ICS 65.0 20.01 B 16 DB45 广西壮族自治区地方标准 DB 45/T 21742020 甘蔗黑穗病抗性评价技术规程 Technical regulation for evaluation of sugarcane resistance to smut(Sporisorium scitamineum Syd.)2020-10-29 发布 2020-11-30 实施广西壮族自治区市场监督管理局 发布 DB 45/T 2 17 4 20 20 I 目 次 前 言.II 1 范围.1 2 规范性引 用文件.1 3 术语和定 义.1 4 抗性评价 方法.1 5 病情调查与分级.2 6 评价记录.3 附录 A（资料 性）甘蔗对黑穗病抗性的评价标准.4 附录 B（资料 性）评价记录表.5DB 45/T 2 17 4 20 20 III 前 言 本文件按照G B/T 1.12 0 20标准化工作导则 第1部分：标 准化文件的 结构和起草 规则的规 定 起草。本文件由广西壮族自治区糖业发展办公室提出并监督实施。本文件由广西壮族自治区糖业标准化技术委员会归口。本文件起草单位：广西壮族自治区农业科学院甘蔗研究所、中国农业科学院甘蔗研究中心。本文件主要起草人：宋修鹏、韦金菊、覃振强、张小秋、颜梅新、王泽平、李德伟、刘璐、李杨 瑞。DB 45/T 2 17 4 20 20 1 甘蔗黑穗病抗性评价技术规程 1 范围 本文件规定了甘蔗黑穗病抗性评价的术语和定义、评价的方法和评价标准。本文件适用于甘蔗黑穗病抗性评价。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注 日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。GB/T 3 58 74 甘蔗黑穗病 抗性鉴定技术规程 3 术语和定义 GB/T 3 58 74 界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1 甘蔗黑粉菌 甘蔗黑粉菌，属担子菌亚门真菌，厚垣孢子近圆形，棕或黑色，萌发时孢子变大，其外壁分裂并生 成称为先菌丝体的小型菌丝，每个先菌丝细胞产生一个担孢子，担孢子的萌发产生萌发管或者相同的担 孢子细胞。3.2 孢子萌发率 萌发的冬孢子（以芽管的长度超过冬孢子直径的50算作 萌发）占视野中冬孢子总数的百分率。萌发 率=萌发 冬孢 子 个 数视野中 冬孢 子总 数1 0 0%4 抗性评价方法 4.1 病原物的收集和保存 晴天时分别从广西崇左、来宾、南宁和百色等不同蔗区大田中，从不同甘蔗品种上采集薄膜未破（孢子粉未散落）的黑穗病鞭子，室温自然风干后，轻轻刮下鞭子上的冬孢子，过孔径38 m筛（400目筛），去除杂质，混合均匀后存放于灭菌的牛皮纸袋中，于4冰 箱中保存备用。DB 45/T 2 17 4 20 20 2 4.2 活力检测 将采集 的甘蔗黑穗病菌冬孢子用 无 菌 水稀释后涂布到培养基（1 琼脂+1蔗糖）上，置 于（28 1）恒温培养箱 中 培养 24 h。100 倍显微镜 下 观察 孢子 萌发情 况（一个视野中2 0 3 0个冬孢 子），孢子 萌发率 9 0.0以 上 为适 合接种 要 求。4.3 接种 4.3.1 材料准备 将待检测 的生长 正常 的甘蔗蔗 茎砍 成 双 芽 段，每个 品种（系）24 0芽，（52 0.5）温汤浸种 30 mi n。4.3.2 接种方法 将镜检 萌发 率 合格 的甘 蔗黑穗病冬 孢子，用0.02的 稀盐酸 配制 成 浓 度为5 10 6 孢 子/mL 的 悬浮液（2 g干燥 的冬孢子 兑 0.02 的 稀盐 酸 1 L）。将 蔗芽 浸泡在悬浮液 中20 mi n，取 出 后放 置 于 保鲜袋 中 于（25 5）保湿处理 24 h。4.3.3 接种后管理 在温 室大 棚 中，将浸泡接种处理后 的甘蔗 种植到装 有 经高压灭 菌 肥力 中等 偏上 细 土 的 塑 料 桶 中，每 桶 4芽，水 分 含量 范围：田 间持水量 的60 70；温 度范 围：15 50；湿 度范 围：30 8 0。每个 品种（系）设 3个 重复，共 60 桶。田 间 管 理 按大田生产 操 作，收获后保留宿根。5 病情调查与分级 5.1 病情调查 甘蔗萌芽结 束后 调查记录出 苗 总 株 数。从 首次 发 现感 病 株开始抽 出黑穗病病穗时，进行 第一 次 调查 至 6个 月株龄 止，发 病 初 期每5天调查 1 次，中 后 期每10天调查 1 次，每 次 调查发 现 病 株，记 载后将 病 株连根拔除。最 后计 算黑穗病 潜伏 期、发病 株（丛）率。宿根 蔗 调查方法同 上。发病率 计 算 参 照 G B/T 35 87 4。5.2 病情分级 病情分级对应 描述见 表1（参考 GB/T 35 87 4）。表1 甘蔗黑穗病抗性病情级别划分 病情级别 描述 1 0发病率3 2 3发病率6 3 6发病率9 4 9发病率12 5 12发病率25 6 25发病率35 7 35发病率50 8 50发病率75 9 75发病率100 DB 45/T 2 17 4 20 20 3 5.3 抗病性评价标准 根据供试材 料3次重复的 发病程度（病情级别），确定其新 植和宿根对 甘蔗黑穗病 的抗性水平，划 分标准参见附录A。6 评价记录 6.1 甘蔗黑穗病抗性评价调查记录表参见附 录B中 的B.1。6.2 甘蔗黑穗病抗性评价结果参见附 录B中 的B.2。DB 45/T 2 17 4 20 20 4 附 录 A（资料性）甘蔗对黑穗病抗性的评价标准 甘蔗对黑穗病菌的抗性 水 平，划 分标准 参见 表A.1。表A.1 甘蔗对黑穗病的抗性水平评价标准 病情级别 抗病性 1 高抗(HR)2 抗病(R)3 中抗(MR)4 中感(MS)5、6 感病(S)7、8、9 高感(HS)DB 45/T 2 17 4 20 20 5 附 录 B（资料性）评价记录表 甘蔗黑穗病抗性评价调查记录表参见表B.1，甘 蔗黑穗病抗性评价结 果表参见表 B.2。表 B.1 甘蔗黑穗病抗性评价调查记录表 重复 品种（系）名 称 调查时间：调查时间：总株数 首次发病时间 发病株数 调查人 发病株数 调查人 累计发病株数 重复1 重复2 重复3 表 B.2 甘蔗黑穗病抗性评价结果表 品种（系）名称 病害潜伏期（d）发病率（）病情级别 抗性评价 负责人：_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 中华人民共和国广西地方标准 甘蔗黑穗病抗性评价技术规程 DB 45/T 2174 2020 广西壮族自治区市场监督管理局统一印刷 版权专有 侵权必究