I C S 6 5.0 2 0.2 0C C S B 6 1DB3707潍 坊 市 地 方 标 准D B 3 7 0 7/T 0 5 1 2 0 2 2菊 花 组 培 育 苗 技 术 规 程T e c h n i c a l R e g u l a t i o n f o r i n V i t r o P r o p a g a t i o n o f D e n d r a n t h e m a m o r i f o l i u m2 0 2 2-0 8-0 2 发 布 2 0 2 2-0 8-3 1 实 施潍 坊 市 市 场 监 督 管 理 局发 布D B 3 7 0 7/T 0 5 1 2 0 2 2I目 次前 言.I I1 范 围.12 规 范 性 引 用 文 件.13 术 语 和 定 义.14 外 植 体 的 选 择 和 处 理.14.1 外 植 体 母 株 的 选 择.14.2 外 植 体 的 处 理.14.3 外 植 体 表 面 灭 菌 与 接 种.15 试 管 苗 培 养.25.1 初 代 培 养.25.2 继 代 培 养.25.3 生 根 培 养.26 试 管 苗 驯 化 移 植.26.1 驯 化 炼 苗.26.2 移 植 方 式.26.3 移 植.36.4 移 植 后 的 管 理.37 组 培 苗 出 圃.37.1 出 圃 标 准.37.2 包 装 运 输.3D B 3 7 0 7/T 0 5 1 2 0 2 2I I前 言本 文 件 按 照 G B/T 1.1-2 0 2 0 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分：标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规 定 起草。请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利。本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 这 些 专 利 的 责 任。本 文 件 由 自 然 资 源 和 规 划 局 提 出、归 口 并 组 织 实 施。本 标 准 起 草 单 位：潍 坊 职 业 学 院；潍 坊 市 农 业 科 学 院。本 标 准 主 要 起 草 人：孙 曰 波、丁 雪 珍、丁 世 民、任 术 琦、赵 从 凯、张 二 海、赵 庆 柱、邱 玉 宾、杨 志莹、张 海 良、郭 光 智、冯 宝 春。D B 3 7 0 7/T 0 5 1 2 0 2 21菊 花 组 培 育 苗 技 术 规 程1 范 围本 标 准 规 定 了 菊 花 组 培 育 苗 中 外 植 体 的 选 择 和 处 理、试 管 苗 培 养、试 管 苗 驯 化 移 植、组 培 苗 出 圃 的技 术 要 求。本 标 准 适 用 于 菊 花 组 培 种 苗 的 繁 育。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的。凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件，仅 所 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文件。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件，其 最 新 版 本(包 括 所 有 的 修 改 单)适 用 于 本 文 件。G B 6 0 0 1 育 苗 技 术 标 准N Y T 2 3 0 6-2 0 1 3 花 卉 种 苗 组 培 快 繁 技 术 规 程3 术 语 和 定 义N Y T 2 3 0 6-2 0 1 3 中 界 定 的 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件。4 外 植 体 的 选 择 和 处 理4.1 外 植 体 母 株 的 选 择4.1.1 从 处 于 旺 盛 生 长 期 的 植 株 中 选 择 具 有 繁 育 品 种 典 型 特 征、无 病 虫 危 害、生 长 健 壮 的 植 株。