ICS 11.020 C 62 DB32 江苏省 地 方 标 准 DB 32/T 3762.6 2020 新型冠状 病毒检测 技术规范 第6 部分：血清 IgM 和 IgG 抗体 胶体金 免疫 层析 检测 程序 Technical specifications for SARS-CoV-2 detection Part 6:Colloidal gold immunochromatograohic assay test procedure for serum IgM and IgG 2020-03-02 发布 2020-03-03 实施 江 苏 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB32/T 3762.6 2020 I 前 言 DB32/T 3762 新 型冠 状病 毒检测 技术 规范 目 前分 为以下 部分：第1部 分：生物 样本 采 集、运 输和 保存；第2部 分：病毒 分离 与 鉴定；第3部 分：核酸 荧光PCR 检测 程序；第4部 分：重组 酶介 导 等温扩 增程 序；第5部 分：血清IgM 和IgG 抗体 酶联 免疫 吸附检 测 程序；第6部 分：血清IgM 和IgG 抗体 胶体 金免 疫层析 检 测程序；第7部 分：空气 样本 检 测与评 估；第8部 分：物体 表面 检 测与评 估；第9部 分：医务 人员 职 业暴露 检测 与评 估。本部分 为DB32/T 3762 的第6部 分。本部分 按照GB/T 1.1-2009 给出的 规则 起草。本部分 由江 苏省 卫生 健康 委员会 提出。本部分 由江 苏省 卫生 标准 化技术 委员 会归 口。本 部分 主要 起草 单位：江 苏省疾 病预 防控 制中 心、南京医 科大 学、苏州 第五 人民医 院、苏州 大 学 附二院、昆山 市疾 病预 防控 制中心。本 部分 主要 起草 人：黄超、朱宝 立、温恬、吴斌、程军平、徐 佳南、钱 志远、罗晓 明、沈欢 喜。DB32/T 3762.6 2020 1 新型冠状 病毒检 测 技术规范 第 6 部分：血清 IgM 和 IgG 抗体胶体 金免疫层 析检测 程 序 1 范围 本 部分 规定 了新 型冠 状病 毒 IgM 和 IgG 抗体 的胶 体 金免疫 层析 检测 的环 境与 设施、设备 与耗 材、试剂与 材料、血 清样本 采 集、胶 体金 免疫 层析 检测 步骤和 结果 判定。本 部分 适用 于新 型冠 状病 毒肺炎 流行 期间 被检 测者 血清中 的 IgM 和 IgG 抗 体 的胶体 金免 疫层 析 检测方法。其 它呼 吸道 病毒 血清样本 中的 IgM 和 IgG 抗体检 测程 序可 参照 执行。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日 期的引 用文 件，仅 注 日期 的 版本适 用于 本文 件。凡是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有 的修改 单）适用 于本 文件。Doc9284-AN/905 危险 品 航空 安 全运 输技 术细 则 DB32/T 3762.1-2020 新型 冠 状病毒 检测 技术 规范 第1 部分：生物 样本 采集、运 输和保 存 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件 3.1 胶体金 colloidal gold nanoparticles 由 氯 金酸（HAuCl4）在 还原剂 如白磷、抗坏血酸、枸橼 酸钠、鞣 酸等作用下，聚 合成为特 定大小的金颗 粒，并由 于静 电作 用成为 一种 稳定 的胶 体状 态，称 为胶 体金。3.2 免疫层 析法 immunochromatography 将特异 的抗 原或 抗体 先固 定于硝 酸纤 维素 膜的 某一 区带，当该 干燥 的硝 酸纤 维素一 端浸 入样本（如血清）后，由于 毛细 管作 用，样本 将 沿着 该膜 向前 移动，当移 动至 特定 区域 时，样本 中 相应 的 抗 体 或 抗原即与 该区 域的 对应 抗原 或抗体 发生 特异 性结 合，若 用免疫 胶体 金或 免疫 酶染 色可使 该区 域显 示一 定 的颜色，从而 实现 特异 性的 免疫诊 断。4 环境与 设施 在BSL-2级实验室 内进 行实 验。5 设备与 耗材 DB32/T 3762.6 2020 2 5.1 设备：生物 安全 柜、洗 板 机、酶 标仪（含有 450nm 波长滤 光片）、高 压锅、生物安 全运 输箱、水浴锅 5.2 耗材：个人 防护 装备：N95 及以 上防 护口 罩、护目 镜、一 次性 防护 面罩、医 用无纺 布帽、连 体防护服、一次 性手 术衣、乳 胶手套、防水 靴套、真 空 釆血管、无 菌螺 旋口 塑料 管。6 试剂与 材料 新型冠 状病 毒人IgM 抗 体 胶体金 检测 试剂 盒、新型 冠状病 毒人IgG 抗体 胶体 金 检测试 剂盒。7 样本采集 用 真 空负 压 采血 管采 集血液 样 本5mL，室温静置30分钟，1500rpm 2000rpm离心10分 钟，收 集血清于无 菌螺 口塑 料管 中。8 样本运输 按照DB32/T 3762.1-2020中6.1和6.2 的 要求。9 胶体金 免疫 层析 检测 步骤 9.1 将待测 样本 及所 需试 剂从 储存条 件下 取出，平 衡至 室温。融化 后，在测 试前 将样本 充分 混匀。9.2 准备检 测时，从 撕口 处打 开铝箔 袋，将检 测卡 取出，平放 于生 安柜 台面 上。9.3 在 检测 卡上 标注 样本 号。9.4 用移液 枪或 者一 次性 滴管 吸取待 测血 清样 本 2 0L 于检测卡 上样 本孔 内，立即 在 样本孔 内滴 加 2 3 滴（约 70 L 100L）样本稀 释液，并 确保 操作 过程中 没有 气泡 产生。9.5 10 分 钟后 判读 结果。10 结果判 定 10.1 阴性结 果 仅出现 质控 线C，检测 线G 和M 都 不显 色，说明 没有 检测到 新型 冠状 病毒 抗体，结果 为阴 性。10.2 阳性结 果 10.2.1 质控 线 C 和检 测线 M 都 出 现，说 明检 测到 新型 冠状 病毒 IgM 抗 体，结果 为 IgM 抗体 阳性。10.2.2 质控 线 C 和检 测线 G 都出 现，说 明检 测到 新型 冠状 病毒 IgG 抗体，结 果为 IgG 抗 体阳 性。10.2.3 质控 线 C、检测 线 M 和检 测线 G 都出 现，说 明检 测 到新型 冠状 病 毒 IgM 和 IgG 抗 体，结果 为IgM 和 IgG 抗体 阳性。10.3 无效结 果 质控线 未 出现，无 论检 测线是 否出 现，均为 无效 结果。_