ICS 65.020.20 CCS B 05 DB3705 东营市地方标准 DB 3705/T 132023 紫花苜蓿 耐盐性鉴 定技术规 程 Technical code of practice for identification of salt tolerance in alfalfa 2023-10-26 发布 2023-11-26 实施 东营市市 场监督 管 理局 发 布 DB 3705/T 13 2023 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规 范性 引用 文件.1 3 术 语和 定义.1 4 鉴 定准 备.1 种子 准备.1 4.1 仪器 设备.1 4.2 溶液 制备.1 4.3 5 萌 发期 处理.1 种子 处理.1 5.1 培养.2 5.2 性状 测定.2 5.3 测定 值计 算.2 5.4 6 苗 期处 理.3 催芽.3 6.1 育苗.3 6.2 胁迫 处理.4 6.3 性状 测定.4 6.4 测定 值计 算.4 6.5 7 耐 盐性 鉴定.4 种子 萌发 期耐 盐性 鉴 定.4 7.1 种子 苗期 耐盐 性鉴 定.5 7.2 附录A（资 料性）Hoagland 营养 液组 分含 量表.6 DB 3705/T 13 2023 II 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标准 化工 作导则 第1 部分：标准化 文件 的结构 和起草 规则 的规 定起草。请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利。本文 件的 发布机 构不 承担 识别 专利 的责任。本文件 由东 营市 农业 农村 局提出、归 口并 组织 实施。本文件 起草 单位：黄 河三 角洲农 业高 新技 术产 业示 范区盐 碱地 综合 利用 服务 中心、东营 市农 业 科 学研究院、山 东师 范大 学、山东盐 碱地 现代 农业 有限 责任公 司、国家 盐碱 地综 合利用 技术 创新 中 心、东 营市市场 监管 事务 服务 中心。本文件 主要 起草 人：陈小 芳、徐 化凌、杨辉、王 菊英、王瑞 香、陈 敏、杨霞、李 军、毕 云霞、宁凯、王蓓蕾、朱 小乐、韩 燕燕、李影、于 德花、王 婧、马文刚、刘 彩莲。DB 3705/T 13 2023 1 紫 花苜蓿 耐盐性鉴 定技术 规程 1 范围 本文件 确立 了紫 花苜 蓿耐 盐性鉴 定的 程序，规定 了 耐盐性 鉴定 盐处 理方 法、性状测 定及 计算、耐盐性评价 方法 及分 级的 操作 指示。本文件 适用 于紫 花苜 蓿耐 盐性鉴 定和 评价。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款。其 中，注日 期的 引用 文件，仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件；不注 日期 的引 用文件，其 最新 版本（包 括所有 的修 改单）适 用 于 本文件。GB 6141-2008 豆科 草种 子质量 分级 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。耐盐性 salt tolerance 作物在 盐胁 迫下，其 生长 发育、形态 建成 及产 量形 成对于 盐害 的耐 受能 力。4 鉴定准 备 种子准 备 4.1 种子质 量应 符合GB 6141-2008 中 一级 的规 定。仪器设 备 4.2 光照培 养箱：温 度范 围 0 50、波 动度 0.5，湿 度 50%95%、波 动度 5%，光照 强 度0 lx 5 000 lx。溶液制 备 4.3 配制浓 度为1.0%和1.2%的NaCl溶液。称量10 g 和12 g NaCl（99.50%，分 析 纯），分别 加入1/5 Hoagland 营养 液（萌 发期）和Hoagland 营 养液（苗 期），均定 容至1000 mL（附录A），搅拌 待充 分溶解。溶 液的pH 值用1.0 mol/L 的NaOH 或者HCl 调 整到6.0 0.5。5 萌发期 处理 种子处 理 5.1 用10%的次 氯酸 钠表 面灭 菌5 min，蒸 馏水 冲洗3 次4 次，晾 干备 用。DB 3705/T 13 2023 2 培养 5.2 采用100 mm 口径 的培 养皿，皿内平 铺2 层直 径为90 mm 的滤纸，均匀 摆放 种子，加 入1.0%NaCl 溶液4.5 mL。对 照加 入4.5 mL 1/5 Hoagland 营 养液。封 口膜 封 口，置 于温 度25、湿度50%的恒 温培 养箱 内暗 培养。处 理和 对照 均设3个 重 复。性状测 定 5.3 培养第4 d、6 d、8 d 和10d 统计发芽 数（胚根 突破种 皮1.5 mm2.0 mm），用 于计算发 芽率、发芽势、发芽 指数；第12 d 测定 胚 根长（胚 根长 是种 子下部 到根 顶端 的长 度）。测定值 计算 5.4 5.4.1 发芽率（G）计 算 按式（1）计算。100)/(10 SN N G(1)式中：G 发 芽率，单 位为 百分 号（%）；N10 第10 d 发芽 种子 数，单位为 粒；Ns 供 检种 子数，单 位为 粒。5.4.2 发芽势（GF）计 算 按式（2）计算。100)/(SN S GF(2)式中：GF 发 芽势，单 位为 百分 号（%）；S 培 养期 间当 天发 芽最 多 的发芽 种子 数，单位 为粒；Ns 供 检种 子数，单 位为 粒。