4.1.2 在 取 材 前 2 周 3 周，将 入 选 株（母 株）置 于 温 室 内 培 养，不 要 对 叶 面 喷 水，这 样 能 够 提 高灭 菌 的 成 功 率。4.2 外 植 体 的 处 理4.2.1 接 种 前 从 入 选 株 剪 取 无 病 虫 害、粗 壮 的 嫩 枝 作 为 外 植 体。4.2.2 将 嫩 枝 上 展 开 的 叶 片 除 去，留 一 段 叶 柄。4.2.3 将 处 理 好 的 嫩 枝 用 洗 衣 粉 清 洗，经 自 来 水 冲 洗 干 净 备 用。4.3 外 植 体 表 面 灭 菌 与 接 种4.3.1 在 超 净 工 作 台 上，将 外 植 体 嫩 枝 先 放 入 7 5%的 乙 醇 溶 液 中 浸 泡 3 0 s 6 0 s 后，再 放 入 2%次 氯酸 钠 溶 液 中 浸 泡 1 5 m i n 2 0 m i n，然 后 用 无 菌 水 冲 洗 3 次。4.3.2 用 已 灭 菌 的 剪 刀、镊 子 将 每 个 叶 柄 切 口 剪 去 一 小 段，将 嫩 枝 均 匀 切 分 成 大 小 约 1.0 c m 1.5 c mD B 3 7 0 7/T 0 5 1 2 0 2 22的 小 段，每 段 含 1 个 2 个 芽。4.3.3 按 照 生 长 的 极 性 接 种 于 事 先 准 备 好 的 初 代 培 养 基 中（基 部 切 口 应 插 入 培 养 基 内），每 瓶 接 种 1株。5 试 管 苗 培 养5.1 初 代 培 养5.1.1 初 代 培 养 基 本 培 养 基 为 M S（M u r a s h i g e a n d S k o o g）培 养 基。植 物 生 长 物 质 为 6-苄 基 氨 基 嘌呤（6-B A），使 用 浓 度 范 围 为 0.1 m g/L 0.5 m g/L，p H 值 5.8 6.2。5.1.2 培 养 温 度 为 2 3 2 7，光 照 强 度 1 0 0 0 1 x 1 5 0 0 1 x 培 养，光 照 时 间 1 2 h/d 1 6 h/d。5.1.3 待 新 芽 生 长 至 大 于 5 c m 后，将 芽 切 下 进 行 继 代 培 养。5.2 继 代 培 养5.2.1 基 本 培 养 基 为 M S 培 养 基。植 物 生 长 物 质 有 萘 乙 酸（N A A），使 用 浓 度 范 围 为 0.0 5 m g/L 0.2m g/L，6-苄 基 氨 基 嘌 呤（6-B A），使 用 浓 度 范 围 为 0.1 m g/L 0.2 m g/L，p H 值 5.8 6.2。5.2.2 将 初 代 培 养 获 得 的 新 芽 剪 下，切 割 成 1.0 c m 1.5 c m 小 段，每 段 含 1 个 2 个 芽，按 照 生 长的 极 性 接 种 于 事 先 准 备 好 的 继 代 培 养 基 中，每 瓶 接 种 1 0 株。5.2.3 培 养 温 度 为 2 3 2 7，光 照 强 度 1 0 0 0 1 x 3 0 0 0 1 x，光 照 时 间 1 2 h/d 1 6 h/d。待 小 苗 长至 大 于 5 c m 后，再 次 进 行 继 代 转 接，如 此 反 复 直 到 需 要 的 数 量。5.3 生 根 培 养5.3.1 基 本 培 养 基 为 M S 培 养 基。植 物 生 长 物 质 为 萘 乙 酸（N A A），使 用 浓 度 范 围 为 0.0 5 m g/L 0.1m g/L，p H 值 5.8 6.2。5.3.2 将 继 代 培 养 获 得 的 新 芽 剪 下，切 割 成 1.5 c m 2.0 c m 小 段，按 照 生 长 的 极 性 接 种 于 事 先 准 备好 的 生 根 培 养 基 中，每 瓶 接 种 1 5 株 2 0 株。5.3.3 培 养 温 度 为 2 3 2 7，光 照 强 度 2 0 0 0 1 x 4 0 0 0 1 x，光 照 时 间 1 2 h/d 1 6 h/d。