 5.0 3 6.3 3 7.6 3 9.0 4 0.3 4 1.6 4 3.0 4 4.32 0 2 4.9 2 6.2 2 7.5 2 8.8 3 0.1 3 1.5 3 2.8 3 4.1 3 5.4 3 6.8 3 8.1 3 9.5 4 0.8 4 2.2 4 3.6 4 4.9 4 6.32 1 2 6.5 2 7.9 2 9.2 3 0.5 3 1.8 3 3.2 3 4.5 3 5.9 3 7.3 3 8.6 4 0.0 4 1.4 4 2.8 4 4.1 4 5.5 4 6.9 4 8.42 2 2 8.2 2 9.5 3 0.9 3 2.3 3 3.6 3 5.0 3 6.4 3 7.7 3 9.1 4 0.5 4 1.9 4 3.3 4 4.8 4 6.2 4 7.6 4 9.0 5 0.52 3 2 9.9 3 1.3 3 2.7 3 4.1 3 5.5 3 6.8 3 8.3 3 9.7 4 1.1 4 2.5 4 3.9 4 5.4 4 6.8 4 8.3 4 9.7 5 1.2 5 2.72 4 3 1.7 3 3.1 3 4.5 3 5.9 3 7.3 3 8.8 4 0.2 4 1.7 4 3.1 4 4.6 4 6.0 4 7.5 4 9.0 5 0.5 5 2.0 5 3.5 5 5.02 5 3 3.6 3 5.0 3 6.4 3 7.9 3 9.3 4 0.8 4 2.2 4 3.7 4 5.2 4 6.7 4 8.2 4 9.7 5 1.2 5 2.7 5 4.3 5 5.8 5 7.32 6 3 5.5 3 6.9 3 8.4 3 9.9 4 1.4 4 2.8 4 4.3 4 5.9 4 7.4 4 8.9 5 0.4 5 2.0 5 3.5 5 5.1 5 6.7 5 8.2 5 9.82 7 3 7.4 3 8.9 4 0.4 4 2.0 4 3.5 4 5.0 4 6.5 4 8.1 4 9.6 5 1.2 5 2.8 5 4.4 5 6.0 5 7.6 5 9.2 6 0.8 6 2.42 8 3 9.5 4 1.0 4 2.6 4 4.1 4 5.7 4 7.3 4 8.8 5 0.4 5 2.0 5 3.6 5 5.2 5 6.9 5 8.5 6 0.2 6 1.8 6 3.5 6 5.22 9 4 1.7 4 3.2 4 4.8 4 6.4 4 8.0 4 9.6 5 1.2 5 2.8 5 4.5 5 6.1 5 7.8 5 9.5 6 1.2 6 2.9 6 4.6 6 6.3 6 8.03 0 4 3.9 4 5.5 4 7.1 4 8.7 5 0.4 5 2.0 5 3.7 5 5.4 5 7.1 5 8.8 6 0.5 6 2.2 6 4.0 6 5.7 6 7.5 6 9.3 7 1.03 1 4 6.2 4 7.9 4 9.5 5 1.2 5 2.9 5 4.6 5 6.3 5 8.1 5 9.8 6 1.6 6 3.3 6 5.1 6 6.9 6 8.7 7 0.5 7 2.4 7 4.23 2 4 8.7 5 0.4 5 2.1 5 3.8 5 5.6 5 7.3 5 9.1 6 0.9 6 2.7 6 4.5 6 6.3 6 8.2 7 0.0 7 1.9 7 3.8 7 5.7 7 7.63 3 5 1.2 5 3.0 5 4.8 5 6.5 5 8.3 6 0.2 6 2.0 6 3.8 6 5.7 6 7.6 6 9.5 7 1.4 7 3.3 7 5.2 7 7.2 7 9.2 8 1.23 4 5 3.9 5 5.7 5 7.6 5 9.4 6 1.3 6 3.1 6 5.0 6 7.0 6 8.9 7 0.8 7 2.8 7 4.8 7 6.8 7 8.8 8 0.8 8 2.9 8 5.03 5 5 6.8 5 8.6 6 0.5 6 2.4 6 4.4 6 6.3 6 8.3 7 0.3 7 2.3 7 4.3 7 6.3 7 8.4 8 