ICS 11.220 B 41 DB21 辽宁省 地 方 标 准 DB21/T 3255 2020 非洲猪 瘟 感染养猪 场恢复饲 养消毒及 检测技术规范 Disinfection and detection for ASFV polluted pig farm resume production 2020-04-30 发布 2020-05-30 实施 辽 宁 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB21/T 3255 2020 I 目 次 前 言.II 1 范围.1 2 术 语和 定义.1 3 仪 器和 器材.1 4 药品.1 5 操 作流 程.2 6 消 毒注 意事 项.4 7 阳 性结 果处 置.4 DB21/T 3255 2020 II 前 言 本标准 按 照 GB/T 1.1 2009 给 出的 规则 起草。本 标准 由辽 宁省 农业 农村厅 提出 并归 口管 理。本标准 起草 单位：辽 宁省 农业发 展服 务中 心、沈阳 伟嘉牧 业技 术有 限公 司。本标准 主要 起草 人：杨作 丰、赵宝 凯、郭 洪军、李 洪宇、高 志峰、鄂禄 祥、金晖、王 方、于 学武、庞学敏、尚 续增、范 治斌、权根 花、李巍、陈 宁、左士峰、赵 红秋。本标准 发布 实施 后，任何 单 位和个 人如 有问 题和 意见 建议，均可 以通 过来 电和 来 函等方 式进 行反 馈，我们将 及时 答复 并认 真处 理，根 据实 际情 况依 法进 行评估 及复 审。归口管 理部 门通 讯地 址：辽 宁省农 业农 村厅（沈 阳市 和 平区太 原北 街2 号），联 系电 话：024-23447862；标准起 草单位 通讯 地址：辽宁省 动物及 产品 检疫中 心（沈 阳市沈 河区 万柳塘 路105号 甲），联 系 电话：024-24229579。DB21/T 3255 2020 1 非 洲猪瘟 感染养猪 场恢复 饲养消毒 及检测 技术规范 1 范围 本标准 规定 了非 洲猪 瘟感 染猪场 清群 后，恢 复 生产 前消毒 及检 测的 程序 及方 法要求。本标准 适用 于非 洲猪 瘟感 染猪场 清群 后，恢复 生产 前的消 毒及 检测。2 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 标准。2.1 非洲猪 瘟（African Swine Fever，ASF）是由非 洲猪 瘟病 毒（ASFV）引起 的，感染 家猪 和野 猪的一 种急 性、热性、高 度接触 性动 物传 染 病，以高热、网 状内 皮系 统出 血和高 死亡 率为 特征。2.2 恢复饲 养 恢复饲 养（简称 复养）是 指猪场 发生 疫情 并清 群后，经过 大量 细致 缜密 的准 备工作，包 括：发 病 原因分析、猪 场的 全面 清洗 消毒和 评估、硬 件升 级改 造、一 定时 间的 空栏、操 作流程 的优 化、人员上岗前培训考 核、进猪 前的 疫病 监测后，再 次引 进生 猪的 过程。2.3 相对光 单位（relative light unit,RLU）发光仪 的原 始数 据通 常以 相对光 单位 表示，本 身不 是一个 科学 定义 的单 位，仅是一 个样 品中 光 产 生量的相 对测 试值。在 快速 洁净检 测中，RLU 数 值反 映 的是微 生物、食 物残 留物 和污物 等中 总的ATP 浓度。2.4 实时荧 光定 量核 酸扩 增检 测系统（Real-time Quantitative PCR Detecting System，qPCR）实时定 量PCR 仪 加实 时荧 光 定量试 剂，构成qPCR 实时 荧光定 量核 酸扩 增检 测系 统。3 仪器和 器材 需使用 的仪 器和 器材 包括：清 洗机、臭氧 发生 器、弥雾机、紫 外灯、微 生物 快速检 测仪（ATP 荧光检测仪）、冰箱、电 子秤、钢丝 球、防护 服、棉签、离心 管（5mL 离心 管、2mL 离 心管）等。