待 小 苗 全部 生 根 后（根 长 0.5 c m 1 c m），就 可 以 出 瓶 驯 化 移 植。6 试 管 苗 驯 化 移 植6.1 驯 化 炼 苗将 培 养 瓶 放 置 温 室 自 然 散 射 光 下，封 口 炼 苗 2 d 3 d.然 后 再 开 口 炼 苗 1 d 2 d，温 度 控 制 在 2 2 2 8。6.2 移 植 方 式D B 3 7 0 7/T 0 5 1 2 0 2 23菊 花 试 管 苗 可 采 用 苗 床 移 植 或 穴 盘 移 植。移 植 基 质 要 求 疏 松 透 气，有 一 定 的 保 水 保 肥 能 力，推 荐 使用 蛭 石。由 于 试 管 苗 原 来 的 环 境 是 无 菌 的，移 植 后 应 尽 量 不 使 菌 类 大 量 滋 生，以 利 成 活。所 以 应 对 基 质进 行 高 压 灭 菌。移 植 前 将 基 质 装 好、浇 透 水。6.3 移 植打 开 培 养 瓶 盖，将 已 经 锻 炼 的 有 根 小 苗 用 镊 子 轻 轻 夹 出，洗 净 根 部 粘 附 的 培 养 基，用 竹 签 在 基 质 上打 一 小 孔，将 幼 苗 插 入 孔 中 并 将 孔 覆 严，移 植 完 毕 喷 一 遍 水，以 保 证 根 系 与 基 质 充 分 接 触。6.4 移 植 后 的 管 理6.4.1 移 植 时 基 质 要 浇 透 水，然 后 搭 设 小 拱 棚，初 期 2 d 3 d 喷 水 一 次，保 持 拱 棚 薄 膜 上 有 水 珠 出现。5 d 7 d 后，发 现 小 苗 有 生 长 趋 势，可 减 少 喷 水 次 数，将 拱 棚 两 端 打 开 通 风，将 空 气 湿 度 保 持 在 7 5%8 5%之 间。约 1 5 d 左 右 揭 去 小 拱 棚 的 薄 膜，逐 渐 减 少 浇 水，促 进 小 苗 长 得 粗 壮。6.4.2 初 期 在 小 拱 棚 上 加 盖 遮 阳 网，遮 光 率 为 4 0%，以 防 阳 光 灼 伤 小 苗 和 增 加 水 分 的 蒸 发。当 小 植株 有 了 新 的 生 长 时，逐 渐 加 强 光 照，4 周 后 可 直 接 利 用 自 然 光 照，促 进 光 合 产 物 的 积 累，增 强 抗 性，促其 成 活。6.4.3 适 宜 生 长 温 度 是 1 8 3 0，最 好 控 制 在 2 0 2 6，就 可 使 试 管 苗 在 1 8 d 2 5 d 左 右 移栽 成 活，并 长 出 新 根 新 叶。6.4.4 移 植 2 周 后，可 每 周 结 合 喷 水 时 加 入 0.1%的 尿 素，或 用 1/2 M S 大 量 元 素 的 水 溶 液 作 追 肥，以 加 快 幼 苗 的 生 长 与 成 活。6.4.5 5 0%氯 溴 异 氰 尿 酸 8 0 0 1 0 0 0 倍 液 喷 施 7 d 1 0 d 后，再 喷 施 3 3.5%喹 啉 铜 悬 浮 剂 8 0 0 倍 液，2 5 d 3 0 d 后 再 喷 施 一 次；或 者 使 用 浓 度 稀 释 8 0 0 倍 1 0 0 0 倍 的 甲 基 硫 菌 灵 喷 施，7 d 1 0 d 一 次，以 便有 效 的 保 护 幼 苗。7 组 培 苗 出 圃7.1 出 圃 标 准组 培 苗 高 度 4 c m 5 c m，具 有 6 片 8 片 展 开 叶 片，叶 色 浓 绿，根 系 发 达，植 株 矮 壮。7.2 包 装 运 输7.2.1 短 距 离 运 输 时 将 菊 花 组 培 苗 从 苗 床 取 出，1 0 0 株 一 把 装 入 保 鲜 袋 中，然 后 装 入 包 装 箱 运 到 指定 地 点 即 可。7.2.2 长 距 离 运 输 时 将 菊 花 组 培 苗 从 苗 床 取 出 后，1 0 0 株 一 把 摆 放 到 阴 凉 处 2 小 时 4 小 时 适 当 脱 水，等 植 株 变 软 后 装 入 保 鲜 袋，装 箱 打 包 快 递 即 可。D B 3 7 0 7/T 0 5 1 2 0 2 24_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _