ICS 65.020.20 B 16 DB12 天津市 地 方 标 准 DB12/T 988 2020 果蔬中胺 鲜酯和噻 苯隆农药 残留量的 测定 液相色谱-串联质谱 法 Determination of diethyl aminoethyl hexanoat and thidiazuron residues in fruits and vegetables by Liquid chromatography-tandem mass spectrometry 2020-10-14 发布 2020-11-15 实施 天 津 市 市 场 监 督 管 理 委 员 会 发布 DB12/T 988 2020 I 前 言 本标准 依据GB/T 1.1-2009 给出的 规则 起草。本标准 由天 津市 农业 农村 委员会 提出 并归 口。本标准 起草 单位：天 津市 农业质 量标 准与 检测 技术 研究所、摩 天众 创（天津）检测 服务 有 限 公 司。本标准 主要 起草 人：李 辉，邵 辉，刘 磊，李 娜，林宏 芳，李晋 津，张 宇轩，牛 艺融，梁 静，张 玉婷，宋淑荣，郭 永泽、冯 兆欣、郝玉 杰、潘喆。DB12/T 988 2020 1 果 蔬中胺 鲜酯和噻 苯隆农 药残 留量 的测定 液 相色谱-串 联质谱 法 1 范围 本标准 规定了 液相 色谱-串 联质谱 法测定 水果、蔬菜 中胺鲜 酯和噻 苯隆 的方法 原理、试剂和 材料、仪器和 设备、操 作步 骤及 结果表 示。本标准 适用 于水 果、蔬菜 中胺鲜 酯和 噻苯 隆残 留量 的测定。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于 本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB 2763 食品 中农 药最 大 残留限 量 GB/T 6682 分 析实 验室 用 水规格 和试 验方 法 3 方法原理 样品经 乙腈 和水 提取，经 液 液分配，用UPLC/MS/MS 多 反 应监测 条件 方法 测定，基 质 匹配外 标法 定量。4 试剂和 材料 4.1 基本要 求 除另有 说明 外，所用 试剂 均为分 析纯。所 用水 为GB/T 6682 规定 的一 级水。4.2 试剂 4.2.1 乙腈：色谱 纯。4.2.2 甲醇：色谱 纯。4.2.3 氯化钠。4.2.4 乙酸：色谱 纯。4.2.5 甲酸：色谱 纯。4.3 农药标 准品 胺鲜酯 和噻 苯隆，纯 度均 97.0。4.4 标准储 备液 准确称 量农 药标 准品0.01 g(准确 至0.00001 g)，用甲醇 定容 至50 ml。配 制 成200 mg/L 的标 准溶液。4.5 基质混 合标 准工 作溶 液 DB12/T 988 2020 2 用空白 样品 基质 溶液 配制 成不同 浓度 的基 质混 合标 准工作 溶液，用 于做 标准 工作曲 线。基质 混 合 标准工作 溶液 应现 用现 配。5 仪器和 设备 5.1 液相色 谱-质谱 联用 仪：配 有 电喷 雾离 子源(ESI)。5.2 电子天 平，感量：0.00001 g、0.01 g。5.3 具塞塑 料离 心管：聚 丙烯，50 mL，或相 当。5.4 高通量 组织 研磨 仪。5.5 涡旋仪。5.6 离心机。6 试样制 备与 保存 试样的 制备 应按 照GB 2763 的要求 执行。7 测定步 骤 7.1 提取 称经粉 碎试样10.00 g于50 mL具 塞离 心管 中，加入20 mL 乙 腈，5 mL 水，浸泡10 min，用 组织 研磨仪振荡 提取15 min，向离 心管中 加入5 g 氯化 钠，再 次振荡 提取10 min，于离 心机上 以4000 r/min 离心5 min，取上 清液，过0.22 m滤膜 待测。7.2 测定条 件 7.2.1 液相色 谱 质谱 联用 仪：配有 电 喷雾 离子 源(ESI+)。7.2.2 超高效 液相 色谱 条件(Waters H class)：色谱柱：Acquity HSS T3(2.1 mm100 mm，1.7 m)；柱温：25；进样量：5 L；流动相：乙 腈+0.1%甲酸 水=75+25(V/V)；流速：0.2 mL/min。7.2.3 质谱条 件(Waters H class/xevo TQ-S)：离子源：ESI(+)；毛 细管 电压：1.5 kV；离子 源温 度：150；脱溶剂 气温 度：400；锥 孔反吹 气流 量：150 L/h；锥孔反 吹压 力：7 bar；脱 溶剂气 流量：800 L/h；检测方 式为 多反 应监 测扫 描模式（MRM）每种农 药分 别选 择一 对定 量离子、一对 定性 离子。农药的 保留 时间、定量 离 子对、定 性离 子 对和碰撞 电压，参 见附 录 A。