4 药品 需使用 的消 毒药 品包 括：火碱石 灰乳（20%石灰 乳 和 2%火碱 混悬 液的 配置 方 法：1 公 斤烧 碱，10 公斤生石 灰，加 入50 公斤 水，拌匀 后纱 网过 滤。石灰 乳必须 即配 即用，过 久放 置会变 质导 致失 去杀 菌消毒作用）、碱性 泡沫 清洗 剂、浓 戊二 醛溶 液、过硫 酸氢钾 复合 粉、甲醛 溶液、高锰 酸钾、酒 精、生 理 盐水等。DB21/T 3255 2020 2 5 操作流 程 5.1 疫 情复 盘和 风险 评估 针对拟 恢复 饲养 的ASF 污 染场，在 无害 化清 群后，需 进行疫 情复 盘和 风险 评估，对 存在 的风 险点 进行针对 性整 改，符合 复养 条件的 饲养 场方 可开 展检 测和消 毒工 作。5.2 第 一次 检测 符合复 养条 件的 猪场，对 猪舍、场区、库房、出 猪 台、储 粪池、排污 系统 等 区域分 别采 样，每个 区域使用 棉拭 子随 机采 样5 份，使 用农 业农 村部 推荐 的试剂 和方 法进 行ASF 病 原检测，全 面排 查 猪 场 内 病原情况，评 估猪 场 内ASFV 存在的 风险 点，对高 风险 点做重 点清 洗消 毒。5.3 第 一次 全场 消毒 按照猪 舍、生产 区、生 活 区、场 区外 围的 顺序（以 后消毒 同此 顺序），将 火 碱石 灰 乳（2%火 碱溶 液+20%石 灰乳）过 滤后，每 间隔30 分钟 喷洒 一遍，全 场喷洒 三遍，对 猪场 进行 首次全 场消 毒，以 降 低 场 区的ASFV 载量。5.4 清理 首次全 场消 毒后24小 时，猪场进 行清 理工 作。将猪 舍、出 猪台、粪 沟和 粪尿 池、猪 舍外 周及 场 内 所有可视 垃圾 与废 弃物 移出，包括 猪场 的残 留粪 污、垫料、木制 品、饲 料及 残 渣等，并做 销毁 处理；按 照从高到 低、从内 到外 的顺 序，尽 可能 拆卸 圈舍 内设 备，如 隔离 栏、产床、地 板、吊 顶的 顶棚、风 机、空气循环 系统、灯 罩等，将 拆卸的 设备 移除 圈舍 外消 毒；销 毁可 能污 染的 工作 衣物、工具、纸张、药 品 等不易消 毒 的 物资。5.5 清洗 将猪舍 内所 有可 拆卸 物品 拆卸后 清洗，包 括漏 缝地 板、饮 水桶、饮 水嘴 等。按照由 内到 外，从 高 向低的顺 序使 用高 压清 洗机 以45度 斜角 清洗 生猪 饲养 圈舍、出猪 台、饲料 存放 间、场 区道 路等 生产 区 域，确保冲 洗无 死角，并 做好 电箱、照明 系统、电 源开 关的防 水。清洗标 准：要求 冲洗 后挡 板上无 粪液 及其 他污 染物，产床 上无 粪便、料 块，漏 粪地板 缝隙 无散 料 和粪液，料槽 死角 无剩 料残 渣，粪 沟内 无粪 便，料管 及百叶 无灰 尘。若冲 洗时 有难以 清除 的污 渍或 锈 渍，可用洗 涤剂浸 泡溶 解后冲 刷干净。冲洗 后，按照5.4 的要求 清理冲 下的 粪便和 污物。清洗 完 成后，如 检查不合 格，立即 重新 清洗，直至 清洗 合格。清洗检 查合 格后，使用 碱 性泡沫 清洗 剂由 内向 外对 猪舍进 行泡 沫清 洗，要 求 达到泡 沫全 覆盖，泡沫均匀，浸泡30分 钟后，使 用高压 水枪 将泡 沫彻 底清 洗掉。5.6 火 碱碱 化消 毒 将拆卸 后的 漏缝 地板 正反 面均进 行清 水及 泡沫 清洗。粪沟 内粪 便完 全清 理干 净。干 燥后 漏缝 地 板 正反面、粪沟、硬 化地 面、地 面至实 体墙 面1 米高 左右 处 均喷洒 三遍2%火 碱溶 液，每间隔30分 钟喷 洒一 遍。拆卸的 料管、饮 水嘴、饮 水器、生产 器具 等放 置于2%火碱 溶液 中浸 泡消 毒24 小 时。生产区、出 猪台、储 粪池、蓄水 池等 区域 亦采用2%火碱溶 液碱 化消 毒。5.7 浓 戊二 醛酸 化消 毒 DB21/T 3255 2020 3 火碱消 毒密 闭24 小时 后，使用清 水冲 洗猪 舍，彻底 干燥，再使 用1:200 倍稀 释 的20%浓戊 二醛 溶液，对墙面、地 面等 进行 均匀 喷洒消 毒，要求 每平 方米 至少使 用0.5L 消 毒液，以 挂起水 珠为 标准。