ICS 65.020.20 B 05 备案号：35060-2012 DB22 吉林省 地方标准 DB 22/T 1586 2012 农田土壤中甲基汞、乙基汞的测定 高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用法 Determination of methyl-and ethyl-mercuries in field soil by HPLC-ICP-MS 2012-09-15发布 2012-10-31实施 吉林省质量技术监督局 发布 DB22/T 1586 2012 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009和 GB/T 20001.4-2001给出的规则起草。本标准由吉林省农业委员会提出并归口。本标准起草单位：吉林省农业科学院。本标准主要起草人：魏春雁、宋志峰、蔡玉红、陈冠宁、仇建飞、牛红红、樊慧梅、孟繁磊、何智 勇、武巍、杨建、马虹、张国辉、蔡红梅、王巍巍、黄璜。DB22/T 1586 2012 1 农田土壤中甲基汞、乙基汞的测定 高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用法 1 范围 本标准规定了高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用法（HPLC-ICP-MS）测定农 田土壤中甲基汞、乙基汞含量 的 原理、试剂与材料、仪器与设备、试样制备、测定 步骤、结果计算 和 精密度 等 内容。本标准 适 用 于 吉林省 区域内 农 田土壤样品中甲基汞、乙基汞含量 的测定。本标准 方 法 对 农 田土壤样品中甲基汞、乙基汞 的 检 出 限分别为 0.004 mg/kg和 0.008 mg/kg。2 规范性引用文件 下列文件对于 本 文件 的 应 用 是必不可少 的。凡是注明日期 的 引 用 文件，仅所注日期 的 版 本 适 用 于 本 文件。凡是不注日期 的 引 用 文件，其最新版 本（包括所有 的 修改 单）适 用 于 本 文件。GB/T 8170 数值修约 规则 与极限数值 的 表示 和 判 定 NY/T 52 土壤水分 测定法 NY/T 1121.1 土壤检 测 第 1部分：土壤样品 的 采集、处理 和 贮存 3 原理 试样 用 硝酸溶 液提 取，氨水溶 液 调 pH值，待 测液 经 高效液相色谱 将 甲基汞、乙基汞分 离，分 离 后 的甲基汞、乙基汞 依次进入 电感耦合等离子体质谱 仪（ICP-MS），经过气动雾化 器 以气 溶 胶 的 形式进入氩 气 为基 质的高 温射频 等离子体 中，使 待 测 元素去除 溶剂、原 子 化 和离子 化后，进入 质谱质 量分 析 器 进行 检 测。由 于甲基汞、乙基汞 的 检 测 信号强 度与其 在 样品中 的 浓 度 成正比，因此根据两种形态 汞 的 检 测 信 号强 度 进行 定 量。4 试剂与材料 除非另 有 说 明，本 方 法 所 用 试剂 均 为分 析纯，水应 符 合 GB/T 6682-2008规定的 一级 水 的要 求。所 用 的 玻璃 器 皿均需 用 20%硝酸 浸泡 12 h 以上，用 水 反复冲洗干净。确保 所有试剂 及 器 皿 不 会 带来 汞 污染。4.1 氯化 甲基汞：CAS 115-09-3，纯 度 大 于 98.5%。本 品 属级毒害 品，试 验过程 中应采取适 当 的 安 全 和 健康措施。4.2 氯化 乙基汞：CAS 107-27-7，纯 度 大 于 98.0%。本 品 属级毒害 品，试 验过程 中应采取适 当 的 安 全 和 健康措施。4.3 乙酸 铵。4.4 L-半胱 氨酸 盐 酸 盐。DB22/T 1586 2012 2 4.5 硝酸：优级纯，体 积百 分 比 为 38%。4.6 氨水：体 积百 分 比 为 28%29%。4.7 甲 醇：色谱 纯。4.8 硝酸溶 液（33+967，V/V）：取 33 mL硝酸（4.5），用 水 稀 释至 1000 mL。4.9 氨水溶 液（10+90，V/V）：取 10 mL氨水（4.6），用 水 稀 释至 100 mL。4.10 硝酸溶 液（2+98，V/V）：取 2 mL硝酸（4.5），用 水 稀 释至 100 mL。4.11 质谱 调 谐 液：推荐选 用 含有 钴（Co）、钇（Y）、铊（Tl）元素 的质谱 调 谐 液，调 谐 液 浓 度为仪 器 生产商推荐 浓 度，介 质 为 2%硝酸。4.12 甲基汞、乙基汞 混 合标准 储 备 液：准 确 称 取 氯化 甲基汞、氯化 乙基汞 各 1 g(以 甲基汞 和 乙基汞计)，精 确 至 0.1 mg，用 硝酸溶 液（4.10）溶 解 并定 容 至 1000 mL，配 制 成 1000 mg/L的 甲基汞、乙基汞 标准 储 备 液，于 0 4 冰箱 中 储 存，有 效 期为 3个月。4.13 甲基汞、乙基汞 混 合标准 中 间 液：吸 取适 当 体 积 的 氯化 甲基汞、氯化 乙基汞 标准 储 备 液（4.12），用 水 逐 级稀 释，配 制 成 0.1 mg/L的标准 中 间 液，于 0 4 冰箱 中 储 存，有 效 期为 1个月。4.14 甲基汞、乙基汞 混 合标准 工作 液：用 移 液 管 分别 移 取 标准 中 间 液（4.13）0 mL、0.10 mL、0.50 mL、5.00 mL、25 mL、50.0 mL于 6个 100 mL容量 瓶 中，用 水 稀 释至刻 度，混匀，现 用 现配。该 溶 液 各 种 形态 汞 浓 度 均 为 0 g/mL、0.0001 g/mL、0.0005 g/mL、0.005 g/mL、0.025 g/mL、0.050 g/mL。5 仪器与设备 5.1 电感耦合等离子体质谱 仪。5.2 高效液相色谱。