ICS 07.080 X61 DB35 福建省地方标准 DB35/T 11582011 橄榄种质资源鉴定技术规程 Technical code for evaluating germplasm of Chinese olive 2011-07-01发布 2011-10-01实施福建省质量技术监督局 发布 福建省地方标准 橄榄种质资源鉴定技术规程 D B3 5/T 1 1 58 2011*2011年 8月第一版 2011年 8月第一次印刷 DB35/T 11582011 I 前 言 本标准根据GB/T 1.1-2009给出的规则编写。本标准由福建省农业厅提出并归口。本标准起草单位：福州市橄榄行业协会、福州市经济作物技术站。本标准主要起草人：许长同、王艳娜、陈思聪。DB35/T 11582011 1 橄榄种质资源鉴定技术规程 1 范围 本标准规定了橄榄Canarium album(Lour.)Rauesch.种质资源鉴定的技术要求和方法。本标准适用于橄榄Canarium album(Lour.)Rauesch.种资资源的植物学特征、生物学特性、果实性状的鉴定，亦可供橄榄属其他种的资源鉴定参照执行。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 5009.92 食品中钙的测定 GB/T 6195 水果、蔬菜维生素C含量测定法（2，6-二氯靛酚滴定法）GB/T 12143 饮料通用分析方法 NY/T 1594 水果中总膳食纤维的测定 非酶重量法 NY/T 1600 水果、蔬菜及其制品中单宁含量的测定分光光度法 3 鉴定内容 橄榄种质资源鉴定内容见表1。表1 橄榄种质资源鉴定内容 鉴 定 项 目 树形 树姿、树势、树冠 根 根系类型 枝 芽尖裸露度、新梢茸毛、主干颜色 叶 幼叶颜色、叶面颜色、叶背颜色、叶面形态、叶面光泽、叶尖形状、叶基形状、叶缘形状、小叶质地、小叶形状、小叶长度、小叶宽度、复叶着生姿态、复叶主轴长度、小叶对数、小叶排列方式、复叶类型 花 花蕾直径、花冠直径、花瓣的颜色、花序类型、花序花性类型、花性比例、花序花朵数、花序着生位置、花序支轴数、花序长度 性 状 果实形状、果顶形状、果顶沟纹、果基形状、果基散射线、果基沟纹、果面沟纹、果皮颜色、果皮光滑度、单果重、果实可食率、果实纵径、果实横径、果肉厚度、果肉颜色、果肉质地、果肉香气、果肉涩味、果肉回甘、果核重、果核颜色、果核形状、果核纵径、果核横径、种仁数、果穗长度、果穗重、穗粒数、果穗类型、果实整齐度 果实 理化指标 可溶性固形物含量、可滴定酸含量、可溶性糖含量、维生素 C 含量、总膳食纤维含量、钙含量、黄酮含量、单宁含量 物候期 新梢萌发期、花芽形态分化期、现蕾期、初花期、盛花期、生理落果期、坐果率、果实成熟期 注：表1中加粗的为主要鉴定项目。DB35/T 11582011 2 4 鉴定方法与指标 4.1 样本采集 取自成年的生长正常的结果植株。4.2 树形 4.2.1 树姿 取代表性植株，测量3个基部主枝中心轴线与主干的夹角，依据夹角的平均值确定树姿类型。树姿分为：1、直立（夹角30o）；2、半开张（30o夹角60o）；3、开张（60o夹角90o）；4、下垂（夹角90o）。4.2.2 树势 在秋梢停止生长期，观察植株的生长势、叶幕层和新梢生长情况，按最大相似原则确定树势类型。分为：1、弱；2、中等；3、强。4.2.3 树冠 在秋梢停止生长期，观察植株的树冠形状，按最大相似原则确定树冠类型。分为：1、半圆型；2、圆头型。4.3 根 4.3.1 根系类型 观察植株的根系，判断植株的根系类型。分为：1、自根系；2、砧木根系。4.4 枝 4.4.1 芽尖裸露度 在秋梢老熟期，从树冠外围不同部位，选择发育充实的10个一年生秋梢，观察枝条中部芽与芽托的相对位置，按图1以最大相似原则确定芽尖裸露度。