ICS 65.150 CCS B50 43 湖南省地方标准 DB 43/T 27942023 渔业水体中砷的形态测定 高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法 Determination of arsenic species in fisheries water by high performance liquid chromatography-inductively coupled plasma-mass spectrometry 2023-11-09 发布 2024-02-09 实施 湖南省市场监督管理局 发 布 DB 43/T 27942023 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规 范性 引用 文件.1 3 术 语和 定义.1 4 方法 原理.1 5 试 剂与 材料.1 6 仪 器与 设备.2 7 样品.2 8 测定 步骤.2 9 结果 表述.3 10 方法 定量 限、准确 度、精密 度.3 附录A（资 料性）四种 砷形 态色 谱图.5 DB 43/T 27942023 II 前 言 本文件 按照GB/T 1.12020 标准 化工 作导则 第1 部 分：标准 化文 件的 结构 和起 草规 则的 规定起草。请注意 本标 准某 些内 容可 能涉 及专 利。本标 准发布 机构 不承 担识 别专 利的 责任。本文件 由湖 南省 农业 农村 厅提 出。本文件 由湖 南省 农业 标准 化技 术委 员会 归口。本文件 起草 单位：湖 南省 水产 科学 研究 所、农业部 渔业 产品 质量 监督 检验 测试 中心（长 沙）、澧县农产品 质量 安全 检测 中心。本 文 件主 要起 草人：洪波、谢仲 桂、李 小玲、尹升 福、雷 琴、黄 华伟、谢玉 昆、杨霄、万 译 文、何咏、索 纹纹、崔 先锋、刘依 平、曾春 芳、刘 伶俐、陈湘 艺、肖维、黄向 荣、龙嘉 航、李 翠英、欧云 帆。DB 43/T 27942023 1 渔业水体中砷的形态测定 高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法 1 范围 本标准 规定 了渔 业水 体中 砷的 形态 测定 高 效液相 色谱-电 感耦 合等 离子 体质 谱测 定方法。本标准 适用 于渔 业水 体中 砷的 形态 测定。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的 规范 性引 用而 构成本 文件 必不 可少 的条 款。其 中，注日 期的 引用文 件，仅 该 日期 对应 的版 本适 用于 本文 件；不注 日期 的 引用 文件，其 最新 版本（包 括所 有的 修改 单）适用 于本文件。GB/T 6682 分 析实 验室 用水 规格 和试 验方 法。SL 187 水 质采 样技 术规 程。3 术语和 定义 本文件 没有 需要 界定 的术 语和 定义。4 方法原 理 水样中 的待 测组 分经pH 调节 和预 处理 后，采用 高 效液 相色 谱仪 进行 分离，电感 耦合 等离子 体 质谱 仪进行检 测，外标 法定 量。5 试剂与 材料 本方法 所用 试剂 除另 有说 明外，均 为分 析纯；实验 用水 应符 合GB/T 6682 一级 水的 规定。甲醇：色谱 纯。磷酸二 氢铵：优 级纯。磷酸：纯度 85%，优级 纯。氨水：含量25.0%28.0%，优级 纯。25 mmol/L 磷酸 二氢 铵溶 液：称取2.8755 g 磷酸二 氢铵，以 水溶 解、定容 至1.0 L，用磷 酸 和氨水调节pH 至8.0，临用 前超 声脱 气。2.5 mmol/L 磷酸 二氢 铵溶 液：称 取 0.2876 g 磷 酸 二氢 铵，以 水溶 解、定容 至 1.0 L，用磷 酸 和氨水调节pH 至8.0，临用 前超 声脱 气。砷形态 标混 合准 储备 溶液（1.0 mg/L）：称 取砷酸 根溶 液标 准物 质（GBW08667）0.2857 g、亚砷酸根溶 液标 准物 质（GBW08666）0.0661 g、一甲基 砷溶 液标 准物 质（GBW08668）0.1992 g、二 甲基 砷溶液标准 物质（GBW08669）0.0945 g，用25 mmol/L 磷 酸二 氢铵 溶液 分别 稀释 定容至5 mL，即可 得到 四种砷形 态标 准中 间溶 液，4 避光 保存，有效 期 2 个 月。砷形态 混合 标准 中间 溶液（100 g/L）：取适 量 砷形 态标 准中 间溶 液用25 mmol/L 磷酸 二氢铵 溶液配置 成100 g/L 混合 标准 中间 溶液，4 避 光 保存，有 效期 1 个 月。