ICS 13.060 C 51 DB37 山东省地方标准 DB37/T 4146 2020 水质 联 苯胺的测 定 固相萃取-液相色谱-串联质谱 法 Water quality Determination of benzidine Solid phase extraction-Liquid chromatography-Tandem mass spectrometry 2020-09-25 发布 2020-10-25 实施 山 东 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB37/T 4146 2020 1 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规 范性 引用 文件.1 3 方 法原 理.1 4 试 剂和 材料.1 5 仪 器和 设备.2 6 样品.2 7 分 析步 骤.2 8 结 果计 算与 表示.4 9 精 密度 和准 确度.4 10 质 量保 证和 质量 控制.5 DB37/T 4146 2020 2 前 言 本标准 按照GB/T 1.1 2009 给出 的规 则起 草。本标准 由山 东省 住房 和城 乡建 设 厅提 出并 组织 实施。本标准 由山 东省 城镇 给水 排水标 准化 技术 委员 会归 口。本标准 起草 单位：山东 省 城市供 排水 水质 监测 中心、国 家城 市供 水水 质监 测 网武汉 监测 站、国 家城市供水 水质 监测 网杭 州监 测站、国 家城 市供 水水 质 监测网 青岛 监测 站、山 东 省分析 测试 中心、中国 兵 器工业集 团第 五三 研究 所。本标准 主要 起草 人：宋艳、贾瑞 宝、孙韶 华、赵清 华、刘 莉、许燕、李 世蔚、张立 亚、王晓 芳、赵汝松、王晓 利、高岩 立、冀克俭、潘 慧慧、黄 允河。DB37/T 4146 2020 3 水质 联 苯胺的测 定 固 相萃取-液 相色谱-串 联质谱 法 警告：实 验中 使用 的溶 剂 和试剂 均具 有一 定的 毒性，对 健康 具 有 潜在 的危 害，应 尽量 避免 与这 些化学品的 直接接 触。样品制 备过程 应在通 风橱 中进行，操作 时应按 规定 要求佩 戴防护 器具,避免接 触皮 肤和衣物。1 范围 本标准 规定 了测 定生 活饮 用水及 其水 源水 中联 苯胺 的固相 萃取-液 相色 谱-串 联质谱 法。本标准 适用 于生 活饮 用水 及其水 源水 中联 苯胺 的测 定。取水样500 mL，浓 缩倍数 为125倍 时，本标准 测定联 苯胺的 方法检 出限为0.010 g/L，测定 下限为0.040 g/L。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 5750.2-2006 生活 饮用水 标准 检验 方法 水 样的采 集与 保存 GB/T 5750.3-2006 生活 饮用水 标准 检验 方法 水 质分析 质量 控制 GB/T 32465 化 学分 析方 法验证 确认 和内 部质 量控 制要求 GB/T 33087 仪 器分 析用 高纯水 规格 及试 验方 法 HJ/T 91 地表 水和 污水 监 测技术 规范 HJ/T 164 地下 水环 境监 测技术 规范 3 方法原 理 本方法 采用 固相 萃取 柱对 水中的 联苯 胺进 行富 集，经甲醇 洗脱 后，进入 液相 色谱分 离后 串联 质谱 检测，根 据保 留时 间、碎片 离子质 荷比 定性，外 标法 定量测 定。4 试剂和 材料 4.1 固相萃 取柱：HLB（6 mL，200 mg）或 等效 固相 萃取 柱。4.2 高纯水：水 质满 足GB/T 33087 的规 定。4.3 甲醇：色谱 纯。4.4 氮气：纯度 99.999%。4.5 乙酸铵：分 析纯。4.6 硫代硫 酸钠：分 析纯。4.7 联苯胺 标准 溶液：=100 mg/L，溶剂 为甲 醇，有证 标 准物质。DB37/T 4146 2020 4 4.8 标准使用 液：=1.0 mg/L。取1 000 L 联苯 胺标 准 溶液（4.7），用甲 醇（4.3）稀 释并 定容 至100 mL，配 制1.0 mg/L 标 准使用 液。于 4 以 下冷 藏密封 避光 保存。4.9 乙酸铵-水 溶液：c=10.0 mmol/L。称取0.770 8 g 乙 酸铵（4.5）用 高纯 水（4.2）溶解 并定 容至1 L。4.10 硫代硫 酸钠 溶液：用 硫代 硫酸钠（4.6）、高 纯水（4.2）配制，浓 度为5 g/L。5 仪器和 设备 5.1 液相色 谱-串联 质谱 仪：配 有电喷 雾离 子源。5.2 色谱柱：C18 柱 或其 他等 效 色谱柱。5.3 固相萃 取装 置。5.4 棕色样 品瓶：2 mL。5.5 容量瓶：100 mL。5.6 采样瓶：1 L4 L 棕 色玻 璃瓶，螺旋 盖（具聚 四氟 乙烯涂 层的 密封 垫）。5.7 微量注 射器：100 L 和1 000 L。6 样品 6.1 样品 采 集与 保存 按照HJ/T 91 和HJ/T 164 的 相关规 定采 集样 品。用采 样瓶（5.6）采 集样 品。