I C S 6 5.2 0 2.2 0B 3 1备 案 号：5 1 6 2 9-2 0 1 7DB46海 南 省 地 方 标 准D B 4 6/T 4 1 1 2 0 1 6台 农 1 6 号 菠 萝 组 培 苗 生 产 技 术 规 程2 0 1 6-1 0-0 8 发 布 2 0 1 6-1 2-0 8 实 施海 南 省 质 量 技 术 监 督 局发 布D B 4 6/T 4 1 1 2 0 1 6I前 言本 标 准 按 照 G B/T 1.1 给 出 的 规 则 起 草。本 标 准 由 海 南 省 质 量 技 术 监 督 局 提 出。本 标 准 由 海 南 省 农 业 厅 归 口。本 标 准 起 草 单 位：海 南 省 农 业 科 学 院 热 带 果 树 研 究 所。本 标 准 起 草 人：范 鸿 雁、华 敏、何 凡、罗 志 文、郭 利 军、何 舒、李 向 宏。D B 4 6/T 4 1 1 2 0 1 61台 农 1 6 号 菠 萝 组 培 苗 生 产 技 术 规 程1 范 围本 标 准 规 定 了 台 农 1 6 号 菠 萝 组 培 苗 有 关 的 术 语 和 定 义、组 培 工 厂 的 要 求、组 培 苗 的 要 求、分 组 标 准、外 植 体 的 选 择、处 理 和 接 种、初 代 培 养、继 代 培 养、成 苗 培 养、生 根 培 养、练 苗、移 栽、检 测 等 系 列 生产 技 术 要 求。本 标 准 适 用 于 台 农 1 6 号 菠 萝 组 培 苗 生 产。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的。凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件，仅 所 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文件。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件，其 最 新 版 本（包 括 所 有 的 修 改 单）适 用 于 本 文 件。G B 5 5 6 9 农 业 植 物 调 运 检 疫 规 程N Y/T 4 5 1 菠 萝 种 苗3 术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 和 N Y/T 4 5 1 中 确 定 的 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件。3.1吸 芽着 生 于 母 株 地 上 茎 叶 腋 间 的 芽。3.2芽 培 养将 吸 芽 的 芽 尖 作 为 外 植 体 进 行 组 织 培 养。3.3变 异 苗在 组 织 培 养 过 程 中，因 体 细 胞 变 异 而 出 现 的 花 叶、叶 片 扭 曲 黄 化、幼 苗 茎 部 徒 长 显 弱、叶 片 短 小、生 根 阶 段 出 现 矮 化 株 等 的 表 型 变 异。4 要 求4.1 组 培 工 厂 要 求4.1.1 工 厂 组 成D B 4 6/T 4 1 1 2 0 1 62组 培 工 厂 包 括 准 备 室、接 种 室、培 养 室、观 察 检 测 室 等 场 所。4.1.2 环 境 条 件组 培 工 厂 应 建 在 排 水 设 施、通 风 条 件 良 好、远 离 各 种 污 染 源，环 境 干 燥，空 气 清 新，通 风 透 光。4.1.3 准 备 室用 于 各 种 药 品 的 贮 备、称 量、溶 解、器 皿 洗 涤、培 养 基 配 制 与 分 装、培 养 基 和 培 养 器 皿 的 灭 菌、培养 材 料 的 预 处 理 等 的 场 所，应 宽 敞 明 亮、通 风 良 好，地 面 应 便 于 清 洁，又 可 防 滑。