DB 43/T 27942023 2 砷形态 混合 标准 工作 溶液：根据 需要，取适量 100 g/L 砷形 态标 准中 间溶 液用 25 mmol/L 磷酸 二氢铵溶 液配 置成0.5 g/L、1.0 g/L、2.0 g/L、5.0 g/L、10.0 g/L、50.0 g/L 的 混合标 准工 作溶液，4避 光保 存，有效 期1 周。微孔滤 膜：0.22 m，聚醚 砜（PES）或 聚偏氟 乙 烯（PVDF）膜。6 仪器与 设备 高效液 相色 谱-电感 耦合 等离 子体 质谱 仪，配 自 动进 样器 和四 元泵。分析天 平：感量0.01 和0.00001 g。pH 计。超声清 洗器。7 样品 样品采 集 应符合SL 187 的规 定。试样制 备 将采集 水样 迅速 采用 磷酸 和氨 水将pH 调节 至2.0以 下，4 避 光保 存。8 测定步 骤 样品处 理 试样经0.22 m 微孔 滤膜 过滤 后，置于 样品 瓶中，待测。测定条 件 8.2.1 液相色 谱参 考条 件 液相色 谱参 考条 件如 下：a)色谱柱：阴 离子 交换 柱（250 mm4.0 mm，粒 径10 m），或相 当者；b)流动相：A 相：25 mmol/L 磷酸 二氢 铵溶 液，B 相：2.5 mmol/L 磷酸 二氢 铵溶 液，C 相：甲醇，流动相 梯度 洗脱 条件 参见 表1；c)进样量：50 L；d)柱温：20；e)样品室 温度：20。表1 流动相 梯度 洗脱 条件 时间 A 相 B 相 C 相 流速 mL/min 0.00 0.0 97.0 3.0 1.00 7.00 70.0 27.0 3.0 1.00 7.20 97.0 0.0 3.0 1.40 DB 43/T 27942023 3 表1 流动 相梯 度洗 脱条 件（续）时间 A 相 B 相 C 相 流速 mL/min 11.00 97.0 0.0 3.0 1.40 11.50 0.0 97.0 3.0 1.00 18.00 0.0 97.0 3.0 1.00 8.2.2 质谱参 考条 件 质谱参 考条 件见 表2。表2 电感耦 合等 离子 体质 谱仪 参考 条件 参数 参考值 参数 参考值 RF功率 1550 W Omega偏转电压-90.0 V RF匹配 1.80 V Omega凸镜电压 10.0 V 采样深度 10.0 mm 碰撞氦气流量 5.0 mL/min 雾化气流量 1.07 L/min 八极杆偏转电压-18.0 V 蠕动泵转速 0.30 rps 八极杆射频电压 190.0 V 提取凸镜2-190.0 V 定量质量数 75 8.2.3 定量测 定 依次 将相同体积 标准系列工 作液和待测 液注入液 相色谱仪进 行分离，电 感耦合等离 子体质谱 仪进行检测。以 标准 工作溶 液中 四种 砷形 态色 谱 峰的保 留时 间定 性，以 各色 谱峰 峰面 积对 浓 度做校 正曲 线，外标法 定量。若 待测 液的 浓度 超过 线性 范围，需 稀释 后重 新进 样。四种 砷形 态标 准工 作 溶液色 谱图 参见资料性 附录A。8.2.4 空白试 验 除以实 验水 替代 试样 外，均按 上述 分析 步骤 进行。9 结果表 述 以试样 中各砷 形态 的 信号 强度（计 数）CPS，从校 准曲 线或 回归方 程中 查得 试样 中四种 砷形态 的含量（g/L 或ng/mL）。计算 结果 须扣 除空 白值，保留 两位 有效 数字。10 方法定 量限、准确 度、精密 度 灵敏度 本方法 中四 种砷 形态 的定 量限 分别 为：砷酸 根0.5 g/L；亚 砷酸 根1.0 g/L；一 甲基 砷1.0 g/L；二甲基 砷1.0 g/L。准确度 DB 43/T 27942023 4 本方法 在1.00 g/L、5.00 g/L、20.0 g/L 添加浓度 水平 上的 回收 率见 表3。表3 添加回 收试 验数 据 添加浓度 化合物名称 测定值 g/L 回收率%相对标准偏差%1.0 g/L 亚砷酸根 0.8610.995 86.199.5 5.00 二甲基砷 0.8941.02 89.4101.7 6.01 一甲基砷 0.8991.04 89.9103.8 6.27 砷酸根 0.8921.02 89.2101.7 5.27 5.0 g/L 亚砷酸根 5.055.30 101.1106.0 2.16 二甲基砷 5.215.38 104.2107.6 1.12 一甲基砷 5.125.32 102.5106.4 1.51 砷酸根 5.055.38 101.1107.6 2.53 20.0 g/L 亚砷酸根 21.422.0 107.1110.0 1.04 二甲基砷 21.622.3 108.2111.4 0.98 一甲基砷 21.422.3 107.2111.4 1.32 砷酸根 21.622.3 107.8111.5 1.10 精密度 本方法 批内 变异 系数 6.27%，批 间变 异系数 7.54%。DB 43/T 27942023 5 A A 附录A（资料 性）四种砷 形态 色谱 图 图A.1 四种 砷形 态色 谱图