ICS 11.020 C 62 DB32 江苏省 地 方 标 准 DB 32/T 3762.7 2020 新型冠状 病毒检测 技术规范 第7 部分：空气样本 检测与 评估 Technical specifications for SARS-CoV-2 detection Part 7:Air sample detection and evaluation 2020-03-02 发布 2020-03-03 实施 江 苏 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB32/T 3762.7 2020 I 前 言 DB32/T 3762 新 型冠 状病 毒检测 技术 规范 目前 分 为以下 部分：第1部 分：生物 样本 采 集、运 输和 保存；第2部 分：病毒 分离 与 鉴定；第3部 分：核酸 荧光PCR 检测 程序；第4部 分：重组 酶介 导 等温扩 增程 序；第5部 分：血清IgM 和IgG 抗体 酶联 免疫 吸附检 测 程序；第6部 分：血清IgM 和IgG 抗体 胶体 金免 疫层析 检 测程序；第7部 分：空气 样本 检 测与评 估；第8部 分：物体 表面 检 测与评 估；第9部 分：医务 人员 职 业暴露 检测 与评 估。本部分 为DB32/T 3762 的第7部 分。本部分 按照GB/T 1.1-2009 给出的 规则 起草。本部分 由江 苏省 卫生 健康 委员会 提出。本部分 由江 苏省 卫生 标准 化技术 委员 会归 口。本部分 起草 单位：江 苏省 疾病预 防控 制中 心、苏州 第五人 民医 院、苏州 大学 附二院、昆 山市 疾 病 预防控制 中心、南 京医 科大 学。本部分 主要 起草 人：周连、崔仑 标、徐斌、丁 震、程军平、徐 佳南、钱 志远、罗晓 明、沈欢 喜、朱宝立。DB32/T 3762.7 2020 1 新型冠状 病毒检 测 技术规范 第 7 部分：空气样 本 检测 与 评估 1 范围 本 部分 规定 了空 气中 新型 冠状病 毒的 样本 分类、现 场采样、实 验室 检测 和评 估。本 部分 适用 于于 新型 冠状 病毒肺 炎流 行期 间空 气中 新型冠 状病 毒的 检测，其 它 呼吸道 病毒 的空 气 样本检 测 可参 照执 行。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日 期的引 用文 件，仅注 日期 的 版本适 用于 本文 件。凡是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有 的修改 单）适用 于本 文件。WS 395 公 共场 所集 中空 调通风 系统 卫生 学评 价规 范 DB32/T 3762.3-2020 新型 冠 状病毒 检测 技术 规范 第3 部分：核酸 荧光PCR 检测 程序 Doc9284-AN/905 危险 品 航空安 全运 输技 术细 则 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件 3.1 呼出气 冷凝 液 exhaled breath condensate，EBC 一种高 度稀 释的 体液，含 有气道 内衬 液体 及其 可挥 发成分，是 肺内 生化、炎 症的标 记物。EBC 检测是一种 无创 检测 呼吸 道疾 病炎症 的方 法，可以 评价 气道炎 症和 氧化 应激 程度，具有 安全、可 靠、简 便、易行、重复 性好 等优 点。呼吸道 冷凝 液微 生物 的检 测，可 用于 鉴别 病原 菌。4 样本分类 4.1 呼出气 冷凝 液 4.1.1 原理 采用呼 出气 低温 冷凝 加撞 击的原 理，采集 呼出 气中 的生化 物质 及气 溶胶 颗粒。4.1.2 仪器设 备 4.1.2.1 呼出气 冷凝 液采 集器：采 集效 率 150L/m i n，冷凝 温度-100，预 冷时 间 3 min 5min。4.1.2.2 波纹管：一 次性，可 伸缩。4.1.2.3 冷凝盒：一 次性。4.1.2.4 冻存管：2mL。4.2 室内空 气、空调 送风、空 调新风 和室 外排 风 4.2.1 原理 DB32/T 3762.7 2020 2 采 用旋 风分 离式 与撞 击式相 结合，将 空气 中的 颗粒物 直接 采集 到液 体中，检测 采集 样本 中的病毒。4.2.2 仪器设 备 4.2.2.1 便携式 小流 量生 物气 溶胶 采样器：流 量 14 L/min 20L/min，切割点 0.5m，采集 液 3 mL 5mL，时间自设。4.2.2.2 便携式 大流 量生 物气 溶胶 采样器：流 量 300L/min，切割 点 0.5m 0.8m，采 集液 3 mL 15mL，时间自设。4.2.2.3 采样头：一 次性，和 仪器 配套。4.2.2.4 采样桶/采样 瓶：和仪 器配 套。4.2.2.5 采集管：一 次性，3 mL 15 mL。4.2.2.6 冻存管：3 mL 15 mL。4.2.3 气溶胶 采集 液 病毒咽 试纸 采集 液或 者无 菌水。5 现场采 样 5.1 采样人 员防 护 穿戴工 作服、一 次性 工作 帽、一 次性 手套、防护 服、KN95/N95 及 以上 颗粒 物防护 口罩 或医 用防 护口罩、防 护面 屏或 护目 镜、工作 鞋或 胶靴、防 水靴 套等。