分为：1、裸露；2、微露；3、不露。裸 露微 露 不 露 图1 芽尖裸露度 4.4.2 新梢茸毛 在新梢生长初期，观察新梢茸毛的有无和多少。分为：1、无；2、少；3、多。4.4.3 主干颜色 DB35/T 11582011 3 取代表性植株，采用目测法观察或用标准比色卡 英国皇家园艺学会标准比色卡（The RHS Colour Chart）下同，按最大相似原则确定植株主干表皮颜色。分为：1、浅灰色；2、灰褐色；3、深褐色。4.5 叶 4.5.1 幼叶颜色 在新梢抽发初期，观察刚展开的新梢顶端幼嫩叶片，采用目测法观察或用标准比色卡，按最大相似原则确定幼叶颜色。分为：1、浅绿色；2、绿色；3、红绿色；4、红褐色。4.5.2 叶面颜色 在秋梢老熟期，从树冠外围不同部位，选择发育充实的10个一年生秋梢，随机选取中部复叶20片，选择复叶叶轴先端向下第2、3对成熟叶片20片，采用目测法观察或用标准比色卡，按最大相似原则确定叶片的叶面颜色。分为：1、浅绿色；2、深绿色。4.5.3 叶背颜色 用4.5.2的叶片样本，采用目测法观察或用标准比色卡，按最大相似原则确定叶片的叶背颜色。分为：1、黄绿色；2、绿色。4.5.4 叶面形态 用4.5.2的叶片样本，按图2以最大相似原则确定叶面状态。分为：1、平展；2、内卷；3、外卷。平 展 内 卷外 卷 图2 叶面状态 4.5.5 叶面光泽 用4.5.2的叶片样本，观察叶片正面光泽的有无。分为：1、无；2、有。4.5.6 叶尖形状 用4.5.2的叶片样本，按图3以最大相似原则确定叶尖形状。分为：1、钝尖；2、渐尖；3、急尖；4、长尾尖；5、偏沟尖。钝 尖 急 尖 长尾尖 渐 尖 偏沟尖 图3 叶尖形状 4.5.7 叶基形状 DB35/T 11582011 4 用4.5.2的叶片样本，按图4以最大相似原则确定叶基形状。分为：1、狭楔形；2、楔形；3、宽楔形；4、钝圆形；5、偏斜形。狭楔形 楔 形 宽楔形 钝圆形 偏斜形 图4 叶基形状 4.5.8 叶缘形状 用4.5.2的叶片样本，按图5以最大相似原则确定叶缘形状。分为：1、平滑；2、微波浪形；3、波浪形。平 滑 微波浪形 波浪形 图5 叶缘形状 4.5.9 小叶质地 用4.5.2的叶片样本，用手（捏）感觉叶片质地的软硬、厚薄状况。分为：1、薄软；2、厚硬。4.5.10 小叶形状 用4.5.2的叶片样本，按图6以最大相似原则确定叶片形状。分为：1、披针形；2、长椭圆形；3、椭圆形；4、卵圆形。披针形 椭圆形 卵圆形长椭圆形 图6 小叶形状 4.5.11 小叶长度 DB35/T 11582011 5 用4.5.2的叶片样本，测量小叶基部至叶尖的长度。去除测量结果中2个最大值和2个最小值，结果以平均值表示，精确到0.1cm。4.5.12 小叶宽度 用4.5.2的叶片样本，测量小叶最宽处的宽度。去除测量结果中2个最大值和2个最小值，结果以平均值表示，精确到0.1cm。4.5.13 复叶着生姿态 用4.5.2的复叶样本，按图7以最大相似原则确定复叶着生于枝梢上的姿态。分为：1、斜向上；2、平伸；3、斜向下。斜向上 平 伸 斜向下 图7 复叶着生姿态 4.5.14 复叶主轴长度 用4.5.2的复叶样本，测量复叶中轴基部至先端的长度。去除测量结果中2个最大值和2个最小值，结果以平均值表示，精确到0.1cm。4.5.15 小叶对数 用4.5.2的复叶样本，观察记录每片复叶中的小叶对数。去除记录结果中2个最大值和2个最小值，结果以平均值表示，精确到0.1。4.5.16 小叶排列方式 在秋梢老熟期，从树冠外围不同部位，选择发育充实的一年生秋梢，随机选取中部复叶100片，观察每片复叶中的小叶排列方式，以出现75%以上的情况为准。分为：1.互生；2.对生。4.5.17 复叶类型 用4.5.16的复叶样本，观察每片复叶中的小叶数目的奇偶数，以出现75%以上的情况为准。