5.4.3 发芽指 数(GI)计算 按式（3）计算。t tD G GI/(3)式中：GI 发 芽指 数；Gt 处 理后 第t 天的 绝对 发 芽数，单位 为粒；Dt 相 应的 发芽 天数，从 培养的 第4 d 开 始统 计，至 第10 d，单 位为 天（d）。5.4.4 相对发 芽率（RG）计 算 按式（4）计算。ck tG G RG/(4)DB 3705/T 13 2023 3 式中：RG 相 对发 芽率；Gt 盐 处理 发芽 率，单位 为百分 号（%）；Gck 对 照发 芽率，单 位为 百分号（%）。5.4.5 相对发 芽势（RGF）计算 按式（5）计算。ck tGF GF RGF/(5)式中：RGF 相对 发芽 势；GFt 盐处 理发 芽势；GFck 对照 发芽 势。5.4.6 相对发 芽指 数（RGI）计 算 按式（6）计算。ck tGI GI RGI/(6)式中：RGI 相对 发芽 指数；GIt 盐处 理发 芽指 数；GIck 对照 发芽 指数。5.4.7 相对胚 根长（RRL）计算 按式（7）计算。ck tRL RL RRL/(7)式中：RRL 相对 胚根 长；RLt 盐处 理胚 根长,单位 为厘米（cm）；RLck 对照 胚根 长,单 位为 厘米（cm）。6 苗期处 理 催芽 6.1 将种子 均匀摆 放在 铺有2 层 滤纸的 培养皿 内，加4.5 mL 去离子 水，置于温 度25、湿 度50%的恒 温培养箱 暗培 养。处理 和对 照均设 置3 个重 复。每个 重 复50 粒 种子。育苗 6.2 将蛭石 和珍珠 岩按 照3：1 的比例 混合均 匀，称取2 000 g 基 质装入 高20 cm、口径27.5 cm 的 塑料 花盆（盆 底有3 个直 径1.5 cm 的孔，用之 前盆 底铺 纱网）。培 养皿 内种 子幼 根长 到1 mm 左右 时，移植 到花DB 3705/T 13 2023 4 盆，每 盆25 株 苗。出 苗后 进行间 苗，每 盆留 生长整 齐一致、分布 均匀 的15株 苗。在 温度15 26，相对湿 度35%55%的 温室 育苗。胁迫处 理 6.3 幼苗生 长4周时，处 理组浇1.2%NaCl溶液600 mL，对 照组浇600 mL 对照 溶液。每天定 时观察，对 照组和处 理组 根据 蒸发 量补 充相应 溶液。处 理后 第10 d 进行 苗期 耐盐 性性 状调 查。性状测 定 6.4 处理第10 d，测定 主茎 长（主茎长 是种 子基 部到 幼苗 顶端的 长度）、主 根长（主根长 是种 子下 部 到根顶端 的长 度），称 量地 上干 重（地 上干 重是 培养 基质表 面以 上幼 苗所 有部 分的干 重）。测定值 计算 6.5 6.5.1 相对主 茎长（RMSL）计算 按式（8）计算。ck tMSL MSL RMSL/(8)式中：RMSL 相对 主茎 长；MSLt 盐处 理主 茎长,单 位 为厘米（cm）；MSLck 对照 主茎 长,单位 为 厘米（cm）。6.5.2 相对主 根长（RMRL）计算 按式（9）计算。ck tMRL MRL RMRL/(9)式中：RMRL 相对 主根 长；MRLt 盐处 理主 根长,单 位 为厘米（cm）；MRLck 对照 主根 长,单位 为 厘米（cm）。6.5.3 相对地 上干 重(RSDW)计算 按式（10）计算。ck tSDW SDW RSDW/(10)式中：RSDW 相对 地上 干重；SDWt 盐处 理地 上干 重,单 位为克（g）；SDWck 对照 地上 干重,单 位 为克（g）。7 耐盐性 鉴定 种子萌 发期 耐盐 性鉴 定 7.1 DB 3705/T 13 2023 5 耐盐指 数按 式（11）进行 计算。4RRL RGI RGF RGSTIg(11)式中：STIg 萌发 期耐 盐指 数；RG 相 对发 芽率；RGF 相对 发芽 势；RGI 相对 发芽 指数；RRL 相对 胚根 长。根据萌 发期 耐盐 指数 对紫 花苜蓿 种质 进行 耐盐 性分 级，见表1。表1 紫花苜 蓿萌 发期 耐盐 性评 价表 耐盐级别，级 萌发期耐盐指数（STIg）耐盐性 1 0.8STIg 1.00 高耐盐 2 0.60STIg 0.8 中耐盐 3 0.40STIg 0.6 低耐盐 4 0.20STIg 0.4 敏感 5 0.00STIg 0.2 高敏感 种子苗期 耐 盐性 鉴定 7.2 耐盐指 数按 式（12）进行 计算。3RSDW RMRL RMSLSTIS(12)式中：STIs 苗期 耐盐 指数；RMSL 相对 主茎 长；RMRL 相对 主根 长；RSDW 相对 地上 干重。根据苗 期耐 盐指 数对 紫花 苜蓿种 质进 行耐 盐性 分级，见表2。表2 紫花苜 蓿苗 期耐 盐性 评价 表 耐盐级别，级 苗期耐盐指数（STIS）耐盐性 1 0.8STIS 1.00 高耐盐 2 0.60STIS 0.8 中耐盐 3 0.40STIS 0.6 低耐盐 4 0.20STIS 0.4 敏感 5 0.00STIS 0.2 高敏感 DB 3705/T 13 2023 6 A A 附录A（资料 性）Hoagland 营养 液组 分含 量表 组分 工作液浓度（mg/L）KNO3 506 NH4NO3 80 KH2PO4 136 MgSO4 241 C10H12N2NaFe 73.4 KI 1.66 H3BO3 12.4 MnSO4 44.6 ZnSO4 17.2 Na2MoO4 0.5 CuSO4 0.05 CoCl2 0.05 Ca(NO3)2 945