4.1.4 接 种 室用 于 植 物 材 料 的 消 毒 和 接 种、培 养 物 的 继 代 转 移 等 的 场 所，应 无 尘、无 对 流 空 气 的 洁 净 环 境。工 作人 员 进 入 室 内 前，应 换 上 洁 净 的 工 作 服、工 作 帽 和 拖 鞋，避 免 带 入 杂 菌 引 起 空 气 污 染 接 种 工 具。4.1.5 培 养 室培 养 室 应 具 备 控 制 湿 度、温 度、光 照 等 设 施 条 件，保 持 清 洁 卫 生。4.1.6 观 察 检 测 室 要 求方 便 观 察、检 测 组 培 苗 是 否 干 净 不 受 污 染。4.2 苗 木 要 求4.2.1 基 本 要 求4.2.1.1 瓶 苗 种 源 来 自 品 种 纯 正、优 质 高 产 的 母 本 园 或 母 株；品 种 纯 度 9 8%；无 污 染；继 代 培 养 不 超 过 1 2 代，时 间 不 超 过 2 0 2 5 个 月；根 系 有 分 杈、侧 根 及 根 毛；茎 叶 生 长 正 常；变 异 率 2%。4.2.1.2 袋 装 苗 种 源 来 自 品 种 纯 正 的 瓶 苗；苗 龄 6 个 月 9 个 月；品 种 纯 度 9 8%；植 株 粗 壮，生 长 正 常，根 系 生 长 良 好；无 检 疫 性 病 虫 害；变 异 率 5%。4.2.2 分 级 标 准4.2.2.1 瓶 苗 分 级 标 准台 农 1 6 号 菠 萝 组 培 苗 瓶 苗 除 符 合 4.2.1.1 外，分 级 应 符 合 表 1 的 规 定。D B 4 6/T 4 1 1 2 0 1 634.2.2.2 袋 装 苗 分 级 标 准台 农 1 6 号 菠 萝 组 培 苗 袋 装 苗 除 符 合 4.2.1.2 外，分 级 应 符 合 表 2 的 规 定。表 1 台 农 1 6 号 菠 萝 组 培 苗 瓶 苗 分 级 指 标项 目级 别变异苗一级 二级三级种苗高(h),m m h 1 9.5 1 5.4 h 1 9.59.4h1 5.4 h8.3种苗茎粗(d),m m d5.4 4.2d5.43.5d4.2 d2.7最长叶长(l),m m l1 7.61 4.3l1 7.6 8.2l1 4.3 l 4.3最长叶宽(w),m m w6.44.8w6.4 4.5w4.8 w2.6品种纯度(p),%p9 8.0 p9 5.0 p9 2.0-表 2 台 农 1 6 号 菠 萝 组 培 苗 袋 装 苗 分 级 指 标项 目级 别一级 二级三级种苗高(h),m m h4 0 0 2 5 0h4 0 01 6 5h2 5 0种苗茎粗(d),m m d2 3.5 1 7d2 3.51 0.5d1 7最长叶长(l),m m l3 2 52 0 0 l 3 2 5 1 4 0 l 2 0 0最长叶宽(w),m m w 1 8.91 9.3 w 1 8.9 1 5.2 w 1 9.3品种纯度(p),%p9 8.0 p9 5.0 p9 2.05 台 农 1 6 号 菠 萝 组 培 苗 生 产 流 程外 植 体 的 选 择 外 植 体 的 处 理 接 种 初 代 培 养 继 代 培 养 壮 苗 生 根 培 养 炼 苗 移 栽。5.1 外 植 体 的 选 择5.1.1 母 本 园 的 选 择母 本 园 必 须 是 无 检 疫 性 病 虫 害 的 台 农 1 6 号 菠 萝 种 植 园。5.1.2 母 株 的 确 定选 择 品 种 纯 正、农 艺 性 状 优 良、生 长 健 壮、无 病 虫 害 的 植 株，并 逐 株 编 号 及 跟 踪 观 察，果 实 性 状 良好 的 确 定 为 母 株。