分为：1、奇数羽状复叶；2、偶数羽状复叶；3、中间型。4.6 花 4.6.1 花蕾直径 在初花期，选取树冠外围不同部位发育正常的花序20个，随机选取花蕾20个，测量花蕾的最大处直径。去除测量结果中2个最大值和2个最小值，结果以平均值表示，精确到0.1mm。DB35/T 11582011 6 4.6.2 花冠直径 在盛花期，从树冠外围不同部位选取发育正常的花序20个，随机选取完成开放的花朵20朵，测量花冠的最大处直径。去除测量结果中2个最大值和2个最小值，结果以平均值表示，精确到0.1mm。4.6.3 花瓣的颜色 用4.6.2的花朵样本，采用目测法观察或用标准比色卡，按最大相似原则确定花瓣的颜色。分为：1、黄色；2、白色；3、粉红色。4.6.4 花序类型 用4.6.1的花序样本，观察花序的类型，分为：1、总状花序；2、圆锥花序。4.6.5 花序花性类型 用4.6.1的花序样本，按图8确定花序上花的类型，判断花序的花性类型，分为：1、雄花序；2、雌花序；3、两性花序；4、混合花序。雄 花 雌 花 两性花 畸形花 图8 花的类型纵剖图 4.6.6 花性比例 用4.6.1的花序样本，分别统计每花序上雄花、雌花和两性花的数量，计算雄花、雌花和两性花的比值。结果以平均值表示，精确到0.1。4.6.7 花序花朵数 用4.6.1的花序样本，计数每个花序的花朵数。去除计数结果中2个最大值和2个最小值，结果以平均值表示，精确到0.1朵。4.6.8 花序着生位置 用4.6.1的花序样本，观察花序的着生位置比例。分为：1、腋生；2、顶生。4.6.9 花序支轴数 用4.6.1的花序样本，计数每个花序的一级支轴数。去除计数结果中2个最大值和2个最小值，结果以平均值表示，精确到0.1。4.6.10 花序长度 DB35/T 11582011 7 用4.6.1的花序样本，测量花序基部至先端的长度。去除测量结果中2个最大值和2个最小值，结果以平均值表示，精确到0.1cm。4.7 果实 4.7.1 性状 4.7.1.1 果实形状 在果实成熟期，随机选择不同部位有代表性的成熟果穗20个，随机选取10个代表性果实，按图9以最大相似原则果实形状。分为：1、长梭形；2、纺锤形；3、长椭圆形；4、椭圆形；5卵圆形；6、近圆形。近圆形 卵圆形 椭圆形 长椭圆形 纺锤形 长梭形 图9 果实形状 4.7.1.2 果顶形状 用4.7.1.1的果实样本，按图10以最大相似原则果顶形状。分为：1、锐尖；2、尖圆；3、钝圆；4、浑圆。锐 尖 尖 圆 钝 圆 浑 圆 图10 果顶形状 4.7.1.3 果顶沟纹 用4.7.1.1的果实样本，观察果顶沟纹的明显程度。分为：1、不明显；2、明显。4.7.1.4 果基形状 用4.7.1.1的果实样本，按图11以最大相似原则果基形状。分为：1、双肩耸起；2、广平；3、尖峭；4、下斜。双肩耸起 广 平 尖 峭 下 斜 图11 果基形状 4.7.1.5 果基散射线 用4.7.1.1的果实样本，观察果基散射线的有无。分为：1、有；2、无。4.7.1.6 果基沟纹 DB35/T 11582011 8 用4.7.1.1的果实样本，观察果基沟纹的明显程度。分为：1、不明显；2、明显。4.7.1.7 果面沟纹 用4.7.1.1的果实样本，观察果面沟纹的明显程度。分为：1、不明显；2、明显。4.7.1.8 果皮颜色 用4.7.1.1的果实样本，采用目测法观察或用标准比色卡，按最大相似原则确定果皮颜色。分为：1、黄色；2、黄绿色；3、浅绿色；4、青色（深绿色）。4.7.1.9 果皮光滑度 用4.7.1.1的果实样本，用手（摸）感觉果皮的光滑度。分为：1、光滑；2、粗糙。4.7.1.10 单果重 用4.7.1.1的果实样本，称取果实的质量，计算单果质量。结果以平均值表示，精确到0.1g。4.7.1.11 果实可食率 用4.7.1.1的果实样本，称取果实总质量。