5.2 点位分 布 发热门 诊、ICU 病房、普 通 病房、护士 站、病 房走 廊、实验 室、CT 室、集 中空 调通风 系统 送风 与新风口、室外 排风 口。5.3 布点原 则 5.3.1 集中空 调通 风系 统按 照 WS/T395 进行 设点；普 通病 房 100 间，抽取 病房 数量 的 3%5%进行布点；普通 病房100 间，抽取病 房数 量 的 1%3%进行布 点。室内 面积 不 足 50m2的设置 1 个 采样 点，50 m2200m2的设置 2 个 采样点，200m2以上的 设 置 35 个 采样 点。5.3.2 采样点 按均 匀布 点原 则布 置；距 离地 面高 度 1.2m 1.5m，距离 墙壁 不小 于 1m；避开 通风 口、通风道 等；同时 考虑 离传 染源远 近。5.4 样本运输 新 型冠 状病 毒空 气样 本运输 包装 分类 属于B 类，对应 的联 合国 编号 为UN3373，包装 符合 国际 民航组 织 文件Doc9284 危险品 航 空安 全 运输 技术 细 则 的PI650 分 类包 装要 求；通 过 其他 交 通工 具运 输的可参照 以上 标准 包装。6 实验室 检验 6.1 负压 P2 实 验前 准备 6.1.1 消毒剂：75%乙醇、0.55%含氯消 毒剂（需每 天新 鲜 配制）：缓 冲间 有效 氯 1 瓶；核心 区生 安柜内 75%乙醇、有 效氯 各 1 瓶，生 安柜 外 75%乙 醇、有效 氯 1 瓶。DB32/T 3762.7 2020 3 6.1.2 进入 P2 实 验室，检 查垃 圾 袋、纸 巾、Tip 头、冻存 管、冻存 盒、EP 管、封口 膜、标签 笔、一次性乳 胶手 套、核酸 提取 试剂数 量，不足 时应 及时 补充。6.1.3 在生安 柜内 铺一 次性 软吸 收垫；在垃 圾缸 内放 置垃 圾袋，倒少 量含 氯消 毒剂。6.2 负压 P2 实 验过 程中 6.2.1 应在生 安柜 内两 人同 时操 作。6.2.2 取出待 检样 本，在生 安柜 内打开 密封 袋，核对 送检 单，在 样本 管上 标记，注 明采样 地点、日 期、样本类 型等。若 管壁 外有 不明液 体，应用 有效 氯消 毒剂擦 拭。6.2.3 暂不检 测样 本放 转运 冻存 盒，预 留待 检测 样本 放置 位置。6.2.4 对于未 分装 拭子 样本 需进 行分装，分 装 于 2 mL 带螺旋盖内 有垫 圈冻 存管。所 有样本 旋紧 管盖后需用 封口 膜密 封。6.2.5 废弃 Tip 头 打入 含氯 消毒 剂的废 液缸 中，注意 需浸 入液体 中。6.2.6 将核酸 提取 试剂 槽样 本孔（第一 孔）中 的裂 解液 吸 出至 1.5mL EP 管中，每管 加入 2 0L 用于病毒 DNA/RNA 提取 的蛋 白 酶 K 和 200L 样本，在涡 旋器上 充分 振荡 混匀 后室 温孵 育 10min。6.2.7 将 EP 管 置于 离心 机中 短 暂 离心（12000rpm 10min），离心 完成 后 将 EP 管 中裂 解后的 样本 吸回至核 酸提 取试 剂槽 的样 本孔（第一 孔）中。6.2.8 将试剂 槽加 套管 置入 全自 动核酸 提取 仪中 进行 核酸 提取。6.2.9 剩余样 本旋 紧管 盖后 需用 封口膜 密封，放 入样 本转 运盒。6.2.10 取出提 取好 的核 酸，转 入 1.5 mL EP 管，注明 采样 地 点、日 期、样本 类型 等。6.2.11 将核酸 管放 入核 酸转 运盒，连同 样本 转运 盒进 行盒 内外消 毒后 转出 生安 柜。6.3 负压 P2 实 验结 束后 6.3.1 生安柜 内清 场：使 用后 的 核酸提 取条/板放 入垃 圾袋，包 扎垃 圾袋，含氯 消毒 剂 喷洒消 毒外 表面，将一次 性软 吸收 垫喷 洒含 氯消毒 剂后 折叠。手 消毒 后 将垃圾 袋和 一次 性软 吸收 垫一起 带出 生安 柜放 入 核心区中 号垃 圾袋。6.3.2 试管架，试 验台 面、移液 器等喷 洒含 氯消 毒剂 消毒 后用 75%乙 醇擦 拭。6.3.3 关闭生 安柜，开 启紫 外消 毒。6.3.4 消毒反 穿衣、脱 一次 性反 穿衣放 入中 号垃 圾袋，包 扎垃圾 袋。消毒 垃圾 袋外 表面、核酸 和样 本转运盒。6.3.5 退出核 心区，将 中号 垃圾 袋放入 缓冲 区大 号垃 圾袋 内。6.3.6 每日固 定时 间对 核心 区进 行过氧 化氢 终末 消毒，消 毒前应 以塑 料袋 覆盖 机器 如核酸 提取 仪、离心机等，记 录终 末消 毒记 录。6.3.7 在缓冲 区按 合理 程序 脱卸 个人防 护用 品。脱内 层手 套前开 启核 心间 紫外。6.3.8 出缓冲 区，将垃 圾袋 放入 高压灭 菌器 高压，并 记录。6.3.9 开启缓 冲区 紫外 消毒。6.3.10 将核酸 交核 酸检 测人 员。样本转 入病 毒样 本专 用专 人保管 冰箱。6.4 扩增体 系配 制 与 扩增 按照DB32/T 3762.3-2020第8章的 要求。6.5 结果判 定 按照DB32/T 3762.3-2020中9.3的 要求。DB32/T 3762.7 2020 4 7 评估 只要出 现2个 靶标和 单靶 标 阳性样 本，均 视为 空气环 境有新 冠病毒 污染，应进行 合理 通风与 消毒 等措施，并对 医疗 机构 的卫 生状况 进行 评估，提 出改 进措施。_