郑 州 农 大 兽 药 有 限 公 司 企 业 标 准Q /ZZNDQ/ZZND 020-2018混 合 型 饲 料 添 加 剂 溶 菌 酶2018-05-05发 布 2018-05-15实 施郑 州 农 大 兽 药 有 限 公 司 发 布备案 2018年07月07日 11点00分备案 2018年07月07日 11点00分Q/ZZND 020-2018I前 言本 标 准 起 草 单 位 ： 郑 州 农 大 兽 药 有 限 公 司 。本 标 准 主 要 起 草 人 ： 王 小 玉 。本 标 准 为 首 次 发 布 。备案 2018年07月07日 11点00分备案 2018年07月07日 11点00分Q/ZZND 020-20181混 合 型 饲 料 添 加 剂 溶 菌 酶1 范 围本 标 准 规 定 了 混 合 型 饲 料 添 加 剂 溶 菌 酶 的 原 料 要 求 、 技 术 要 求 、 试 验 方 法 、 检 验 规 则 、 标 签 、 包装 、 运 输 和 贮 存 。本 标 准 适 用 于 以 饲 料 添 加 剂 溶 菌 酶 为 主 要 原 料 以 蒙 脱 石 或 沸 石 粉 、 玉 米 芯 粉 等 为 载 体 ， 经 混 合 加工 而 成 的 混 合 型 饲 料 添 加 剂 溶 菌 酶 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文 件 。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。GB/T 5 9 1 7 .1 饲 料 粉 碎 粒 度 测 定 两 层 筛 筛 分 法GB/T 5 9 1 8 饲 料 产 品 混 合 均 匀 度 的 测 定GB/T 6 4 3 5 饲 料 中 水 分 的 测 定GB 1 0 6 4 8 饲 料 标 签GB/T 1 3 0 7 9 饲 料 中 总 砷 的 测 定GB/T 1 3 0 8 0 饲 料 中 铅 的 测 定 原 子 吸 收 光 谱 法GB/T 1 3 0 9 1 饲 料 中 沙 门 氏 菌 的 检 测 方 法GB/T 1 3 0 9 2 饲 料 中 霉 菌 的 检 测 方 法GB/T 1 4 6 9 9 .1 饲 料 采 样GB/T 1 8 8 2 3 饲 料 检 测 结 果 判 定 的 允 许 误 差GB/T 2 0 1 9 5 动 物 饲 料 试 样 的 制 备中 华 人 民 共 和 国 国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局 令 （ 2 0 0 5 ） 第 7 5 号 定 量 包 装 商 品 计 量 监 督 管 理 办 法 中 华 人 民 共 和 国 农 业 部 公 告 第 1 7 7 3 号 饲 料 原 料 目 录 中 华 人 民 共 和 国 农 业 部 公 告 第 1 8 4 9 号 混 合 型 饲 料 添 加 剂 生 产 企 业 许 可 条 件 中 华 人 民 共 和 国 农 业 部 公 告 第 2 0 4 5 号 饲 料 添 加 剂 品 种 目 录 （ 2 0 1 3 ） 3 原 料 要 求生 产 产 品 所 用 原 料 应 符 合 饲 料 原 料 目 录 的 规 定 ， 所 用 添 加 物 应 符 合 饲 料 添 加 剂 品 种 目 录 （ 2013） 的 规 定 ， 严 禁 使 用 国 家 明 令 禁 止 的 添 加 物 和 化 学 制 品 。4 技 术 要 求4.1 感 官粉 状 物 ， 色 泽 均 匀 一 致 ， 无 结 块 、 发 霉 变 质 及 异 味 、 异 嗅 。4.2 成 品 粒 度全 部 通 过 2.50 m m 编 织 筛 。备案 2018年07月07日 11点00分备案 2018年07月07日 11点00分Q/ZZND 020-201824.3 混 合 均 匀 度混 合 应 均 匀 ， 经 测 试 后 其 均 匀 度 之 变 异 系 数 （ CV） 不 大 于 7%。4.4 水 分不 大 于 12.0%4.5 卫 生 指 标总 砷 不 大 于 10mg/kg， 铅 不 大 于 20mg/kg,霉 菌 总 数 不 大 于 4.0× 104， 沙 门 氏 菌 不 得 检 出 。4.6 主 要 营 养 成 分主 要 营 养 成 分 指 标 见 表 1。 