用4.7.1.20的样本，称取果核等不可食部分的总质量。计算可食部分占总果重的百分率（%）。结果以平均值表示，精确到0.1%。4.7.1.12 果实纵径 用4.7.1.1的果实样本，测量从果顶到果基的最大长度。结果以平均值表示，精确到0.1cm。4.7.1.13 果实横径 用4.7.1.1的果实样本，测量果实最大横切面的最大直径。结果以平均值表示，精确到0.1cm。4.7.1.14 果肉厚度 用4.7.1.1的果实样本，按从果实中间纵切，测量最大横切面处的果肉厚度。结果以平均值表示，精确到0.1mm。4.7.1.15 果肉颜色 用4.7.1.14的果实样本，观察切开后的果实，采用目测法观察或用标准比色卡，按最大相似原则确定果肉颜色。分为：1、乳白色；2、黄白色；3、黄色；4、黄绿色；5、浅绿色。4.7.1.16 果肉质地 用4.7.1.1的果实样本，品尝判断果肉质地。分为：1、粗韧；2、细嫩；3、松脆。4.7.1.17 果肉香气 用4.7.1.1的果实样本，品尝判断果肉香气。分为：1、无；2、有。4.7.1.18 果肉涩味 用4.7.1.1的果实样本，品尝判断果肉涩味。对果肉的涩味进行判断，分为：1、苦涩；2、酸涩；3、涩；4、无涩。DB35/T 11582011 9 4.7.1.19 果肉回甘 用4.7.1.1的果实样本，对果肉的回甘进行判断，分为：1、差；2、中；3、好。4.7.1.20 果核重 用4.7.1.1的果实样本，剥离果肉，称取果核的质量。结果以平均值表示，精确到0.1g。4.7.1.21 果核颜色 用4.7.1.20的果核样本，采用目测法观察或用标准比色卡，按最大相似原则确定果核颜色。分为：1、浅黄色；2、黄色；3、黄褐色；4、棕褐色。4.7.1.22 果核形状 用4.7.1.20的果核样本，按图12以最大相似原则果核形状。分为：1、阔棱形；2、长梭形；3、纺锤形；4、长椭圆形。长梭形 纺锤形 长椭圆形 阔棱形 图12 果核形状 4.7.1.23 果核纵径 用4.7.1.20的果核样本，测量果核的最大长度。结果以平均值表示，精确到0.1cm。4.7.1.24 果核横径 用4.7.1.20的果核样本，测量果核最大横切面的最大直径。结果以平均值表示，精确到0.1cm。4.7.1.25 种仁数 用4.7.1.20的果核样本，计数每个果核的种仁数。结果以平均值表示，精确到0.1枚。4.7.1.26 果穗长度 用4.7.1.1的果穗样本，测量果穗基部至先端的长度。去除测量结果中2个最大值和2个最小值，结果以平均值表示，精确到0.1cm。4.7.1.27 果穗重 用4.7.1.1的果穗样本，称量每个果穗的质量。去除称量结果中2个最大值和2个最小值，结果以平均值表示，精确到0.1g。4.7.1.28 穗粒数 DB35/T 11582011 10 用4.7.1.1的果穗样本，计数每个果穗中的果粒数。去除计数结果中2个最大值和2个最小值，结果以平均值表示，精确到0.1粒。4.7.1.29 果穗类型 用4.7.1.1的果穗样本，观察果穗的大小，结果性能和果穗上果实排列的紧密程度，分为：1、龙穗（果穗较长，果实排列松散）；2、虎穗（果穗较短，果实排列紧凑）。4.7.1.30 果实整齐度 用4.7.1.1的果穗样本，观察果穗上果实大小和形状，按果实大小及形状的一致性，确定果实的整齐度。分为：1、差（果实大小和形状差异明显）；2、中（果实大小和形状较整齐）；3、好（果实大小和形状整齐）。4.7.2 理化指标 4.7.2.1 可溶性固形物含量 按GB/T 12143执行。4.7.2.2 可滴定酸含量 按附录A执行。4.7.2.3 可溶性糖含量 按附录B执行。4.7.2.4 维生素C 含量 按GB/T 6195执行。4.7.2.5 总膳食纤维含量 按NY/T 1594执行。