0.5 8 2.6 8 4.7 8 6.9 8 9.13 6 5 9.8 6 1.7 6 3.7 6 5.7 6 7.7 6 9.7 7 1.7 7 3.8 7 5.9 7 8.0 8 0.1 8 2.3 8 4.5 8 6.7 8 8.9 9 1.2 9 3.5D B 6 1/T 1 1 3 8 2 0 1 83表 D.1(续)3 7 6 2.9 6 5.0 6 7.0 6 9.1 7 1.2 7 3.3 7 5.4 7 7.6 7 9.8 8 2.0 8 4.2 8 6.5 8 8.8 9 1.1 9 3.4 9 5.8 9 8.23 8 6 6.3 6 8.4 7 0.6 7 2.7 7 4.9 7 7.1 7 9.4 8 1.6 8 3.9 8 6.2 8 8.6 9 1.0 9 3.4 9 5.8 9 8.3 1 0 0.8 1 0 3.43 9 7 0.0 7 2.2 7 4.4 7 6.7 7 8.9 8 1.3 8 3.6 8 6.0 8 8.4 9 0.9 9 3.4 9 5.9 9 8.4 1 0 1.0 1 0 3.6 1 0 6.3 1 0 9.04 0 7 3.8 7 6.2 7 8.5 8 0.9 8 3.3 8 5.7 8 8.2 9 0.8 9 3.3 9 5.9 9 8.5 1 0 1.2 1 0 3.9 1 0 6.7 1 0 9.5 1 1 2.4 1 1 5.34 1 7 8.0 8 0.5 8 3.0 8 5.5 8 8.0 9 0.6 9 3.3 9 5.9 9 8.7 1 0 1.4 1 0 4.3 1 0 7.1 1 1 0.0 1 1 3.0 1 1 6.0 1 1 9.1 1 2 2.24 2 8 2.6 8 5.2 8 7.8 9 0.5 9 3.2 9 6.0 9 8.8 1 0 1.7 1 0 4.6 1 0 7.6 1 1 0.6 1 1 3.7 1 1 6.9 1 2 0.1 1 2 3.4 1 2 6.7 1 3 0.14 3 8 7.6 9 0.4 9 3.2 9 6.0 9 9.0 1 0 1.9 1 0 5.0 1 0 8.1 1 1 1.2 1 1 4.5 1 1 7.8 1 2 1.1 1 2 4.6 1 2 8.1 1 3 1.7 1 3 5.4 1 3 9.14 4 9 3.1 9 6.1 9 9.1 1 0 2.2 1 0 5.4 1 0 8.6 1 1 1.9 1 1 5.3 1 1 8.7 1 2 2.3 1 2 5.9 1 2 9.6 1 3 3.4 1 3 7.4 1 4 1.4 1 4 5.5 1 4 9.74 5 9 9.3 1 0 2.5 1 0 5.8 1 0 9.2 1 1 2.6 1 1 6.2 1 1 9.8 1 2 3.6 1 2 7.4 1 3 1.4 1 3 5.4 1 3 9.6 1 4 3.9 1 4 8.3 1 5 2.9 1 5 7.6 1 6 2.44 6 1 0 6.3 1 0 9.8 1 1 3.4 1 1 7.2 1 2 1.0 1 2 5.0 1 2 9.1 1 3 3.3 1 3 7.6 1 4 2.1 1 4 6.7 1 5 1.5 1 5 6.5 1 6 1.6 1 6 7.0 1 7 2.5 1 7 8.24 7 1 1 4.3 1 1 8.3 1 2 2.4 1 2 6.6 1 3 0.9 1 3 5.4 1 4 0.1 1 4 5.0 1 5 0.0 1 5 5.3 1 6 0.7 1 6 6.4 1 7 2.3 1 7 8.5 1 8 5.0 1 9 1.8 1 9 8.94 8 1 2 3.9 1 2 8.4 1 3 3.1 1 3 7.9 1 4 3.0 1 4 8.3 1 5 3.9 1 5 9.7 1 6 5.8 1 7 2.2 1 7 8.9 1 8 6.0 1 9 3.5 2 0 1

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