表 1 主 要 营 养 成 分 指 标产 品 名 称 混 合 型 饲 料 添 加 剂 溶 菌 酶 型 型 型 型溶 菌 酶 ， u/mg 50.00 100.00 500.00 1000.005 试 验 方 法5.1 感 官取 适 量 样 品 ， 在 非 阳 光 直 射 条 件 下 ， 观 其 色 泽 、 形 态 ， 嗅 其 气 味 。5.2 成 品 粒 度成 品 粒 度 的 测 定 按 GB/T 5917.1执 行 。5.3 混 合 均 匀 度混 合 均 匀 度 的 测 定 按 GB/T 5918执 行 。5.4 水 分水 分 的 测 定 按 GB/T 6435执 行 。5.5 溶 菌 酶溶 菌 酶 的 测 定 按 附 录 A 执 行 。5.6 总 砷总 砷 的 测 定 按 GB/T 13079 执 行 。5.7 铅铅 的 测 定 按 GB/T 13080 执 行 。5.8 沙 门 氏 菌沙 门 氏 菌 的 测 定 按 GB/T 13091 执 行 。备案 2018年07月07日 11点00分备案 2018年07月07日 11点00分Q/ZZND 020-201835.9 霉 菌 总 数霉 菌 总 数 的 测 定 按 GB/T 1 3 0 9 2 执 行 。6 检 验 规 则6.1批 次以 同 批 原 料 、 同 一 配 方 、 相 同 设 备 的 每 日 生 产 量 为 一 个 批 次 。6.2采 样按 GB/T 1 4 6 9 9 .1 执 行 。6.3检 验6.3.1 出 厂 检 验出 厂 产 品 由 本 公 司 质 检 部 门 负 责 检 验 ， 检 验 项 目 为 感 官 、 粒 度 、 水 分 和 溶 菌 酶 。 产 品 检 验 合 格 后 方可 出 厂 ， 每 批 出 厂 产 品 应 附 有 质 量 检 验 合 格 证 （ 章 ） 和 使 用 说 明 。6.3.2 型 式 检 验型 式 检 验 为 全 项 目 检 验 ， 每 年 不 得 少 于 一 次 。 如 有 下 列 情 况 之 一 时 ， 应 进 行 型 式 检 验 ：a) 主 要 原 、 辅 材 料 ， 配 方 ， 生 产 工 艺 或 设 备 发 生 较 大 改 变 时 ；b) 停 产 半 年 以 上 再 恢 复 生 产 时 ；c) 出 厂 检 验 结 果 与 上 次 型 式 检 验 结 果 有 较 大 差 异 时 ；d) 国 家 有 关 部 门 监 督 检 验 与 抽 查 时 。6.4 判 定 规 则检 测 结 果 判 定 的 允 许 误 差 按 GB/T 1 8 8 2 3 执 行 。6.5 复 检 规 则产 品 在 检 验 中 如 有 一 项 指 标 不 符 合 本 标 准 时 ， 应 重 新 加 倍 抽 样 进 行 复 检 。 复 检 结 果 中 仍 有 一 项 指 标不 符 合 本 标 准 时 ， 则 该 批 产 品 判 为 不 合 格 品 。7 标 签 、 包 装 、 运 输 和 贮 存7.1 标 签按 GB 1 0 6 4 8 执 行 。7.2 包 装包 装 物 采 用 无 毒 、 无 害 ， 对 产 品 质 量 无 影 响 的 材 料 。 包 装 规 格 （ 净 含 量 ） 为 ： 1 0 0 g、 2 0 0 g、 3 0 0 g、4 0 0 g、 5 0 0 g、 1 Kg、 2 Kg等 ， 也 可 根 据 用 户 提 出 的 净 含 量 要 求 进 行 包 装 。 包 装 净 含 量 允 许 误 差 应 符 合 定量 包 装 商 品 计 量 监 督 管 理 办 法 的 规 定 。7.3 运 输备案 2018年07月07日 11点00分备案 2018年07月07日 11点00分Q/ZZND 020-20184产 品 在 运 输 过 程 中 应 防 止 日 晒 雨 淋 、 包 装 破 损 ， 严 禁 与 有 毒 、 有 害 物 质 混 运 。7.4 贮 存产 品 应 贮 存 于 常 温 、 通 风 、 干 燥 处 ， 严 禁 与 有 毒 、 有 害 物 质 混 贮 。 在 常 温 条 件 下 ， 产 品 保 质 期 为 8个 月 。附 录 A备案 2018年07月07日 11点00分备案 2018年07月07日 11点00分Q/ZZND 020-20185（ 规 范 性 附 录 ）溶 菌 酶 活 力 的 测 定A.1原 理在 一 定 浓 度 的 浑 浊 溶 液 中 ， 溶 菌 酶 可 以 水 解 细 菌 细 胞 壁 上 的 肽 聚 糖 ， 从 而 使 细 菌 裂 解 而 浓 度 降 低 ，透 光 度 增 强 ， 因 此 可 以 根 据 其 透 光 度 的 变 化 来 测 定 溶 菌 酶 的 含 量 。