4.7.2.6 钙含量 按GB/T 5009.92执行。4.7.2.7 黄酮含量 按GB/T 12143执行。4.7.2.8 单宁含量 按NY/T 1600执行。4.8 物候期 4.8.1 新梢萌发期 观察全树新梢的萌发情况，以约50%以上枝梢顶芽生长至约2cm时的日期为新梢萌发期。分别记录春、夏、秋、冬各个阶段的新梢萌发期，以年月日表示，格式为YYYYMMDD。1、春梢；2、夏梢；3、秋梢；4、冬梢。DB35/T 11582011 11 4.8.2 花芽形态分化期 观察全树花序分化情况，记录约有10%花序主轴叶腋间出现花序原基的日期。以年月日表示，格式为YYYYMMDD。4.8.3 现蕾期 观察全树现蕾情况，记录约有5%花序出现花蕾的日期。以年月日表示，格式为YYYYMMDD。4.8.4 初花期 观察全树开花情况，记录约有5%花朵开放的日期。以年月日表示，格式为YYYYMMDD。4.8.5 盛花期 观察全树开花情况，记录约有25%花朵开放的日期。以年月日表示，格式为YYYYMMDD。4.8.6 生理落果期 观察全树结果情况，分别记录果实二次大量集中脱离的日期。以年月日表示，格式为YYYYMMDD。4.8.7 坐果率 在初花期，选择不同部位发育正常的花序10个，记录每花序上花朵的数量。第二次生理落果后，调查并记录每穗坐果数，计算坐果数占花朵总数的百分率。结果以平均值表示，精确到0.1%。4.8.8 果实成熟期 观察全树果实成熟情况，记录约有80%的果实大小已长定而逐步出现应有的色、香、味等成熟特征的日期。以年月日表示，格式为YYYYMMDD。DB35/T 11582011 12 A A 附 录 A（规范性附录）可滴定酸度的测定 A.1 范围 本附录规定了橄榄果实可滴定酸度的两种测定方法，即电位滴定法和指示剂滴定法。本附录适用于测定橄榄果实的可滴定酸度。电位滴定法为仲裁法，指示剂滴定法为常规法。指示剂滴定法不适用于浸出液颜色较深的试样。A.2 样液制备 A.2.1 仪器 a)高速组织捣碎机：10 000r/min12 000r/min。b)架盘天平：感量 0.01g。c)电热恒温水浴锅。d)移液管：50mL。e)烧杯：100mL、600mL。f)容量瓶：250mL。g)漏斗：直径 7cm。h)锥形瓶：250mL。i)快速滤纸：直径 12.5cm。A.2.2 制备方法 本试验用水应是不含二氧化碳的或中性蒸馏水，可在使用前将蒸馏水煮沸、放冷或加入酚酞指示剂用0.1mol/L氢氧化钠中和至出现微红色。剔除试样的非食用部分（冷冻制品预先在加盖的容器中解冻），用四分法分取可食部分切碎混匀，称取250g，准确至0.1g，放入高速组织捣碎机内，加入等量水捣碎1min2min。每2g匀浆折算为1g试样，称取匀浆50g100g，准确至0.1g，用100mL水洗入250mL容量瓶，置7580水浴上加热30min，其间摇动数次，取出冷却，加水至刻度，摇匀过滤。A.3 测定方法 A.3.1 电位滴定法 A.3.1.1 原理 试样浸出液用0.1mol/L氢氧化钠标准溶液进行电位滴定，以pH 8.1为滴定终点。A.3.1.2 试剂 pH 4.01标准缓冲液（25）。DB35/T 11582011 13 pH 9.18标准缓冲液（25）。氢氧化钠（GB 629）标准溶液：c(NaOH)=0.1mol/L,参照GB 601标准溶液的指标方法准确标定。A.3.1.3 仪器 a)酸度计：用 pH 4.01 标准缓冲液校正后，测定 pH 9.18 标准缓冲液，测定误差不大于 0.05。b)玻璃电极和甘汞电极。c)磁力搅拌器。d)搅拌棒。e)移液管：50mL、100mL。f)烧杯：100mL、250mL。g)滴定管：碱式，10mL、25mL。A.3.1.4 测定步骤 用pH 4.01和pH 9.18标准缓冲液按仪器说明书校正酸度计。