5.1.3 外 植 体 的 采 集选 择 连 续 3 d 以 上 晴 天，在 1 3:0 0 1 6:0 0 之 间 采 取 母 株 的 吸 芽。5.2 外 植 体 的 处 理5.2.1 预 处 理从 母 本 园 采 取 的 健 康 吸 芽 用 自 来 水 冲 洗 2 0 m i n，剥 除 最 外 层 叶 片 后 用 饱 和 肥 皂 水 浸 泡 3 0 m i n，取 出用 自 来 水 冲 洗 干 净，再 去 掉 外 围 几 张 叶 片 后，将 叶 片 剪 短，放 入 灭 过 菌 的 容 器 内 待 用。D B 4 6/T 4 1 1 2 0 1 645.2.2 消 毒在 无 菌 操 作 台 上 进 行 无 菌 操 作，用 1%K M n O 4 浸 泡 经 预 处 理 的 外 植 体 5 m i n，无 菌 水 冲 洗 3 5 次；7 5%酒 精 处 理 3 0 s，无 菌 水 冲 洗 2 次，0.1%H g C l 2 消 毒 1 5 m i n，无 菌 水 冲 洗 3 5 次，用 灭 菌 纸 吸 干 水 待 用。5.3 初 代 培 养5.3.1 培 养 基 配 方M S+6-B A 0.5 m g/L+N A A 0.1 m g/L+K T 0.0 5 m g/L+蔗 糖 3 0 g/L+卡 拉 胶 6 g/L，p H 5.8 p H 6.0。5.3.2 培 养 条 件培 养 温 度 2 5 2 8，初 期 3 4 d 暗 培 养，1 5 天 以 后，光 照 时 间 1 0 h/d 1 2 h/d，光 照 强 度 1 5 0 0 L x。5.3.3 接 种按 5.2.2 消 毒 后 的 外 植 体 在 无 菌 条 件 下，在 无 菌 滤 纸 上 剥 除 外 部 叶 片，切 除 多 余 的 叶 伤 口 部 分，直 至露 出 1.5 c m 2 c m 的 芽 点，再 纵 剖 成 两 块 外 植 体，接 种 于 初 代 培 养 基 上。5.4 继 代 培 养5.4.1 培 养 基 配 方3/2 M S+6-B A 0.2 5 m g/L+N A A 0.5 m g/L+蔗 糖 3 0 g/L+卡 拉 胶 6 g/L，p H 5.8 6.0。5.4.2 培 养 条 件培 养 温 度 2 5 2 8，光 照 时 间 1 0 h/d 1 2 h/d，光 照 强 度 1 5 0 0 L x 2 0 0 0 L x。5.4.3 接 种将 初 代 培 养 获 得 的 丛 生 芽，到 继 代 培 养 基 中 培 养；切 成 若 干 小 层 芽，每 层 含 有 2 3 个 小 芽，同 时 切除 抽 生 过 高 的 叶 片、枯 死 老 叶 及 基 部 愈 伤 组 织，剔 除 不 正 常 芽，以 2 3 个 小 芽 转 接 到 继 代 培 养 基 上，周期 为 3 5 d。5.5 生 根 培 养5.5.1 培 养 基 配 方1/2 M S+6-B A 0.1 m g/L+I B A 2.0 m g/L+蔗 糖 3 0 g/L+卡 拉 胶 6 g/L，p H 5.8 6.0。5.5.2 培 养 条 件培 养 温 度 2 5 2 8，光 照 时 间 8 h/d 1 0 h/d，光 照 强 度 5 0 0 L x 1 0 0 0 L x。5.5.3 接 种继 代 获 得 的 丛 芽 长 高 至 4 c m 6 c m 时，切 取 生 长 健 壮、叶 色 舒 展、叶 色 正 常 生 根 的 丛 芽，接 种 到 生 根培 养 基 上。5.5.4 炼 苗生 根 培 养 1 5 d 后，组 培 苗 高 度 达 到 9.4 c m 以 上，长 至 6 c m 8 c m，生 根 率 达 1 0 0%，每 株 3 条 以 上 不 定根 时，根 系 发 达 完 整，可 置 于 7 5%遮 光 率 的 荫 棚 内 炼 苗，1 5 d 后 可 移 栽。