按照GB/T 5750.2 2006 的 相关规 定贮 存样 品。样品 采集后 在4 下 冷藏 避光 保存，24 h 内完 成前 处理，5 d内 完成 样品 分析。若水样 中存 在残 留氯，加 入硫代 硫酸 钠溶 液（4.10）去除 余氯。6.2 试样制 备 6.2.1 活化 依次用10 mL 甲 醇（4.3）和10 mL 高 纯水（4.2）活 化固相 萃取 柱（4.1）。6.2.2 样品富 集 量取500 mL 水样，以10 mL/min 流 速通 过活 化后 的固 相 萃取柱，完 成固 相萃 取富 集。注：富集所用水样体积 根据水样实际情况可适当增减；不同型号的自动固相萃取仪或手动固相萃取仪，按照各自型号仪器或手动进样操作规程进行萃取。6.2.3 淋洗 用5 mL 高纯 水（4.2）以10 mL/min 流速 淋洗 萃取 柱，淋洗完 成后 用氮 气吹 干。6.2.4 洗脱 用4 mL 甲醇（4.3）以1 mL/min 流 速洗 脱吸 附在 固相 萃 取柱上 的被 测组 分，收集 洗脱液 至浓 缩管 中，并用甲 醇（4.3）定 容至4 mL，取1 mL 上机 测定。6.3 空白试 样制 备 用高纯 水（4.2）代 替样 品，按照 与样 品（6.2）相 同 的步骤 制备 空白 试样。DB37/T 4146 2020 5 7 分析步 骤 7.1 液相色 谱条 件 7.1.1 流动相：A 相 甲 醇（4.3）、B 相 10 mmol/L 乙酸铵-水 溶液（4.9）。7.1.2 洗脱模 式及 洗脱 流速：采 用等度 洗脱，流 动相 为 A:B=98:2（V:V），洗 脱速 率为 0.3 mL/min。7.1.3 柱温：30。7.1.4 进样体 积：10 L。7.2 质谱 条件 7.2.1 离子源：电 喷雾 离子 源，正离子 模式。7.2.2 离子源 温度：350。7.2.3 扫描方 式：MRM，多 反应 监 测条件 见 表 1。表1 质谱参 考参 数设 置 物质名称 母离子 子离子 碎裂电压 V 碰撞电压 V 联苯胺 185 167*130 29 151*30 注：带*为定量离子，带*为定性离 子。7.3 校准曲 线的 绘制 7.3.1 本方法 使用 外标 法定 量。7.3.2 校准系 列的 配制：分别 取5 L、25 L、50 L、100 L、150 L、200 L、250 L 标 准使用液（4.8），用甲 醇（4.3）定容 至1 mL，配 制成 浓 度分别 为 5 g/L、25 g/L、50 g/L、100 g/L、150 g/L、200 g/L、250 g/L 校 准系 列溶 液，保 存在 2 mL 棕色 样品 瓶（5.4）中 待上 机测 试。7.3.3 将校准 系列 溶液 按浓 度由 低到高 的顺 序依 次进 样，以 校准 系列 浓度 为横 坐标，峰面 积为 纵坐 标，绘制校 准曲 线。7.4 试样测定 7.4.1 采用自 动进 样 器 进样，进 样量 为10 L。7.4.2 将6.2 处理 后的 试 样 上机 测定。注：若样品中联苯胺浓度超出校准曲线最高点，用甲醇（4.3）稀 释后测定。7.4.3 联苯 胺MRM 色谱 图见 图 1 所示。DB37/T 4146 2020 6 图1 联苯 胺MRM 色谱 图 7.5 空白 试验 按照与 试样 测定（7.4）相 同的步 骤进 行空 白试 样（6.3）的 测定。8 结果计 算与 表示 8.1 定性结 果 根据联 苯胺MRM 色谱 图中 的 保留时 间和 特征 离子 对进 行定性 分析。8.2 定量结 果 根据定 量离子的峰面积 外标法定 量。由校准曲线 得到样品 中待测物的浓度 x 按照公 式（1）计 算，测定结 果位 数的 保留 与测 定下限 一致，最 多保 留三 位有效 数字。x=.(1)式中：x 样品 中组 分质 量浓 度，单 位为 微克 每升（g/L）；0 固相 萃取 洗脱 液质 量浓度，单 位为 微克 每升（g/L）；Vt 固 相萃 取洗 脱液 浓 缩后定 容体 积，单位 为毫 升（mL）；Vs 水 样体 积，单位 为 毫升（mL）。9 精密度 和准 确度 9.1 精密度 4 家 实 验 室 分 别测 定 浓 度为0.08 g/L 1.00 g/L的高 纯 水 加 标 样品。实 验室内 相 对 标 准 偏差 为0.9%14%；实 验室 间的 相对标 准偏 差为8.0%12%。DB37/T 4146 2020 7 9.2 准确度 4家实 验室 分别 测定 地表 水、地下 水及 生活 饮用 水加 标样品。加 标浓 度为0.08 g/L 1.00 g/L，其加标 回收 率为72.1%117%。10 质量保 证和 质量 控制 10.1 空白试 验 每批次 样品 应做 空白 试验，测定 结果 不能 超过 方法 的检出 限。10.2 校准曲 线要 求 分析样品 之前，应建立能够覆盖样 品浓度范围的至少6 个浓度点的校准曲线，曲线的相 关系数r2应大于0.995。10.3 平行样 平行双 样测 定结 果的 相对 偏差满 足GB/T 5750.3 2006 的要 求。10.4 基体加 标 基体加 标样 品的 加标 回收 率范围 满足GB/T 32465 的 要求。_