根据预测酸度，用移液管吸取50mL或100mL试样浸出液（见A.2.2），放入适当大小的烧杯中，使氢氧化钠标准溶液的滴定体积不小于5mL。将盛样液的烧杯置于磁力搅拌器上，放入搅拌棒，插入玻璃电极和甘汞电极，滴定管尖端插入样液内0.5cm1.0cm，在不断搅拌下用氢氧化钠溶液迅速滴定至pH 6而后减慢滴定速度。当接近pH 7.5时，每次加入0.1mL0.2mL，并于每次加入后记录pH读数和氢氧化钠溶液的总体积，继续滴定至少pH 8.3，在pH 8.10.2的范围内，用内插法求出滴定至pH 8.1所消耗的氢氧化钠溶液的体积。A.3.2 指示剂滴定法 A.3.2.1 原理 样液浸出液以酚酞为指示剂，用0.1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定。A.3.2.2 试剂 氢氧化钠标准溶液：0.1mol/L(见A.3.1.2)。酚酞指示剂：10g/L的95%（V/V）乙醇（GB 697）溶液。A.3.2.3 仪器 a)移液管：50mL、100mL。b)锥形瓶：150mL、250mL。c)滴定管：碱式，10mL、25mL。A.3.2.4 测定步骤 根据预测酸度，用移液管吸取50mL或100mL样液（见A.2.2）,加入酚酞指示剂510滴，用氢氧化钠标准溶液滴定，至出现微红色30s内不褪色为终点，记下所消耗的体积。注：如果样液滴定至接近终点时出现黄褐色，这时可加入样液体积12倍的热水稀释，加入酚酞指示剂0.5mL1mL，再继续滴定，使酚酞变色易于观察。A.4 测定结果的计算 DB35/T 11582011 14 A.4.1 计算公式 a)试样的可滴定酸度（1A）以每 100g 或100mL 中氢离子毫摩尔数表示，按式（A.1）计算：()()100250100/011=V m VV cmL g mmol A.(A.1)式中：1A 试样的可滴定酸度，单位为mmol/100g(mL)；c氢氧化钠标准溶液摩尔浓度；1V 滴定时所消耗的氢氧化钠标准溶液体积，单位为mL；0V 吸取滴定用的样液体积，单位为mL；()V m 试样质量，单位为g（或试样体积，单位为mL）；250试样浸提后定容体积，单位为mL。b)试样的可滴定酸度（2A）以苹果酸的百分含量表示，按式（A.2）计算：()()100250 067.0%02=V m VV cA.(A.2)式中：2A 试样的可滴定酸度，以苹果酸的百分含量（%）表示；0.067换算为苹果酸克数的系数。其余符号同式（A.1）。A.4.2 结果表示 同一试样取两个平行样测定，以其算术平均值作为测定结果。用每100g或100mL中氢离子毫摩尔数表示的，保留一位小数；用酸的百分含量表示的，保留二位小数。A.4.3 允许差 两个平行样的测定值相差不得大于平均值的2%。注：报告检验结果应注明所用的测定方法。DB35/T 11582011 15 B B 附 录 B（规范性附录）可溶性糖测定法 B.1 范围 本附录适用于橄榄果实可溶性糖的测定。B.2 测定原理 在沸热条件下，用还原糖溶液滴定一定量的费林试剂时将费林试剂中的二价铜还原为一价铜，以亚甲基蓝为指示剂，稍过量的还原糖立即使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝。B.3 仪器设备 a)高速组织捣碎机 b)电热恒温水浴；c)1000W 调温电炉；d)玻璃仪器：200mL，250mL容量瓶；250mL 锥形瓶；50mL 碱式滴定管。B.4 试剂配制 B.4.1 费林试剂甲 称取硫酸铜（CuSO45H2O，分析纯）34.6g溶于水中，稀释至500mL，过滤，贮于棕色瓶内。B.4.2 费林试剂乙 称取氢氧化钠50g和酒石酸钾钠（KNaC4O6H44H2O,分析纯）138g溶于水中，稀释至500mL,用石棉垫漏斗抽滤。