ICS 67.200.10 X 14 DB37 山东省地方标准 DB37/T 3993 2020 食用油中 苯残留量 的测定 顶空-气相 色谱/质谱法 Determination of benzene residues in edible oil Headspace-GC/MS method 2020-06-08 发布 2020-07-08 实施 山 东 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB37/T 3993 2020 I 前 言 本标准 按照GB/T 1.1 2009 给出 的规 则起 草。本标准 由青 岛海 关提 出、归口并 组织 实施。本标准 起草 单位：青 岛海 关技术 中心。本标准 主要 起草 人：王宇、崔淑 华、李宗 芮、张雪 琰、张 慧、崔伟 佳、万璐 璐、王 宫璞。DB37/T 3993 2020 1 食 用油中 苯残留量 的测定 顶空-气 相色谱/质 谱法 1 范围 本标准 规定 了食 用油 中苯 残留量 的 顶 空气 相色 谱-质 谱测定 方法。本标准 适用 于辣 椒油、芝 麻油、花生 油、大豆 油等 食用油 中苯 残留 量的 测定。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 6682 分 析实 验室 用 水规格 和试 验方 法。3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。3.1 空白基 质 与被检 测样 品同 一种 属，经脱臭 脱色 等精 炼工 序得 到的精 制植 物油，或 在室 温下经 超声 脱气 的植 物油，空 白基 质苯 含量 应低 于检出 限。4 原理 样品 中 苯在 经气 液两 相间 平衡状 态下，用 顶空-气相 色谱/质谱 仪进 行测 定，根 据保留 时间 与特 征 离子定性，内 标法 定量。5 试剂和 材料 除非另 有说 明，本方 法所 用 试剂 均为 色谱 纯，水为GB/T 6682 规 定的 一级 水。5.1 试剂 5.1.1 甲醇(CH3OH)。5.1.2 N，N-二甲 基乙 酰胺CH3C(O)N(CH3)2。5.2 标准物 质 5.2.1 苯标准 物质：CAS No.71-43-2，分子 式C6H6，100 ng/L 甲醇 溶液。或 经国 家 认证并 授予 标准物质证 书的 标准 物质。DB37/T 3993 2020 2 5.2.2 氘代苯-D6 标准 物质：CAS No.1076-43-3，分子 式 C6D6，纯 度99.5%。或 经国 家认证 并授 予标准物质 证书 的标 准物 质。5.3 标准溶 液配 制 5.3.1 标准溶 液（10 g/mL）：准确移 取1 mL（精 确至0.1 mL）苯 标准 物质（5.2.1）至 10 mL 容量瓶中，使 用 N，N-二 甲基 乙酰胺 稀释 并定 容 至 10 mL，避 光 0 4 保存，有效 期 1 个月。5.3.2 内标溶 液（10 g/mL）：准确称 取100 mg（精 确 至0.1 mg）氘 代苯-D6 标准 物 质（5.2.2）至10 mL 容量 瓶中，使 用N，N-二甲 基乙 酰胺 稀释 并定 容至 10 mL，避 光0 4 保 存，有效 期 1 个月。5.3.3 基质标 准工 作溶 液：称 取5 g（精确 至0.01 g）空 白基质（3.1）于顶 空样 品 瓶中，平 行 6 份，分别加 入苯 标准 溶液（5.3.1）2 L、5 L、10 L、20 L、50 L、100 L，再分 别加 入氘 代苯内标溶 液（5.3.2）20 L，加 盖密 封，配制 成含 苯 质量浓 度分 别 为 4 g/kg、10 g/kg、20 g/kg、40 g/kg、100 g/kg、200 g/kg，含 内标 质量 浓度 为 40 g/kg 的 基质 标准系 列。也可 根据 需要配制适 当浓 度范 围的 标准 样品系 列。保持 顶空 样品 瓶直立，做 水平 圆周 振摇，使物 质充 分混 合。振 摇 过程中植 物 油 不能 接触 到密 封垫，若有 接触 需重 新配 制。6 仪器和 设备 6.1 气相色 谱-质谱 仪：配有EI 源。6.2 顶空自 动进 样器：与 气相 色谱-质谱 仪联 机。6.3 天平：可精 确 至0.000 1 g 的精 密天 平，以及 可精 确至 0.01 g 的 称样 分析 天 平。6.4 微量移 液器：2 L 200 L。6.5 玻璃器 皿：烧杯、容 量瓶 等。7 分析步 骤 7.1 试样制 备 称取植 物油样 品5 g（精确 至0.01 g）于20 mL 顶空 样 品瓶中，加入 内标溶 液（5.3.2）20 L，加盖密封，保 持顶 空样 品瓶 直立，做水 平圆 周振 摇，使物质 充分 混合，作 为待 测试样。