ICS 65.120 B 46 备案号：DB15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 1075 2016 饲用液体 香味剂中 挥发性风 味物质的 测定 SPME-GC-MS 法 Determination of Volatile Flavor Compounds in the Feed Liquid Flavor Agent SPME-GC-MS Method 2016-12-05 发布 2017-03-05 实施 内 蒙 古 自 治 区 质 量 技 术 监 督 局 发布 DB15/T 1075 2016 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规 范性 引用 文件.1 3 术 语与 定义.1 4 试 剂和 材料.1 5 仪 器和 设备.1 6 测 定步 骤.2 7 结 果计 算.3 8 精 密度.3 附 录A（资 料性 附录）固相微 萃取 实验 装置 简图.4 附 录B（资 料性 附录）饲用液 体香 味剂 中挥 发性 风味物 质总 离子 色谱 图.5 DB15/T 1075 2016 II 前 言 本标准 按照GB/T1.1-2009 给出的 规则 起草。本标准 由内 蒙古 自治 区农 牧业科 学院 提出。本标准 由内 蒙古 自治 区农 牧业厅 归口。本标准 起草 单位：内 蒙古 自治区 农牧 业科 学院 动物 营养 与 饲料 研究 所。本标准 主要 起草 人员：马 燕芬、高民、卢 德勋、赵 军、羿 静、王丽 芳。DB15/T 1075 2016 1 饲用液体 香味剂 中挥 发性 风味物 质的测定 SPME-GC-MS 法 1 范围 本标准 规定 了饲用 液体 香 味剂中 挥发 性风 味物 质成 分的测定 方法。本 方法 适用 于 饲 用液 体香 味剂中 乙酸 异戊 酯、丁酸 异戊酯、沉 香醇、丙 酸苄 酯、丁 香酚 的测定。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 6682-1992 分 析实 验室用 水规 格为 一级 水。3 术语与 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。3.1 饲用香 味剂 用以改 善、增加 和 模 仿食 品的香 气和 香味 为主 要目 的的动 物用 添加 剂。4 试剂和 材料 除 非另 有说 明，在分 析中应 使用 分析 纯试剂。水为GB/T 6682 规定 的一 级 水。4.1 甲醇 色谱 纯 4.2 氯 化钠 4.3 丁 酸甲 酯 内标 物质，含量 大于99.0%。4.4 内 标物 质浓 度配 制方 法：准 确称 取丁 酸甲 酯（4.3）原液0.5 mg 于100 mL 容量瓶 中，用甲 醇（4.1）定容至100 mL，此为 内标 原液。取1.0 mL 内标 原液 和4.0 mL无 水甲 醇于100 mL 容量 瓶中，用 重蒸 水稀 释至100.0 mL(0.05 g/mL)。4.5 非 极性 萃取 纤维 头：使用前 需先 将 涂 层为 非极 性聚二 甲基 硅氧 烷（厚100 m）的 新PDMS萃取 纤 维头在气相 色谱 进样 口250，载气 流速 为1 mL/min条件 下老 化60 min。旧PDMS 萃取纤 维头 在使 用前 需 在气相色谱 进样 口250，载气 流速 为1 mL/min条件 下 老化20 min。5 仪器和 设备 5.1 气相色 谱质谱 仪 器，配 EI 源 5.2 固相微 萃取 装置 DB15/T 1075 2016 2 6 测定 步骤 6.1 样品的 提取 量取 8 mL 饲用液体 香味 剂 放入 15 mL 顶空瓶（带 有 密封垫）中，加 入 2.56 g 氯化钠（4.2），加入1 mL 内标溶液（4.4），在 40 水浴 中预热 20 min，然后将 带 有 PDMS 纤维 头 的 SPME 插入 顶空 瓶中，用固相 微萃 取装 置 在 40 下萃取 30 min（注意 不 要让萃 取头 接触 溶液，避 免污染 萃取 头）。6.2 测定 6.2.1 气相色 谱条 件 6.2.1.1 气相色 谱 柱：毛 细管 柱 色 谱柱（30 m0.25 mm，0.25 m）6.2.1.2 色谱柱 升温 程序：起 始温 度 40，保 留2.5 min，以 10/min 上升到 200，保留2 min 6.2.1.3 进样口 温度：250 6.2.1.4 检测器 温度：250 6.2.1.5 载气：高纯 氦气 6.2.1.6 载气流速：1 mL/min 6.2.1.7 气相色 谱仪 进样 口 热 解吸 时间：5 min 10 min。6.2.2 质谱 条件 6.2.2.1 电离方 式:EI 6.2.2.2 电离电 压：70 eV 6.2.2.3 恒压：10 psi 6.2.2.4 离子源 温度：200 6.2.2.5 进样口 温 度260 6.2.2.6 灯丝电 流：0.25 mA 6.2.2.7 电子倍 增器 电压：1500 V 6.2.2.8 扫描范 围：35 450 6.3 定性测定 在上述 设定 的条 件下，将SPME 萃取 头放 入气 相色 谱 进样口 进行 热解 析测定，采用系 统自 备NIST 数据库进 行质 谱检 索，相似 度高于99%的挥 发性 风味 物质进行 定 性。6.4 定量 测定 在上述 设定 的条 件下，将SPME 萃取 头放 入气 相色 谱 进样口 进行 热解 析测 定，采用内标 面 积归 一化法进行 相对 定量。6.5 平行 试验 按上述 步骤 对同 一试 样进 行平行 测定。DB15/T 1075 2016 3 7 结果 计算 试样中 乙酸异 戊酯、丁酸 异戊酯、沉香 醇、丙酸苄 酯、丁 香酚 的 百分 含量按 式（1）式计 算，平 行测定结 果用 算术 平均 值表 示，保 留两 位有 效数 字：Ai fi Ms Wi%=-100%（1）As fs Mi 式中：Wi 被 测组 分的 百分 含 量，%；Ai 被 测组 分的 峰面 积；As 内 标物 的峰 面积；fi 被 测组 分的 峰高 相 对校正 因子；fs 内 标物 的峰 高相 对 校正因 子；Mi 加 入样 品的 量，单 位为毫 克（mg）；Ms 加 入内 标物 的量，单位为 毫克（mg）。8 精密度 在重复 性条 件下 获得 的两 次独立 测试 结果 的绝 对差 值不大 于两 个测 定值 的算 术平均 值的10。A DB15/T 1075 2016 4 附 录 A（资料 性附 录）固相微 萃取 实验 装置 简图 图A.1 SPME 萃取 挥发 性物 质实 验 装置简 图 图A.2 SPME 萃取 挥发 性物 质磁 力 搅拌装 置 DB15/T 1075 2016 5 B B 附 录 B（资料 性附 录）饲用液 体香 味剂 中挥 发性 风味物 质总 离子 色谱 图 图B.1 饲用液 体香 味剂 中挥 发性 风味物 质总 离子 色谱 图 _