ICS 65.020 B 16 DB13 河 北 省 地 方 标 准 DB 13/T 2338.12016 谷子抗病虫性鉴定技术规程 第1部分：谷锈病 2016-05-23发布 2016-07-01实施 河北省质量技术监督局 发 布 DB13/T 2338.12016 I 前 言 本部分按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。DB13/T 2338谷子抗病虫性鉴定技术规程分为6个部分：第1部分：谷锈病；第2部分：谷瘟病；第3部分：白发病；第4部分：粒黑穗病；第5部分：线虫病；第6部分：粟芒蝇。本部分为DB13/T 2338的第1部分。本部分由河北省农林科学院提出。本部分起草单位：河北省农林科学院谷子研究所。本部分主要起草人：白辉、李志勇、王永芳、马继芳、全建章、郑直、董立、刘磊、董志平。DB13/T 2338.12016 1 谷子抗病虫性鉴定技术规程 第 1部分：谷锈病 1 范围 本标准规定了谷子抗谷锈病鉴定技术方法和抗性评价标准。本标准适用于谷子品种（系）和种质资源对谷锈病抗性的田间鉴定和评价。2 术语与定义 下列术语和定义适用于本文件。2.1 谷锈病 由粟单胞锈（Uromyces setariae-italicae(Diet.)Yoshino）引起的气传流行性病害，在谷子的叶片和叶鞘上都可发生，但主要为害叶片。多在中下部开始发病，在叶片表面与叶背面，尤其是叶背面，产生深红褐色斑点，稍隆起，即锈菌的夏孢子堆。谷锈菌夏孢子能够在我国谷子产区越冬越夏，并完成谷锈病的周年循环。2.2 种植区域 具有相似气候、生态条件和种植模式，种植品种类型相似的区域。3 接种体制备 3.1 病原物的采集与纯化 3.1.1 在谷子主产区采集谷锈病样品，采用涂抹接种方法，在谷子感病品种上接种繁殖。3.1.2 涂抹接种：首先用 0.05%的吐温 20水溶液将叶片喷湿，用手轻轻摩擦叶片表面，去掉表面蜡质和茸毛，然后用带有夏孢子的发病叶片在其上摩擦，使夏孢子涂布于叶片。在2632条件下保湿16h20h。3.1.3 收集叶片上产生的夏孢子，放入玻璃管后真空干燥，封口后放入-20冰箱中保存。记载采集时间、地点并编号。3.2 接种体繁殖 选择致病力较强的菌株进行繁殖。早春在温室或鉴定圃中播种感病品种，拔节后，将低温保存的谷锈菌夏孢子配置成悬浮液，加入0.05%的吐温20，采用喷雾法接种，至叶面布满菌液且菌液不滴下为宜，在2632下保湿16h20h。7d后开始发病并陆续产生大量夏孢子，供田间接种使用。4 田间抗病性鉴定 DB13/T 2338.12016 2 4.1 鉴定圃设置 鉴定圃应设置于谷锈病适发区。选择具有良好自然发病条件，地势平坦、灌溉便利、土壤肥沃的地块。4.2 对照品种 感病对照品种为豫谷1号。4.3 鉴定设计 鉴定材料顺序排列或随机排列。每份材料播种1行，行长1m，行距0.35m0.40m。每50份材料设1份感病对照。初鉴不设重复，复鉴设2次重复。在鉴定材料周围种植感病品种作为诱发行，试验区田间配置见图1所示。注：实线表示诱发行。虚线代表鉴定材料，且每个“”代表 1 份材料。图1 试验区田间配置示意图 4.4 种植要求 鉴定材料播种时间与大田生产播种时间相同或适当早播。5 接种 5.1 接种时期 在谷子拔节后进行接种。5.2 接种方法 接种时采集谷锈病发病叶片，洗下夏孢子，制成浓度为1105个夏孢子/ml菌液，加入吐温20使其终浓度为0.05%。在拔节后选择傍晚接种，将菌液均匀喷雾到鉴定材料和诱发行上，使叶面布满菌液且菌液不滴下。接种后进行田间灌水。2d3d内应在诱发行上再次接种。5.3 田间管理 接种前 4d5d 适当追施氮肥。接种后若遇干旱，应及时进行田间浇灌，保证病害发生发展所需要的湿度条件。其它管理同大田。6 病情调查 DB13/T 2338.12016 3 6.1 调查时间 在接种后15d，调查品种反应型；在感病对照品种普遍发病，且中下部叶片严重度达到65%以上时进行严重度调查。同批次鉴定材料需在同一天调查完成。6.2 调查方法 逐株调查每份鉴定材料及对照品种的发病情况，记载每株最高反应型和严重度。6.3 病情分级 6.3.1 反应型 据谷子对锈菌侵染后形成的坏死、褪色反应等将夏孢子堆类型划分为0、1、2、3、4五个级别，见表1，记载鉴定材料每株叶片最高反应型，根据群体结果作为鉴定材料的反应型。表1 谷锈病反应型级别症状描述 反应型 症状描述 1 级 夏孢子堆无，或针尖大小，数量少，周围组织有枯死反应。夏孢子堆破裂时叶片表皮撕裂不易见。2 级 夏孢子堆较小，周围组织有褪绿或褪绿反应不明显。夏孢子堆破裂时叶片表皮撕裂易见。3 级 夏孢子堆中等大小，周围组织无枯死反应，但有时有褪绿现象。夏孢子堆破裂时叶片表皮撕裂明显。4 级 夏孢子堆大而多，周围组织无褪绿或枯死反应。夏孢子堆破裂时叶片表皮撕裂明显。6.3.2 严重度 谷锈病严重度按夏孢子堆占叶面积的比例划分为9个等级，即0%，1%，5%，10%，25%，40%，65%，80%，100%。计算平均严重度见式（1）：平均严重度（%）=病级严重度值该级病株数/调查总株数（1）7 抗性评价 7.1 鉴定有效性判别 当感病对照品种反应型达到4，平均严重度达到65%及以上时，该批次抗病性鉴定视为有效。7.2 抗性评价标准 谷子抗锈评价已严重度作为判定标准（见表2），反应型级别作为参考。表2 谷子抗谷锈病评价标准 病情级别 反应型 平均严重度 抗性评价 1 0-1 级-高抗 Highly resistant（HR）3 2 级-抗 Resistant（R）5 3-4 级 25 中抗 Moderately resistant（MR）7 3 级 25 感 Susceptible（S）9 4 级 25 高感 Highly susceptible（HS）7.3 重复鉴定 DB13/T 2338.12016 4 初次鉴定表现为中抗以上的材料，次年需进行重复鉴定。7.4 抗性评价 每个中抗以上材料应有两年采用相同方法进行重复鉴定的结果。若年度间鉴定结果不一致，以记载的最高病情级别为准。8 鉴定记录 谷子抗谷锈病鉴定结果记载表格见表3。表3 年谷子抗谷锈病鉴定结果记录表 编号 品种/种质名称 来源 反应型 平均严重度 抗性评价 注 1:鉴定地点 注 2:接种病原菌分离物编号 注 3:接种日期 调查日期 鉴定技术负责人（签字）：_