振 摇过 程中 植 物 油不能接 触到 密 封 垫，如有 接触需 重新 制备。7.2 测定 7.2.1 顶空进 样器 参考 条件：a)平衡时 间：30 min；b)平衡温 度：80；c)进样体 积：1.0 mL；d)进样时 间：0.5 min。7.2.2 气相色 谱参 考条 件：a)进样口：200，分 流 比10：1；b)载气：He，纯度 99.999%，柱 流速1.0 mL/min；c)色谱柱：含5%苯基 的甲 基聚硅 氧烷 的毛 细管 柱，柱长 30 m，内 径0.25 mm，膜 厚 0.25 m，或性能 相当 者；d)柱温：40，保持5 min，以10/min 速率 升 至200。DB37/T 3993 2020 3 7.2.3 质谱参 考条 件：a)温度：接 口230，四 级 杆150，离 子源 230；b)扫描方 式：选择 性离 子扫 描（SIM）。7.2.4 定性与 定量 在相同 实验 条件 下进 行样 品测定 时，如果 检出 色谱 峰的保 留时 间与 标准 样品 一致，并且 在扣 除空 白后的样 品质 谱图 中，目标 化合物 的定 量与 定性 离子 均出现，而 且同 一检 测批 次，对 同一 化合 物，样 品 中目标化 合物 的定 性离 子和 定量离 子的 相对 丰度 与质 量浓度 相当 的基 质标 准溶 液相当，其 允许 偏差 不超 过表1规 定的 范围，则 可判 断 样品中 存在 目标 化合 物。表1 相对离 子丰 度最 大允 许偏 差 相对离子丰度 50%20%50%（含）10%20%（含）10%最大允许偏差 10%15%20%5 0%苯、氘 代苯 标准 物质 的保 留时间、定 量离 子、定性 离子见 附 录A，典型 离子 流 图见附 录C。采用内 标-校 准曲线 法进行 定量测 定。将 配制 好的标 准溶液 上机分 析，以苯与 内标物 的质量 浓度 比为横坐 标，苯峰 面积 与内 标物峰 面积 比为 纵坐 标，绘制标 准曲 线。将制备 好的 试样 上机 分析，以 其峰 面积 根据 标准 曲 线，计算 出试 样中 苯含 量。当 试样 中苯 含量 超出线性范 围时，可 适当 减少 称样量，并 使用N，N-二 甲 基乙酰 胺对 样品 进行 稀释、补足 至5 g。7.3 空白实 验 使用N，N-二甲 基乙 酰胺 对 样品进 行稀 释时，应进 行 空白实 验。除 不称 取试 样 外均按 上述 步骤 进行。8 结果计 算和 表述 试样中 苯含 量由 色谱 数 据 处理软 件或 按式（1）计 算 获得：f c X.(1)式中：X 试 样中 苯含 量，单 位为微 克每 千克（g/kg）；c 从标 准工 作曲 线得 到的试 样溶 液中 苯的 质量 浓度，单位 为微 克每 千克（g/kg）；f 稀 释系 数。计算结 果应 扣除 空白 值，保留2 位有 效数 字；含量 超 过100 g/kg 时，保 留3 位 有效数 字。9 精密度 在重复 性条 件下 获得 的两 次独立 测定 结果 的绝 对差 值不得 超过 算术 平均 值的10%。10 定量限 和回 收率 10.1 检测限 和定 量限 本方法 检测 限为1.0 g/kg，定 量限 为4.0 g/kg。10.2 回收率 DB37/T 3993 2020 4 在4 g/kg、50 g/kg、100 g/kg 三个添 加浓度 水平下，苯在 不同基 质中 的添加 回收率 数据 见附录B。DB37/T 3993 2020 5 A A 附 录 A（资料 性附 录）苯、氘 代苯 标准 物质 的定 性、定 量信 息 苯、氘 代苯 标准 物质 的保 留时间、定 量离 子、定性 离子见 表A.1。表A.1 苯、氘 代苯 标准 物质 的保 留时间、定 量离 子、定性 离子 中文名称 英文名称 保留时间 min 定量离子 m/z 定性离子 m/z 苯 Benzene 2.65 78 50，51，52 氘代苯 Benzene-D6 2.60 84 52，54，56 DB37/T 3993 2020 6 B B 附 录 B（资料 性附 录）不同基 质中 苯的 添加 回收 率 不同基 质中 苯的 添加 回收 率见表B.1。表B.1 不同基 质中 苯的 添加 回收 率 样品基质 添加水平 g/k g 回收率 辣椒油 4 89.6%50 95.7%100 94.9%芝麻油 4 106.1%50 93.7%100 101.5%花生油 4 95.2%50 91.0%100 94.0%大豆油 4 94.9%50 99.2%100 88.8%DB37/T 3993 2020 7 C C 附 录 C（资料 性附 录）苯、氘 代苯 标准 物质 的定 量离子 流图 苯、氘 代苯 标准 物质 的定 量离子 流图 见图C.1。说明：1 苯，m/z=78；2 氘代苯内标，m/z=84。图C.1 苯、氘 代苯 标准 物质（0.20 mg/L）的 定量 离子 流图 _