水稻花药培养技术规程DB42／T 1290-2017.pdf
ICS 65.020.01 B 05 备案号：DB42 湖北省地方标准 DB 42/T 1290 2017 水稻花药 培养技术 规程 Technical regulations for anther culture of rice()2017-10-20 发布 2017-11-20 实施 湖 北 省 质 量 技 术 监 督 局 发布 DB42/T 1290 2017 I 目 次.III.V 1.1 2.1 3.1 3.1 rice anther culture.1 4.1 4.1.1 4.2.2 4.2.1.2 4.2.2.2 4.2.3.2 4.2.4.2 4.3.3 4.3.1.3 4.3.2.3 4.3.3.3 4.4.3 4.5.3 4.6.3 4.6.1.3 4.6.2.4 4.7.4 4.7.1.4 4.7.2.4 4.8.4 4.8.1.4 4.8.2.4 A.5 B.6 C.7 DB42/T 1290 2017 II DB42/T 1290 2017 III 前 言 GB/T 1.1 2009 1 DB42/T 1290 2017 IV DB42/T 1290 2017 V 引 言 DB42/T 1290 2017 1 水 稻花药 培养技术 规程 1 范围 2 规范性 引用 文件 DB32/T 1848-2011 DB22/T 281-2001 DB33/T 752-2009 3 术语和 定义 3.1 水稻花 药培 养 rice anther culture 4 水稻 花 药培 养操 作程序 4.1 操作流 程 1 图1 水 稻花 药培 养操 作流 程 DB42/T 1290 2017 2 4.2 培养基 的配 制 4.2.1 配制程 序 2 图2 培 养基 配制 程序 4.2.2 母液的 配制 和保 存 A B 4 4.2.3 培养基 的类 型 C 4.2.4 配制方 法 1L 3g 800 mL N6 I II 50 mL N6 III IV N6 V 10 mL 1 mgL-1 KT 1mL 1 mgL-1 NAA 3mL 1 mgL-1 2,4-D 2mL 600 mg 50 g 1L pH pH 5.8 100 mL 30 mL35 mL 1L 3 g 800 mL MS I II 50mL MS III IV MS V 10 mL 1 mgL-1 6-BA 0.5mL 1 mgL-1 KT 2mL 1 mgL-1 NAA 0.5 mL 30 g 1L pH pH 5.8 100 mL 30 mL35 mL+pH DB42/T 1290 2017 3 1L 3 g 800 mL MS I II 25mL MS III IV 5mL MS V 10mL 1 mgL-1 IBA 0.2mL 30g 1L pH pH 5.8 0.5g 100 mL 30 mL35 mL B 4.3 水稻幼 穗的 准备 4.3.1 取样-5 cm10 cm 1/31/2 4.3.2 预处理 75 8 8 12 4.3.3 消毒 0.1%10 min 3%25 min 4 5 4.4 取花药 接种 1/5 100 ml 80 100 4.5 诱导愈 伤组 织 30 28 2 mm3 mm 4.6 愈伤组 织分 化 4.6.1 愈伤组 织转 移 DB42/T 1290 2017 4 100 ml 4 5 4.6.2 分化培 养 24mol m-2 s-136 mol m-2 s-1 12 h d-116h d-1 28 3cm5 cm 4.7 生根 4.7.1 转移花 培苗 100 ml 4 5 4.7.2 生根培 养 10cm 24mol m-2 s-136 mol m-2 s-1 12 h d-116h d-1 28 4.8 花培苗 炼苗 与移 栽 4.8.1 炼苗 25 3 1cm 3d 1 d2 d 3 d5 d 1 cm 4.8.2 移栽与 管理 DB42/T 1290 2017 5 A A 附 录 A（规范 性附 录）培养基 母液 配制 成分 表 A.1。表A.1 培养 基母 液配 制成 分表 MS N6 I 20(NH4)2SO4 0 9260 NH4NO3 33000 0 KNO3 38000 56600 MgSO4 7H2O 7400 3700 KH2PO4 3400 8000 II 20 CaCl2 2H2O 8800 3320 III 100 MnSO4 4H2O 2230 446 ZnSO4 7H2O 860 150 H3BO3 620 160 KI 83 83 Na2MoO4 2H2O 25 0 CuSO4 5H2O 2.5 0 CoCl2 6H2O 2.5 0 IV 100 Na2-EDTA 3730 3730 FeSO4 7H2O 2780 2780 V 100 VB1 40 100 50 50 VB6 50 50 10000 0 200 200 mg L-1 DB42/T 1290 2017 6 B B 附 录 B（资料 性附 录）常用植 物生 长物 质 B.1 表B.1 常用 植物 生长 物质 1-1 6-BA 100mg 5mL 100mL 1 mg-1 KT 100mg 5mL 1mol-1 KOH 100mL 1 mg-1 IBA 100mg 5mL 100mL 1 mg-1 NAA 100mg 5mL 1mol-1 KOH 100mL 1 mg-1 2,4-D 100mg 5mL 100mL 1 mg-1 DB42/T 1290 2017 7 C 附 录 C（规范 性附 录）水稻花 药培 养培 养基 配方。C.1 表C.1 水稻 花药 培养 培养 基配方 MS I 0 50mL 25mL MS II 0 50mL 25mL MS III 0 10mL 5mL MS V 0 10mL 10mL IV 10mL 10mL 5mL N6 I 50mL 0 0 N6 II 50mL 0 0 N6 III 10mL 0 0 N6 V 10mL 0 0 6-BA 0 0.5 mL 0 KT 1mL 2 mL 0 IBA 0 0 0.2 mL NAA 3 mL 0.5 mL 0 2,4-D 2mL 0 0 3g 3g 3g 50g 30g 30g 600mg 0 0 0 0 0.5g pH 5.8 5.8 5.8 DB42/T 1290 2017 8 D