7.3 空白 试验 除不加 待测 样品 外，按上 述相同 条件 和步 骤进 行。7.4 定性测 定 DB12/T 988 2020 3 7.4.1 液相色 谱-串联 质谱 法对样品 定性 确证 须满 足以 下 要 求：待测样 品 中 被测 物 的 保留 时间在 外标 标准 样品 保留 时间的2.5%之内；定性离 子的 信噪 比大 于 3（S/N3）；与外标 标准 品相 比，样品 的两个 特征 离子 相对 丰度 在表 1 规定 的许 可范 围内。7.4.2 空白添 加样 品中 被测 物 的 总离子 流色 谱图 和特 征离 子的色 谱图 参见 附 录 B。表1 定性确 证时 相对 离子 丰度 的最大 允许 偏差 相对离子丰度比（%）允许的最大偏差（%）50 2 0 20 50 2 5 10 20 3 0 1 0 5 0 7.5 定量测 定 7.5.1 本方法 推荐 采用 外标 标准 曲线法 单离 子定 量测 定。通过与 添加 到空 白样 品的 标准工 作液 中已 知质量浓 度农 药的 定量 离子 进行比 较，确定 试样 溶液 中相应 农药 的浓 度。定量 用的标 准工 作液 应 采 用 空 白试样基 质配 制，定量 限参 见附 录 A，色谱 图参 见附 录 B。7.5.2 试样中 各农 药残 留量 以质 量分 数 计，标准 曲线 法 按式(1)计 算，外 标单 点法 按式(2)计算（结果保 留3 位 小数）。V 1000=1000 m（1）式中：试样 中 被 测物 残留 量，单 位 为毫 克每 千克（mg/kg）；通过 标准 曲线 计算 得 到试样 溶液 中 被 测物 的质 量浓度，单 位为 微克 每毫 升（g/mL）；V 试样 溶液 的定 容体 积，单位 为毫 升（mL）；m 试样 质量，单 位为 克（g）。或外标 单点 法定 量。ssC A V 1000=A 1000 m（2）式中：试样 中 被 测物 残留 量，单位 为毫 克每 千克（mg/kg）；Cs 基质 标准 工作 溶液 中 被测 物 的 质量 浓度，单 位为微 克每 毫升（g/mL）；A 试样 溶液 中 被 测物 的 色谱峰 面积；As 基质 标准 工作 溶液 中 被测 物 的 色谱 峰面 积；V 试样 溶液 的定 容体 积，单位 为毫 升（mL）；m 试样 质量，单 位为 克（g）。8 精密度 在重复 性条 件下 获得 的两 次独立 测定 结果 的绝 对差 值不得 超过 算术 平均 值的20%。9 方法定 量限 DB12/T 988 2020 4 方法的 定量 限为：胺鲜 酯0.005 mg/kg；噻苯 隆0.005 mg/kg。DB12/T 988 2020 5 A A 附 录 A（资料 性附 录）胺鲜酯 和噻 苯隆 检测 数据 表A.1 胺鲜酯 和噻 苯隆 检测 数据 编号 中文名称 英文名称 保留时间（min）定量离子 定性离子 锥孔电压(V)碰撞电压(V)定量限（mg/kg）1 胺鲜酯 2-Diethylaminoethyl hexanoate 1.02 216/143 216/143 216/100 26 15/15 0.005 2 噻苯隆 thidiazuron 1.31 221.0/101.9 21.0/101.9 221.0/93.9 22 15/13 0.005 DB12/T 988 2020 6 B B 附 录 B（资料 性附 录）标准品 色谱 图 bcbq0.02Time-0.00 0.50 1.00 1.50 2.00%-595-0.00 0.50 1.00 1.50 2.00%-595-0.00 0.50 1.00 1.50 2.00%-595201512300016 MRM of 4 Channels ES+216 143(ANXZH)8.75e61.02201512300016 MRM of 4 Channels ES+216 100(ANXZH)6.32e61.02201512300016 MRM of 4 Channels ES+TIC1.51e71.021.31 bcbq0.02Time-0.00 0.50 1.00 1.50 2.00%-595-0.00 0.50 1.00 1.50 2.00%-595-0.00 0.50 1.00 1.50 2.00%-595201512300016 MRM of 4 Channels ES+221 101.9(SBL)1.24e71.31201512300016 MRM of 4 Channels ES+221 93.9(SBL)1.41e61.31201512300016 MRM of 4 Channels ES+TIC1.51e71.021.31 a）胺鲜酯 b）噻苯隆 图B.1 标准 品 色 谱图 _