ICS 67.120.10 X 22 备案号：49434-2016 DB15 内蒙古自治区地方标准 DB 15/T 9752016 畜产品牛羊肉中碳、氮同位素丰度比 检测方法 2016-03-20 发布 2016-06-20 实施 内蒙古自治区质量技术监督局 发布 DB15/T 9752016 前 言 本标准 按照GB/T 1.1-2009 给出的 规则 起草。本标准 由国 家乳 制品 及肉 类产品 质量 监督 检验 中心 提出。本标准 由内 蒙古 自治 区质 量技术 监督 局归口。本标准 起草 单位：国 家乳 制品及 肉类 产品 质量 监督 检验中 心。本标准 主要 起草 人：郑玉 山、高 杨、陈育 红、徐鹏。I DB15/T 9752016 畜产品牛羊肉中碳、氮同位素丰度比检测方法 1 范围 本标准 规定 了畜 产品 牛羊 肉中碳、氮 同位 素丰 度比 的检测 方法。本标准 适用 于畜 产品 牛羊 肉中碳、氮 同位 素丰 度比 的测定。2 规范性引用文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 6682 分析 实验 室用水 规 格和 试验 方法 3 原理 牛羊肉 经过 绞碎，索 氏提取 脱 脂干 燥后，采用 稳定同 位 素质 谱仪 测定 脱脂 牛羊 肉 中稳定 性碳、氮同位素。4 试剂与材料 4.1 除非另 有说 明，在分 析中 仅使用 确认 为分 析纯 的试剂 和 GB/T 6682 中 规定 的一 级 水。4.2 石油醚（30 60 沸 程）。4.3 滤纸：经脱 脂。4.4 脱脂棉。4.5 锡箔杯。5 仪器与设备 5.1 稳定同 位素 质谱 仪1)。5.2 干燥箱：可控温 103 2。5.3 分析天 平：感 量 0.0001 g。5.4 绞肉机：多 孔板 的孔 径不 超过4 mm 的绞肉 机。5.5 索氏抽 提器：接 收瓶 体积 为250 mL。5.6 100 目筛。5.7 称 量 瓶：直径 不小于 40 mm。6 分析方法 1)所列仪器为Thermo Scientific Orbitrap Elite 型稳定同位 素质谱仪，此处所列出的实验用型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号的仪器。1 DB15/T 9752016 6.1 试样前处理 将样品 用绞 肉机（5.4）绞碎 后，称 取3 g5 g 试 样，置 于 干燥 箱（5.2）中 完全干 燥 后，移入 滤纸筒（4.2）中，用石 油醚（4.1）进 行索 氏抽提（5.5）脱脂6 h8 h，收 集剩 余残渣（主要 成分 为粗蛋白）于 称量 瓶（5.7）中，在干燥 箱（5.2）中烘 干，冷 却 后过100 目筛（5.6）备用。6.2 同位素测定 6.2.1 稳定同位素质谱仪工作参数 进样器 氦气吹 扫流量 为200 mL/min，燃 烧炉温 度为1000，还 原炉 温 度为650，载气He流量 为90100 mL/min。He稀释压 力 为0.6 bar，CO2 参 考气 压力为0.6 bar，N2 参考 气 压力为1.0 bar。用USGS24（13CPDB=-16.00）标定CO2 钢瓶，用IAEAN（15Nair=0.4）标 定CO2 钢瓶，用标定 的钢瓶 器作 为标准。6.2.2 样品测定 称取适 量（6.1）备用样 品 放入锡 箔杯（4.4）中（称样 量 由仪 器峰 值大 小决 定），通 过稳 定同 位素质谱仪进 行测 定稳 定性 碳、氮 同位 素。平行 测定 样品。6.2.3 结果计算 稳定性碳、氮同位素比率分别用13C、15N 表示，其中13C的相对标 准为V-PDB，15N的相对标准 为空 气。计算 方 式见 公式(1)。()1000 1 21=RR（1）式中：()稳定 性同 位素 比率；R1 所测 样品 同位素 与 轻同 位素 丰度 比，即13C/12C、15N/14N；R2 标准 同位 素与轻 同 位素 丰度 比，即13C/12C、15N/14N。7 精密度 每个样 品重 复测 定3 次，取平 均 值，碳、氮 同位 素的 测定精 度均 大于等 于0.2；在重复 性条 件下 获得 的两 次独立 测定 结果 的绝 对差 值不应 超过 算术 平均 值的20%。2