ICS 71.100.40 Y 43 DB13 河北省地方标准 DB13/T 2590 2017 果蔬清洗 剂中双酚A、双酚F 的测定 高效液相 色谱法 Determination of bisphenol A and bisphenol F in fruit and vegetable detergents high performance liquid chromatography 2017-11-22 发布 2017-12-22 实施 河 北 省 质 量 技 术 监 督 局 发布 DB13/T 2590 2017 I 前 言 本标准 按照GB/T 1.1-2009 给出 的规 则起 草。本标准 由河 北省 质量 技术 监督局 提出 并归 口。本标准 起草 单位：河 北省 环保产 品质 量监 督检 验院。本标准 主要 起草 人：蔡立 鹏、刘 燕、韩贞 年、李小 英、刘 肖肖、张 珺橦、张 学晶、赵晓 甫。DB13/T 2590 2017 1 果蔬清洗 剂中双 酚 A、双 酚F 的 测定 高效液 相色 谱法 1 范围 本标准 规定 了果 蔬清 洗剂 中 双酚A、双酚F 高效 液相 色谱测 定方 法的 试剂 或材 料、仪 器与 设备、样品、试 验步 骤、试验 数据 处理以 及精 密度。本标准 适用 于果 蔬清 洗剂 中 双酚A、双酚F 含量 的测 定。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 注日 期的版 本适 用于 本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 6682 分 析实 验室 用 水规格 和 试 验方 法 3 原理 果蔬清 洗剂 中的 双酚A、双 酚F 经乙醇振荡 提取，旋转 蒸发至 干，甲 醇溶 解定 容 后，采用C18 色 谱柱分离，以甲醇-水为 流动 相，荧光 检测 器检 测，进行 高效液 相色 谱分 析，外标 法定量。4 试剂或 材料 除非 另 有规 定，仅使 用分 析纯试 剂。4.1 水，GB/T 6682，一 级。4.2 无水乙 醇：色谱 纯。4.3 甲醇：色谱 纯。4.4 双酚A（C15H16O2，CAS：08-50-7）：纯 度大 于99.0%，0 4 储 藏。4.5 双酚F（C13H12O2，CAS：620-92-8）：纯 度大 于99.0%，0 4 储藏。4.6 标准储 备液（1g/L）：称取 双酚 A（4.4）、双 酚F 标 准品（4.5）各 50mg（精确 至 0.1mg）于 50mL容量瓶 中，用甲 醇（4.3）定容至 刻度，摇 匀，于 4 冰箱 中保 存。4.7 标准中 间液（1mg/L）：准确 吸取各 标准 储备 液（4.6）0.1mL 分别 于100mL 容量 瓶 中，用甲 醇（4.3）定容至 刻度，摇 匀，于冰 箱中 4 保 存。4.8 混合标 准使 用液：分别 准 确吸取 标准 中间 液 0.3mL、0.5mL、1mL、2mL、4mL、8mL，于 6 个 10mL容量瓶 中，甲醇（4.3）定 容，此 标准 系列 的浓 度为0.03 mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.m4g/L、0.8mg/L。DB13/T 2590 2017 2 5 仪器与 设备 5.1 高效液 相色 谱仪：配 荧光 检测器。5.2 电子天 平：感 量0.001g 和0.0001g。5.3 快速混 匀器。5.4 离心机。5.5 旋转蒸 发仪。5.6 微孔滤 膜：有机 系，0.45 m。6 样品 6.1 提取 准确 称 取果 蔬清 洗剂 样品1g（精 确至1 mg）于50 mL 圆底烧 瓶中，加 入10mL 无 水乙醇（4.2），用快速混 匀器（5.3）充分 振荡 溶解，于50 旋转 蒸发 至干（如有 残留 水分，可 加入5 mL 无 水乙 醇（4.2）进行溶 剂替 换，直至 蒸干 为止），蒸 发残 渣记 为M。6.2 定容 在残渣M中 加入5 mL 甲醇（4.3），充 分振 荡溶 解并 转 移至50 mL 离心 管中，再 用5 mL甲 醇（4.3）洗涤圆 底烧 瓶，合并 洗涤 液，于5000r/min 离心3min，转移 上清 液 至10 mL 容量 瓶，用 甲醇 定（4.3）容至刻度，取1 mL 过0.45 m 滤膜，进行 高效 液相 色谱 分析。7 试验步 骤 7.1 色谱参 考条件 a)色谱柱：C18 色 谱柱，柱 长 250mm，柱内 径 4.6mm，粒度5 m，或 同等 性能 的 色谱柱；b)流动相：甲 醇-水（70+30，体积 比）；c)流速：1.0mL/min；d)柱温：30；e)进样体 积：10 L；f)荧光检 测器：激 发波 长 227nm，发射 波长313nm。7.2 定量分 析 在7.1 仪器 条件 下，对 标准 溶液和 试样 溶液 进行 检测，分 别以 标准 样品 中双 酚A、双 酚F 的浓 度为 横坐标，峰 面积 为纵 坐标，绘制标 准曲 线。以 保留 时 间定性（双酚A、双酚F 色 谱分离 图见 附录A），外标法定量。8 试验数 据处 理 果蔬清 洗剂 中双酚A、双 酚F含量X 按式（1）计 算：DB13/T 2590 2017 3(1)式中：X 果蔬 清洗 剂中 双酚A、双酚F的 含量，单 位为 毫 克每千 克（mg/kg）；c 从标 准工 作曲 线 查 出的 试样 溶液 中双 酚A、双 酚F的浓 度，单位 为毫 克每 升（mg/L）；V 试样 最终 定容 体积，单位为 毫升（mL）；m 试样 质量，单 位为 克（g）。计算结 果保 留至 小数 点后 三位。双酚A、双 酚F的 检出 限为0.1mg/kg，定量 限为0.3 mg/kg。9 精密度 同一实 验室，由 同一 操作 者使用 相同 设备，按 相同 的测试 方法，并 在短 时间 内对同 一被 测对 象 相互独立 进行 测试 获得 的两 次独立 测试 结果 的绝 对差 值不大 于这 两个 测定 值的 算术平 均值 的10%，以 大 于这两个 测定 值的 算术 平均 值的10%的 情况 不超 过5%为 前提。DB13/T 2590 2017 4 A A 附 录 A（资料 性附 录）双酚 A、双 酚F 标准 色谱 分离图 浓度为0.1 mg/L 双酚A、双酚F标 准色 谱见 图A.1。双酚F双酚AEU0.000.901.802.703.60min0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 注：保留时间为双酚F 为5.162min、双酚A 为7.398min。图A.1 浓度 为0.1mg/L的双酚A、双酚F 标准 色谱 图 _