A.2试 剂 和 材 料除 非 另 有 说 明 ， 在 分 析 中 仅 使 用 确 认 为 分 析 纯 的 试 剂 ； 蒸 馏 水 或 去 离 子 水 或 符 合 GB/T 6682 中 规 定的 三 级 水 或 相 当 纯 度 的 水 。 试 验 中 所 用 试 剂 、 制 品 ， 均 按 GB/T 603 的 规 定 制 备 。A.3仪 器 和 设 备A.3.1 移 液 枪 ： 精 度 为 5ul， 量 程 为 50 1000ul。A.3.2 分 析 天 平 ： 感 量 0.0001gA.3.3 酸 度 计A.3.4 匀 浆 器A.3.5 紫 外 可 见 分 光 光 度A.3.6 恒 温 水 浴 锅A.3.7 涡 旋 混 合 器A.4 分 析 步 骤A.4.1 底 物 的 制 备菌 种 为 溶 菌 小 球 菌 ， 将 其 接 种 与 营 养 琼 脂 培 养 基 上 ， 置 35 ± 2 培 养 48小 时 ， 用 生 理 盐 水 将 菌体 洗 下 ， 用 纱 布 滤 过 ， 滤 液 离 心 后 ， 倾 去 上 层 清 夜 ， 再 加 生 理 盐 水 适 量 ， 如 此 反 复 洗 涤 菌 体 数 次 ， 取 下层 沉 淀 ， 供 测 定 用 ； 或 者 将 洗 涤 后 的 菌 体 用 少 量 水 悬 浮 ， 冰 冻 干 燥 ， 得 淡 黄 色 粉 末 ， 供 测 定 用 ， 可 保 存一 年 。或 直 接 购 买 成 品 。A.4.2 试 样 溶 液 的 制 备精 密 称 取 式 样 适 量 （ 约 相 当 于 溶 菌 酶 活 力 125000IU)， 置 100ml量 瓶 中 ， 加 磷 酸 盐 缓 冲 液 溶 解 并 稀释 至 刻 度 ， 摇 匀 ； 精 密 量 取 5ml置 25ml 量 瓶 中 ， 用 磷 酸 盐 缓 冲 液 稀 释 至 刻 度 ， 摇 匀 ， 即 得 。A.4.3 底 物 悬 浮 液 的 制 备另 外 称 取 底 物 （ 即 菌 体 ） 5-15mg， 加 磷 酸 盐 缓 冲 液 4-5ml， 在 匀 浆 器 内 研 磨 5 分 钟 ， 倾 出 ， 用 磷 酸 盐 缓冲 液 稀 释 到 适 当 体 积 ， 使 悬 浮 液 在 25 ± 0.1 时 ， 用 磷 酸 盐 缓 冲 液 调 零 ， 用 分 光 光 度 法 ， 在 450nm 波备案 2018年07月07日 11点00分备案 2018年07月07日 11点00分Q/ZZND 020-20186长 处 测 定 吸 收 度 为 0.65-0.75 时 （ 临 用 前 配 制 )， 进 行 酶 活 力 测 定 。A.4.4 测 定精 密 量 取 25 ± 0.1 底 物 悬 浮 液 3ml， 放 入 比 色 皿 中 ， 用 分 光 光 度 法 ， 在 450nm波 长 处 测 定 吸 收 度 ，作 为 零 时 读 数 ， 然 后 量 取 25 ± 0.1 时 的 试 样 0.15ml 溶 液 ， 加 入 上 述 比 色 皿 中 ， 迅 速 混 合 ， 用 秒 表计 算 时 间 ， 至 60 秒 时 在 测 定 吸 收 度 ； 同 时 精 密 量 取 磷 酸 盐 缓 冲 液 0.15ml， 同 法 操 作 ， 作 为 空 白 试 验 ，测 得 零 秒 的 读 数 及 60 秒 的 读 数 。A.4.5 结 果 计 算用 于 酶 解 反 应 的 稀 释 酶 液 中 溶 菌 酶 活 力 按 （ A.1） 计 算 ；（ A0-A） -（ a0-a)X= - - ×103M式 中 ：X： 式 样 中 的 溶 菌 酶 的 活 力 的 ， 单 位 为 每 毫 克 （ u/mg）A0： 试 样 零 时 吸 收 度 ；A： 试 样 60 秒 时 吸 收 度 ；a0： 空 白 零 时 吸 收 度 ；a： 空 白 60 秒 时 吸 收 度 ；M ： 测 定 液 中 试 样 的 重 量 ， 单 位 为 毫 克 （ mg）103： 转 化 因 子 。每 个 试 样 取 两 个 平 行 样 进 行 测 定 ， 以 其 算 平 均 值 为 结 果 ， 结 果 保 留 整 数 。A.4.6 重 复 性同 一 试 样 两 个 平 行 测 定 值 的 相 对 偏 差 ， 不 超 过 10%。备案 2018年07月07日 11点00分备案 2018年07月07日 11点00分