B.4.3 转化糖标准溶液 称取9.5g蔗糖（分析纯）用水溶解后转入1000mL容量瓶中，加入6mol HCl（分析纯）10mL，加水至100mL。在2025下放置3d或在25下保温24h,然后用水定容（此为酸化的1%转化糖液，可保存34个月）。测定时，取1%转化糖液25.00mL放入250mL容量瓶中，加入甲基红指示剂1滴，用1molNaOH溶液中和后用水定容，即为1mg/mL转化糖标准溶液。B.4.4 亚甲基蓝溶液 称取0.5g亚甲基蓝（分析纯）溶于100mL水中。B.4.5 乙酸锌溶液 称取21.9g乙酸锌Zn(OAC)22H2O,分析纯溶于水中，加冰乙酸3mL，稀释至100mL。DB35/T 11582011 16 B.4.6 亚铁氰化钾溶液 称取10.6g亚铁氰化钾K4Fe(CN)63H2O,分析纯溶于水中，稀释至100mL。B.5 样品提取液制备 取待测样品适量，洗净，用不锈钢刀将可食部分切成适当小块充分混匀后，按四分法取样。称取100g鲜样加入等质量的水，放入组织捣碎机中捣成1:1匀浆，匀浆比例可适当调整。称取匀浆25.0g或50.0g（相当于样品12.5g或25.0g）放入150mL烧杯中，含有机酸含量较多的材料加0.5g2.0g粉状CaCO3调至中性（广泛试纸检试）。用水将样液全部转入250mL容量瓶中，并调整体积至约200mL。置802水浴保温30min，其间摇动数次，取出加入乙酸锌溶液及亚铁氰化钾溶液各2mL5mL，冷却至室温后，用水定容，过滤备用。B.6 还原糖测定 B.6.1 费林试剂的标定 取费林试剂甲、乙各5.00mL或在测定前先等体积混合后取10.00mL混合液于250mL锥形瓶中，放入玻璃珠45粒，先加入比预测（按B.6.2进行预测）仅少0.5mL的1mg/mL转化糖标准液。将此混合液置1000W电炉上加热，使其在2min左右沸腾，准确煮沸2min，此时不离开电炉，立即加入0.5%亚甲基蓝指示剂6滴，并继续以每45s的滴速滴加标准糖液，直至二价铜离子完全被还原生成砖红色氧化亚铜沉淀，溶液蓝色褪尽为终点。用准确滴定标准糖液的毫升数V1，乘以标准糖液浓度（mg/mL），即得10mL费林试剂所相当的糖的毫克数。注：无色的还原型亚甲基蓝极易被空气中的氧所氧化，应调节电炉温度使瓶内溶液始终保持沸腾状态，液面覆盖水蒸气不与空气接触，整个滴定过程锥形瓶不能离开电炉随意摇动。B.6.2 预测 取费林试剂甲、乙各5.00mL或10.00混合液于250mL锥形瓶中，由滴定管加入待测糖液约15mL，在电炉上加热至沸，约15s后迅速滴加待测糖液，至呈现极轻微的蓝色为止，此时加入0.5%亚甲基蓝指示剂6滴，继续滴加待测糖液，直至溶液蓝色褪尽为止，记下待测糖液的用量V2（毫升数）。B.6.3 准确测定 取费林试剂甲、乙各5.00mL或10.00混合液加入锥形瓶中，由滴定管加入比预测仅少0.5mL的待测糖液，并补加V1-V2毫升水（标定费林试剂所消耗的标准糖液毫升数V1减去预测消耗的待测糖液毫升数V2，即为应补加水的毫升数），使其与标定费林试剂时的反应体积一致。以下按费林试剂标定同样操作，继续滴至终点。前后沸热时间须在3min左右。待测糖液消耗量应控制在15mL50mL范围内，不能大于标定费林试剂所用标准糖液体积V1。否则应增减称样量重新制备待测液。B.7 可溶性总糖测定 取已经制备的待测液100mL于200mL容量瓶中，加6mol HCl10mL。在802水浴加热10min，放入冷水槽中冷却后，加甲基红指示剂2滴用6mol及1molNaOH溶液中和，用水定容。以下步骤同B.6.2、B.6.3。B.8 结果计算 DB35/T 11582011 17 B.8.1 计算式 a)还原糖1X(%)按式(B.1)计算：1X(%，以转化糖计)=1001000250W VG.