ICS 65.120 B 46 备案号：53562-2017 DB15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 1165 2017 饲用玉米 及青贮玉 米淀粉瘤 胃液体外7 小时降解率 的测定 A method to assess in vitro 7-h ruminal starch degradability of the corn grains and corn silage 2017-02-25 发布 2017-05-25 实施 内 蒙 古 自 治 区 质 量 技 术 监 督 局 发布 DB15/T 1165 2017 2 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范 性引 用文 件.1 3 术语 和定 义.1 4 试剂.1 5 仪器 和设 备.1 6 试样.2 7 分析 步骤.2 8 测定 结果 的计 算.3 DB15/T 1165 2017 I DB15/T 1165 2017 II 前 言 本标准 按照GB/T 1.1-2009 给出 的规 则 起 草。本标准 由内 蒙古 自治 区 农 牧业科 学院 提出。本标准 由内 蒙古 自治 区农 牧业厅 归口。本标准 起草 单位：内 蒙古 自治区 农牧 业科 学院。本标准 主要 起草 人：孙海 洲、金 鹿、桑丹、李 胜利、张春 华、张崇 志、凌树 礼、任 晓萍、珊 丹、艳城、谷 英、刘志 友、斯登 丹巴、王美 秀。DB15/T 1165 2017 1 饲 用玉米 及青贮玉 米淀粉 瘤胃液体 外 7 小 时降解率 的测定 1 范围 本标准 规定 了饲 用玉 米及 青贮玉 米淀粉 瘤 胃液 体外7 小时降 解率 的测 定方 法。本 标准 适用 于饲 用玉 米籽 粒及青 贮玉 米。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日 期的引 用文 件，仅 注 日期 的 版本适 用于 本文 件。凡是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有 的修改 单）适用 于本 文件。GB/T 6682 分析 实验 室用 水规格 和试 验方 法 GB/T 14699.1 饲料 采样 GB/T 20195 动 物饲 料 试 样的制 备 AOAC 法 996.11/AACC 法 76.13 饲 料中 淀粉 含量 的 测定 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。3.1 淀粉体 外降 解率 The Degradability of Starch in Vitro 瘤胃液 体外 降解 的样 品中 淀粉含 量占 原样 中淀 粉含 量的百 分比。3.2 相对相 差 Relative Difference 重复性 条件 下获 得两 次独 立测定 结果 的绝 对差 值与 算术平 均值 的比 值。4 试剂 4.1 如无特 别说 明，所用 试剂 均为分 析纯。4.2 本标准 所用 水，一律 指 GB/T 6682 中 三级 水。4.3 缓冲 液A：将 10.00 g K2HPO4、0.50 g MgSO4 7H2O、0.50 g NaCl、0.10 g CaCl2 2H2O 和 0.50 g尿素加 入 到1000ml 的容 量 瓶中，用蒸 馏水 定容。4.4 缓冲 液B：将 15.00 g Na2CO3 和1.00 g Na2S 9H2O 加 入到 1000ml 的 容量 瓶中，用蒸馏 水定 容。DB15/T 1165 2017 2 5 仪器和 设备 5.1 实验室 用样 品粉 碎机 或研 钵。5.2 瘤胃液 取样 器（长 30 cm 内径12.70 mm PPR 管）。5.3 分析天 平（分度 值 0.0001 g）。5.4 烘干 箱（室 温 300）。5.5 磁力搅 拌器（转 速 为100 r/min 1400 r/min）。5.6 纤维袋（ANKOM F57，25 m 孔 隙）。5.7 封口机。5.8 纤维分 析仪（ANKOM 220P，美国）。5.9 体外模 拟培 养箱（ANKOM DAISY 型，美 国）。5.10 量筒（100 ml 和1000 ml）。5.11 离心机（最 大 相 对离心力 4500g）。5.12 紫外可 见分 光光 度计（波 长范围:190 nm 1100 nm）。6 试样 6.1 取样 按GB/T 14699.1 进行 采样。6.2 制备 样品根 据GB/T 20195 制备，置于 烘箱 内于65 烘干，研磨，过1mm 筛。7 分析步 骤 7.1 瘤胃液 的制 备 选择健 康、体 重接 近的3 头 装有永 久性瘤 胃瘘 管的供 体羊（牛），单独 饲养。在晨饲 前经瘤 胃瘘 管利用瘤 胃液 取样 器采集3 头 供试羊（牛）的 瘤胃 液1500 mL2000 mL,转 入预 热至39 的 保温 容器 中,混合均匀后 经4 层纱 布过 滤,同 时通入CO2 气体，然 后量 取 试验所 需 量 的瘤 胃液 备用。7.2 体外消 化步 骤 7.2.1 消化 称取 0.5000 g 样品 放置 于纤维 袋中，平 行样 封口 后平铺 放置 于体 外模拟 培 养箱中 消化 罐的 分隔 板两侧。取两个 容器 分别加 入266 mL 缓冲 液B和1330 mL 缓冲液A，39 条件 下调 节其pH 达到6.80。在每个消化罐 中加 入1600 mL 混 合缓冲 液后 放置 于体 外模拟 培养 箱中，打 开加 热和 转动开 关，使消 化罐 的 温 度在20 min30 min 内达 到平 衡。取 出消 化罐 加入 提前 预处理 好的400 mL 瘤胃 液，持续 通入CO2 然后 盖紧 盖子，置 于体 外模拟 培 养箱 中连续 培养7h。7.2.2 洗涤 培养完 毕后 取出 消化 罐倒 掉液体，再 将纤 维袋 取出，用流 动的 自来 水冲 洗干 净。DB15/T 1165 2017 3 7.2.3 干燥 将纤维 袋 置于105烘 干箱 中烘6h，放入 干燥器 中冷 却30 min 后，称重。然后 再烘30 min，再冷却称重，直至 两次 称量 之差 小于0.0020 g 为恒重。7.3 淀粉含 量的 测定 原样样 品和 残渣 样品 中淀 粉含量 按照AOAC 法 996.11/AACC 法 76.13 进 行。8 测定结 果的 计算 8.1 样品中 淀粉 的降 解率 以百 分比(%)表 示，按式（1）计算。Y=(W1 W2)/W1 100(1)式中：Y 样 品在7h 时间 点的 淀粉 瘤胃 液体 外降 解率，单 位为百 分比(%)；W1原样中淀 粉的 含量，单位为 克（g）；W2 7h 时间 点降 解残 渣中 淀粉含 量，单位 为克（g）。8.2 测定的 结果 用平 行测 定的 算术平 均值 表示，保 留小 数后两 位。8.3 同一分 析者 对同 一试 样同 时两次 平行 测定 所得 结果 相对相 差10%。_