ICS 65.120 B 46 DB12 天津市 地 方 标 准 DB12/T 847 2018 饲料中总 糖的测定 分光光度 法 Animal feeding stuffs determination of total sugars Polarimetric method 2018-12-26 发布 2019-02-01 实施 天 津 市 市 场 监 督 管 理 委 员 会 发布 DB12/T 847 2018 I 前 言 本标准 按照GB/T 1.1-2009 给出的 规则 起草。本标准 由天 津市 农业 科学 院提出 并归 口。本标准 起草 单位：天 津市 农业质 量标 准与 检测 技术 研究所。本标准 主要 起草 人：张强、陈秋 生、王利 宾、刘烨 潼、殷 萍、孟兆 芳、张玺。DB12/T 847 2018 1 饲 料中总 糖的测定 分 光光度 法 1 范围 本标准 规定 了饲 料中 总糖 含量的 测定 方法、原 理、试剂和 材料、仪 器与 设备、分析 步骤、结 果 计 算与精密 度。本标准 适用 于饲 料及 其原 料中总 糖含 量的 测定。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日 期的引 用文 件，仅 注 日期 的 版本适 用于 本文 件。凡是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有 的修改 单）适用 于本 文件。GB/T 6682 分 析实 验室 用 水规格 和试 验方 法 GB/T 20195 动 物饲 料 试 样的制 备 3 原理 饲料中 水溶 性糖 和水 不溶 性多糖 经盐 酸溶 液水 解后 转化成 还原 糖，水解 物在 硫酸的 作用 下，生 成 物与芳香 族酚类 化合 物缩合 生成黄 色溶液，在490nm 处 有最大 吸收，在一 定范围 内其吸 光度值 同糖 的浓 度呈正比，以 此测 定糖 的含 量。4 试剂和 材料 4.1 实验用 水 指 标满 足 GB/T 6682 一 级标 准。4.2 浓盐酸，=1.18g/mL。4.3 浓硫酸，=1.84g/mL。4.4 苯酚溶 液（50g/L），称取 5g 苯酚，用 水定 容至100mL，摇匀 后避 光保 存。4.5 葡萄糖 标准 溶液（1g/L），将葡 萄糖 于105 恒温 烘 干至恒 重，准确 称 取 1.0000g，用 水溶 解后 加入5mL 盐酸，并 以水 定容 至 1000ml。5 仪器与 设备 5.1 可见分 光光 度计。5.2 电子天 平，感量 0.1mg。5.3 电子天 平，感量 0.01g。5.4 恒温水 浴锅。5.5 电热鼓 风干 燥箱。5.6 样品粉 碎设 备。5.7 实验室 常用 玻璃 器具。DB12/T 847 2018 2 6 分析步骤 6.1 采样与 试样 制备 按照GB/T 20195 的规 定执 行。6.2 试样前 处理 称取试 样约1g（精确 至0.01g）于250ml 锥 形瓶 中，加 入25ml 水，10ml 盐酸，振 荡摇匀 至形 成均 匀的悬浊液，装 上冷 凝回 流装 置，在 沸水 浴中 水解1h，冷却之 后过 滤，并洗 涤滤 渣，合 并滤 液及 洗液，最 后定容至250ml，摇匀 待用，此为待 测溶 液。6.3 标准系 列溶 液的 制备 分取0 mL、1mL、2mL、4mL、6mL、10mL 葡萄糖 标准 溶 液（4.4）分 别置于50mL 容 量瓶中，用水 稀释至刻度，摇 匀。此曲 线浓 度分别 为0g/mL、20g/mL、40g/mL、80 g/mL、120 g/mL、200g/mL。准 确吸 取上 述 标准溶液 各1mL（相 当于葡 萄糖含量 分别为0 g、20 g、40 g、80g、120g、200 g），加入10mL比 色管中，分 别加入 苯酚溶 液（4.3）各1mL，加入浓 硫酸（4.2）5mL，反应液 静止放 置10min 后，涡旋摇 匀，冷 却至 室温，选择波 长为490nm，以空 白 溶液调 零，测 定吸 光度。以葡萄 糖质量 浓度 为横 坐标，吸 光度 值为 纵坐 标，绘制标 准曲 线。6.4 测定 准确吸 取待 测溶 液（6.2）1ml于10mL 比色 管中，按6.3 步骤 自“加入 苯酚 溶液 各1ml”起进 行操作，至 冷却 至室 温后 测定。7 结果计 算 试样中 总糖 的含 量 按 式 进行计 算：601101000aVXmV.(1)式中：X 试样 中总 糖的 含量，单位为 克每 千克，g/kg；a 从标 准曲 线上 查得 葡 萄糖含 量，单位 为微 克，g；V0 试样 经前 处理 后定 容的体 积，单位 为毫 升，mL；V1 测定 时吸 取滤 液的 体积，单位 为毫 升，mL；m 试样 质量，单 位为 克，g。注：计算结果以葡萄糖计，表示到小数点后一位。8 精密度 应符合 以下 要求：总糖含 量50g/kg 时，在 重复性 条件 下获 得的两 次 独立测 定结 果的 绝对值 不 得超过 算术 平均值的 10；总糖含 量50g/kg 时，在重 复性条 件下 获得 的两 次独 立测定 结果 的绝 对值 不得 超过算 术平 均 值DB12/T 847 2018 3 的5。_