(B.1)式中：1X 还原糖(%，以转化糖计)；G 10mL费林试剂相当的转化糖，单位为毫克（mg）；V 准确滴定时所用待测液的体积，单位为毫升（mL）；W 样品重量，单位为克（g）；250定容体积，单位为毫升（mL）；1000由毫克（mg）换算为克（g）。b)可溶性总糖2X(%)按式(B.2)计算:2X(%，以转化糖计)=1001000250 WAVG.(B.2)式中：2X 还原糖(%，以转化糖计)；A稀释倍数；其余符号同式（B.1）。c)非还原糖3X(%)按式(B.3)计算：3X(%，以蔗糖计)=()95.01 2 X X.(B.3)式中：3X 非还原糖(%，以蔗糖计)；0.95由转化糖换算成蔗糖的因数。B.8.2 结果表示 测定结果计算到小数点后两位，两次平行试验结果相对相差，含量在5%以下的不得超过3%，含量在5%10%的不得超过2%，含量在10%以上的不得超过1%。鲜样以鲜基表示，风干样以风干基表示。注：还原糖及可溶性总糖也可用葡萄糖表示，费林试剂需另用葡萄糖标定，非还原糖用转化糖换算成蔗糖形式表示。DB35/T 11582011 18 C C 附 录 C（规范性附录）橄榄种质资源鉴定记载表 橄榄种质资源鉴定见表C.1。表C.1 橄榄种质资源鉴定记载表 种质资源名称 编 号 来 源 地 树 龄 保 存 地 记录人 1 树形 树 姿 直立（夹角30o）半开张（30o夹角60o）开张（60o夹角90o）下垂（夹角90o）树 势 弱 中等 强 树 冠 半圆型 圆头型 2 根 根系类型 自根系 砧木根系 3 枝 芽尖裸露度 裸露 微露 不露 新梢茸毛 无 少 多 主干颜色 浅灰色 灰褐色 深褐色 4 叶 幼叶颜色 浅绿色 绿色 红绿色 红褐色 叶面颜色 浅绿色 深绿色 叶背颜色 黄绿色 绿色 叶面形态 平展 内卷 外卷 叶面光泽 无 有 叶尖形状 钝尖 渐尖 急尖 长尾尖 偏沟尖 叶基形状 狭楔形 楔形 宽楔形 钝圆形 偏斜形 叶缘形状 平滑 微波浪形 波浪形 小叶质地 薄软 厚硬 小叶形状 披针形 长椭圆形 椭圆形 卵圆形 小叶长度 cm 小叶宽度 cm 复叶着生姿态 斜向上 平伸 斜向下 复叶主轴长度 cm 小叶对数 对 小叶排列方式 互生 对生 复叶类型 奇数羽状复叶 偶数羽状复叶 中间型 DB35/T 11582011 19 表C.1（续）5 花 花蕾直径 mm 花冠直径 mm 花瓣的颜色 黄色 白色 粉红色 花序类型 总状花序 圆锥花序 花序花性类型 雄花序 雌花序 两性花序 混合花序 花性比例 花序花朵数 朵 花序着生位置 腋生 顶生 花序支轴数 花序长度 cm 6 果实 6.1 性状 果实形状 长梭形 纺锤形 长椭圆形 椭圆形 卵圆形 近圆形 果顶形状 锐尖 尖圆 钝圆 浑圆 果顶沟纹 不明显 明显 果基形状 双肩耸起 广平 尖峭 下斜 果基散射线 有 无 果基沟纹 不明显 明显 果面沟纹 不明显 明显 果皮颜色 黄色 黄绿色 浅绿色 青色（深绿色）果皮光滑度 光滑 粗糙 单果重 g 果实可食率%果实纵径 cm 果实横径 cm 果肉厚度 mm 果肉颜色 乳白色 黄白色 黄色 黄绿色 浅绿色 果肉质地 粗韧 细嫩 松脆 果肉香气 无 有 果肉涩味 苦涩 酸涩 涩 无涩 果肉回甘 差 中 好 果核重 g 果核颜色 浅黄色 黄色 黄褐色 棕褐色 果核形状 阔棱形 长梭形 纺锤形 长椭圆形 果核纵径 cm 果核横径 cm 种仁数 枚 果穗长度 cm 果穗重 g 穗粒数 粒 果穗类型 龙穗 虎穗 果实整齐度 差 中 好 6.2 理化指标 可溶性固形物含量 可溶性糖含量 可滴定酸含量 维生素C含量 DB35/T 11582011 20 表C.1（续）总膳食纤维含量 钙含量 黄酮含量 单宁含量 7 物候期 新梢萌发期 春梢：夏梢：秋梢：冬梢：花序形态分化期 现蕾期 初花期 盛花期 生理落果期 第一次：第二次：坐果率%果实成熟期 特殊性状：评价意见：_