5.8 第 二次 检测 猪舍干 燥后，使用 微生物 快速检 测仪（ATP荧 光检 测 仪）进 行多点 采样 检测，评估清 洗消毒 质量，根据微 生物 快速 检测 仪使 用说明，微 生物 检测 合格 标准：RLU 100。不 合格 则立即 重新 清洗 消毒。5.9 甲 醛熏 蒸消 毒 检测合 格后，高 压水 枪冲 洗猪舍，彻 底干 燥后，使 用高锰 酸钾 和甲 醛溶 液进 行熏蒸 消毒，其 中 高 锰酸钾和 甲醛 溶液 每立 方米 的用量 分别 为6.25g 和12.5mL，密 闭72 小时。5.10 设备 消毒 猪舍中 不能使 用清 洗机进 行清洗 消毒的 仪器 和设备，对其 用1:200 过 硫酸氢 钾 复合粉 溶液浸 泡的 新抹布擦 拭表 面和 内部，每 个设备 擦拭 三遍，每 间隔30 分钟 擦拭 一遍。5.11 水线、水 帘消 毒 将消毒 后的 饮水、加药 水 桶中放 满水，配制1:200 过硫酸 氢钾 复合 粉溶 液，消毒后 的饮 水嘴 重新 装好，打 开最 远端 的饮 水器，使消毒 液流 经所 有管 道，浸泡 2 小时 后，每个 水嘴 至少按 压 1 分钟 进行 消毒，直至桶 中水 全部 放净。使用清 水冲 洗水 帘蓄 水池，将水 移出 后，再向 蓄水 池中加 水，配 制1:200 过 硫酸氢 钾复 合粉 溶 液，开启水 帘循 环 12 小 时，对 水帘消 毒。5.12 人员 房舍、库 房消 毒 对人员 房舍 及库 房等 地使 用 1:200 过 硫酸 氢钾 复合 粉溶液 擦拭 消毒，之 后使 用臭氧 熏蒸 消毒，根 据臭氧机 产生臭 氧的 能力、房舍空 间、臭 氧浓 度达 到 100mg/立方 米需要 的时 间 设定熏 蒸时间（分 钟），熏蒸时 间=30+（空间 X100）/臭 氧发 生器 产臭 氧能 力。臭 氧消 毒后 使用 弥雾 机应用 1:200 过 硫酸 氢 钾复合粉 溶液 熏蒸，要 求达 到 30ml/立 方米，密 闭1 小时后 通风。5.13 第二 次全 场消 毒 消毒工 作结 束后，对 猪舍、出猪 台、储粪 池等 全部 生产区 及生 活区 外围 喷洒 火碱石 灰乳（2%火碱溶液+20%石灰 乳），非 硬化 路面铺 撒生 石灰，要 求全 覆盖，厚度 适宜。5.14 第三 次检 测 第二次 全场 消毒 工作 结束 后，对 猪舍、场 区、人员 房舍、仓库、出 猪台、储 粪池周 围等 区域 采 样，每个区 域使 用棉 拭子 随机 采样至 少 5 份，重点 采集 圈舍内 外地 面、墙面、饮 水 管道、食槽、水 嘴、栏杆、风机等 高风 险场 所样 品，使用农 业农 村部 推荐 的试 剂和方 法进 行ASF 病 原检 测。5.15 引进 哨兵 猪 空栏检 测合 格后，引 进经 检测合 格的 哨兵 猪，依 据 饲养场 的规 模，结合 实际，合理 选择 设置 投 放 数量。引 进后，将哨 兵猪 分 别放置 于隔 离舍、配 怀舍、产房、保育 舍、育肥 舍，保证 每个 区域 每个 栏舍 都有哨兵 猪，以进 行饲 养观 察，为 复养 做准 备。5.16 第四 次检 测 DB21/T 3255 2020 4 哨兵猪 饲 养 45 天后，观 察 临床症 状，并进 行非 洲猪 瘟病原 学检 测。无临 床症 状且病 原检 测为 阴 性的猪场，可 以考 虑进 行复 养。6 消毒注 意事 项 6.1 消 毒时，做 好个 人防 护，佩 戴防 毒面 具，手套，口罩，护 目镜 等。6.2 使 用实 时荧 光定 量qPCR 检 测时，若 环境 样品 中 检测到 病毒 核酸，则 提示 该环境 存在 生物 安全 风险，虽然并 不表 示该 环境 一 定 具备传 染源 属性，但为 保 险起见，猪场 需进 行再 一 次的清 洗消 毒，直 至病 原 检测为阴 性方 可认 为合 格。7 阳性 结果 处置 哨兵猪饲养过程中，对于可疑症状立即进行隔离，同时进行实时荧光定量 qPCR 检 测，检 测为阳性的，根据中华人民共和国动物防疫法和中华人民共和国农业农村部非洲猪瘟疫情应急实施方案（2020 年 版）规 定，迅 速 采 取 措 施，并 及 时 向 有 关 部 门 报 告。_