5.3 分 析 天平：感 量 0.0001 g和 0.01 g。5.4 离 心机：转速 不 低 于 4000 r/min。5.5 超声波 水 浴。5.6 玛瑙研钵。5.7 针孔 式过 滤 器：0.45 m。6 试样制备 按照 NY/T 1121.1的规定 制备试样，其含水量（W）按 NY/T 52的规定测定。7 测定步骤 7.1 试样浸提 DB22/T 1586 2012 3 称 取试样 5 g左右（精 确 至 0.01g）于 50 mL离 心管 中，缓慢加 入 硝酸溶 液（4.8）20 mL，边加边 搅拌至 不 产生 气泡 为 止，超声 提 取 1.0 h，4000 r/min离 心 5 min，吸 取 上 层澄清 溶 液 5.00 mL于 25 mL烧杯 中，用 氨水溶 液（4.9）调 pH值 到 7.5，转移至 25 mL容量 瓶 中，加 水 定 容 至刻 度，摇匀，过 0.45 m滤膜，上 机 测定。7.2 仪器参考条件 7.2.1 液相色谱条件 色谱 柱：C18柱，柱长 150 mm，内 径 4.6 mm，粒 度 3.5 m；或者性能 相 当 的色谱 柱。柱 温：25。流 动 相：5 mmol/L乙酸 铵、3.8 mmol/L L-半胱 氨酸 盐 酸 盐-甲 醇（95+5，V/V）溶 液，先加 适量氨 水（4.6），再 用 氨水溶 液（4.9）调 pH至 7.5。流 动 相 现 用 现配，使 用 时间 不 超 过 24 h。流 动 相 流速：1.0 mL/min.进 样 体 积：100 L。色谱 分 离 中 需保 证 甲基汞、乙基汞 的 分 离 度 R 1.5。按照 上 述 色谱 条 件 进行 分 离测定，标准 品 总离子 流 色谱 图见附录 A。7.2.2 电感耦合等离子体质谱仪条件 在 无碰 撞 气 模 式 下，使 用质谱 调 谐 液（4.11）对仪器 工作 状 态进行优化，调 谐 参 数 见 表 1。优化后 的 状 态 指 标 见 表 2。表 1 电感耦合等离子体质谱仪调谐参数 参 数 RF功率 W 采样 深 度 mm 载 气 流速 L/min 补偿 气 流速L/min 蠕 动 泵 转速 r/min 雾化 室 温 度 设 定 值 1300 1500 6 9 6.0 10.0 0.4 0.6 0.3 2 注：本 参 数设 定 值为 参考 值，实际 工作 中应 根据 不 同型 号 仪器 进行 调 整。表 2 电感耦合等离子体质谱仪调谐指标 质 量 轴%灵敏 度 b 参 数 Co(59)Y(89)Tl(205)质 量分 辨率 a amu Y(89)Tl(205)氧 化 物 c%双 电 荷 d%要 求 值 5 0.65 0.80 20000 12000 1.5 3.0 注：本 参 数 要 求 值为 参考 值，实际 工作 中应 根据 不 同型 号 仪器 进行 调 整。a 峰 宽 为 10%的质 量分 辨率。b 积 分 时间 为 0.1 sec，调 谐 液 浓 度为 1 ng/mL的 灵敏 度。c CeO/Ce。d Ce2+/Ce。7.3 测定 定 性 方 法：甲基汞、乙基汞 均以 202Hg为检 测质 量数，试样与 标准 品中甲基汞、乙基汞 色谱峰 保 留 时 间 的相 对 偏差 不 大 于 5%，即 可判 定 试样中存 在 甲基汞、乙基汞。定 量方 法：将 甲基汞、乙基汞 混 合标准 工作 液（4.14）按照 7.2的 仪器 条 件 进行 分 析，以浓 度为 横 坐 标，峰 面 积 为 纵坐 标，绘 制 标准 工作 曲线，用标准 工作 曲线 对试样 进行 定 量，保 证 甲基汞、乙基汞 的 响 应值应 在 测定 线 性 范围 内。DB22/T 1586 2012 4 8 结果计算 8.1 试样中甲基汞、乙基汞含量 按 式（1）进行 计算。nW mV CxXj-=1000)100(1000（1）式 中：Xj 试样中甲基汞、乙基汞含量（mg/kg）；Cx 标准 曲线 上 查得 的 甲基汞、乙基汞 的 浓 度（g/mL）；V 浸 提液的体 积（mL）；m 样品 的质 量（g）；W 样品含水量（%）；n 稀 释 倍 数。8.2 平 行 测定 结果 用 算 术 平 均 值表示，数值修约 按照 GB/T 8170执 行，保 留 两 位 有 效 数 字。9 精密度 重 复 性 不 大 于 15%，再现性 不 大 于 20%。DB22/T 1586 2012 5 A A 附 录 A（资料性附录）甲基汞、乙基汞标准 物 质 总 离子 流图。A.1 甲基汞、乙基汞标准 物 质 总 离子 流图 甲基汞、乙基汞 标准 物 质 总 离子 流图见图 A.1。0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.001000200030004000500060007000800090001000011000120001300014000150001600017000180001900020000210002200023000120.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.0010002000300040005000600070008000900010000110001200013000140001500016000170001800019000200002100022000230000.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00100020003000400050006000700080009000100001100012000130001400015000160001700018000190002000021000220002300012 1-甲基汞；2-乙基汞 图 A.1 甲基汞、乙基汞标准 物 质 总 离子 流图 _