D B 4 6/T 4 1 1 2 0 1 655.6 移 栽 与 管 理5.6.1 生 根 苗 洗 净 消 毒 后 分 级 放 置，分 块 移 栽，不 合 格 苗 沙 培 假 植；5.6.2 消 毒 时，可 选 用 用 5 0%百 菌 清 可 湿 性 粉 剂 或 5 0%多 菌 灵 可 湿 性 粉 剂 1 0 0 0 倍 液 消 毒 5 m i n，即 可移 栽 至 混 合 基 质 中；5.6.3 混 合 基 质 配 方 为：下 层 基 质（红 土、椰 糠、泥 炭 土 按 3:1.5:0.5），上 层 基 质 泥 炭 土；5.6.4 移 栽 后 马 上 淋 水 定 根；移 栽 2 d 3 d 后 开 始 喷 杀 菌 剂，如 多 菌 灵、百 菌 清 等；第 1 周 内 每 天 喷 雾水 3 4 次，使 相 对 湿 度 保 持 在 8 0%左 右，温 度 控 制 在 2 6 3 2，遮 光 率 为 7 5%以 上；1 5 d 后，叶 面 喷施 0.1%0.2%的 K H2P O4。6 检 疫初 代 培 养 后 取 1 个 增 殖 芽 作 好 标 记，送 有 关 植 检 部 门 进 行 病 毒 血 清 学 检 测（E L I S A）。经 验 证 无 病株 号 的 增 殖 芽 方 能 继 续 增 殖 培 养，用 以 生 产 大 量 组 培 苗；而 有 病 株 号 的 增 殖 芽 则 应 全 部 销 毁。如 需 调 运，种 苗 应 符 合 G B 1 5 5 6 9 的 规 定。7 包 装、标 志、运 输 和 贮 存7.1 包 装瓶 苗 可 保 留 在 组 培 容 器 中，并 用 木 箱 或 纸 箱 包 装；袋 装 苗 应 用 木 箱、塑 料 箱 等 硬 质 包 装 箱 包 装。7.2 标 志种 苗 应 附 有 标 签。标 签 内 容 包 括 类 型（瓶 苗 或 袋 装 苗）、品 种、检 验 证 书 编 号、等 级、数 量（株 数）、育 苗 单 位、出 厂（圃）日 期。包 装 箱 外 应 贴 标 签，注 明 品 种、等 级、规 格、数 量、产 地、出 苗 日 期 等。标 签 样 式 详 见 附 录 A。7.3 运 输按 不 同 品 种、级 别 装 车。用 蓬 车 辆 运 输，并 保 持 通 风 透 气；运 输 途 中 避 免 日 晒、雨 淋；装 车 时 应 小心 轻 放。7.4 贮 存种 苗 出 厂（圃）后 应 在 当 日 装 运，到 达 目 的 地 后 要 立 即 卸 车，并 置 于 荫 棚 或 阴 凉 处。瓶 苗 应 及 时 炼苗，袋 装 苗 应 及 早 定 植，若 有 特 殊 情 况 无 法 及 时 定 植 时，贮 存 时 间 不 应 超 过 6 d，贮 存 时 置 于 荫 棚 中，保 持 通 风，并 经 常 喷 水 保 持 基 质 湿 润。D B 4 6/T 4 1 1 2 0 1 66A A附 录 A（资 料 性 附 录）菠 萝 组 培 苗 标 签附 录 B 菠 萝 组 培 苗 标 签单位：c m1.5 0 8.0 0菠萝组培苗2.0 0 瓶 苗 袋装苗品 种 等 级2.0 0 2.0 0 2.0 0 2.0 0a）正面1.5 0 2.0 0 6.0 0育苗单位 1.2 02.0 0证书编号 1.2 0数量(株)出圃日期 1.2 0b）反面注：标签用厚度为 0.3 m m 的白色聚乙烯塑料薄片。标签孔用金属包边图 A.1 菠 萝 组 培 苗 标 签_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _