ICS 67 X 04 DB13 河北省 地 方 标 准 DB 13/T 5189.11 2020 天然植物 提取物中 危害成分 检测 第11 部分：叶黄素 中苯的测 定 2020-06-28 发布 2020-07-28 实施 河 北 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB13/T 5189.11 2020 I 前 言 本标准 按照GB/T 1.1-2009 给出的 规则 起草。DB13/T 5189 天然 植物 提 取物中 危害 成分 的测 定 共分12 个部 分：第1 部 分：亚硝 酸盐 的测 定；第2 部 分：二氧 化硫 的测 定；第3 部 分：正己 烷、丙酮、乙酸 乙酯、甲 醇和 乙 醇5 种有 机溶 剂残 留的 测定；第4 部 分：辣椒 提取 物中 砷、铅、镉、铬、汞 的测 定；第5 部 分：万寿 菊提 取物 中对氧 基苯 胺的 测定；第6 部 分：万寿 菊提 取物 中乙氧 基喹 啉的 测定；第7 部 分：天然 番茄 红中 苯并 芘 的测 定；第8 部 分：辣椒 提取 物中 苏丹红 的测 定；第9 部 分：辣椒 提取 物中 叔丁基 对苯 二酚 的测 定；第10 部分：辣 椒红 中赭 曲 霉毒 素 A 的 测定；第11 部分：叶 黄素 中苯 的 测定；第12 部分：甜 菊糖 苷中 邻 苯二甲 酸酯 的测 定。本部分 为DB13/T 5189的 第11部分。本标准 由河 北省 市 场 监督 管理局 提出 并归 口。本标准 起草 单位：晨 光生 物科技 集团 股份 有限 公司、河北 省食 品检 验研 究院、石家 庄海 关技 术 中心、清 河食 品药 品检 验所。本标准 主要 起草 人：程远 欣、石 文杰、张 兰天、栗 星、王 婷、艾连 峰、王如 景。DB13/T 5189.11 2020 1 天 然植物 提取物中 危害成 分检测 第 11 部分：叶黄素 中苯的 测定 1 范围 本部分 规定 了叶 黄素 中苯 的气相 色谱-串 联质 谱测 定 方法。本部分 适用 于叶 黄素 中苯 的测定。2 规范性 引用 文件 下列文 件 对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 注日 期的版 本 适 用于 本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有修 改单）适 用于 本文件。GB/T 6682 分 析实 验室 用 水规格 和试 验方 法。3 原理 试样溶 解于DMF 溶剂 后，采 用顶空 进样 器进 样，用气 相色谱-串 联质 谱检 测器 检 测，根 据色 谱峰 的保留时 间及 定性 离子 对定 性，定 量离 子对 定量。4 试剂和 材料 4.1 试剂 N,N-二 甲基 甲酰 胺（DMF）（C3H7NO）：色 谱纯。4.2 标准品 苯（C6H6，CAS：71-43-2）：纯度 大于99.0%，或具 有 标准物 质证 书。4.3 标准溶 液配 制 4.3.1 苯标准 储备 溶液（1000 mg/L）：称取 苯100 mg（精 确至0.01 mg），用DMF 定容 至100 mL，摇匀，4 避光 保存，有 效期 6 个月。4.3.2 苯标准 中间 工作 溶液（10 mg/L）：准 确量 取 1000 mg/L 苯 标准 储备 液 1 mL，于 100 mL 容量瓶中，用 DMF 定 容，4 避光保 存，有效 期3 个月。4.3.3 苯标准 系列 溶液：分 别量 取 DMF6 mL 于 20 mL 顶 空 瓶中，再移 取0.01 mL、0.03 mL、0.05 mL、0.1 mL、0.2 mL 中 间工 作 液（10 mg/L）至 20 mL 顶 空瓶，涡旋 混匀，上 机测 试，同 时做 标曲 空白，现配现 用。5 仪器和 设备 DB13/T 5189.11 2020 2 5.1 气相色 谱-质谱 联用 仪：配 顶空自 动进 样器 和 EI 离 子 源。5.2 电子天 平：感量 为 0.1 mg 和0.01 mg。5.3 超声波 清洗 器。6 分析步 骤 6.1 试样制 备 称取样 品0.1 g（精 确至0.1 mg）于顶 空瓶 中，加入6 mL DMF 溶 液，超声，摇 匀，待测。6.2 气相色 谱-质谱 条件 6.2.1 气相色 谱条 件 气相色 谱条 件如 下：a)色谱柱：HP-5MS 石 英毛 细 管柱，长 度30 m，内径0.25 mm，膜 厚 0.25 m，或 性能相 当者；b)进样口 温度：200；c)程序升 温：初始 柱温40，保持3 min，以 10/min 升温 至60，保 持1 min，再 以45/min 升温至190，保持2 min；d)载气：氦气（纯 度 99.999%），流速1.0 mL/min；e)进样量：1 mL；f)进样方 式：分流 进样 g)分流比：50:1。6.2.2 自动进 样器 条件 自动进 样器 条件 如下：a)温度：加热 箱 82，定 量环100，传输 线 105；b)时间：GC 循环 时间15 min，样 品平 衡时 间 60 min，压 力平衡 时 间 0.1 min，进 样 时间0.5 min；c)样品瓶：摇 动 3 次；d)载气：氮气。6.2.3 质谱条 件 质谱条 件如 下：a)色谱与 质谱 接口 温度：200；b)离子源 温度：230；c)离子源 类型：电 子轰 击离 子源（EI）；d)碰撞室 气体：氮 气（纯度 99.999%）；e)电离能 量：70 eV；f)监测方 式：选择 离子 监测 模式（SIM）保 留时 间及 监 测离子 对见 下表。化合物名称 特征离子 定量离子 苯 78、77、51 78 6.3 测定 DB13/T 5189.11 2020 3 6.3.1 定性 在 仪 器条 件下，试 样待 测液 和 标准 品的 选择 离子 色谱 峰 在相 同保 留时 间处（0.5%）出 现，并且对应质 谱碎 片离 子的 质荷 比与标 准品 一致，其 丰度 比与标 准品 相比 符合：相 对丰度 50%时，允 许20%的偏差；相 对丰 度20%50%时，允 许25%的 偏差；相 对丰度10%20%时，允 许30%的 偏差；相对 丰度10%时，允许50%的偏 差。满足 上述 条件 时可 定性 确证目 标分 析物。苯 标准 溶液总 离子 流色 谱图 见附录A。6.3.2 定量 将得到 的定 量离 子峰 面积 代入式（1），得 到待 测试 液中苯 的浓 度。样品 溶液 中待测 物的 响应 值 均应在标 准工 作曲 线的 线性 范围内，若 超出 线性 范围，则应 用DMF 稀 释到 线性 范 围所包 含的 浓度。7 试验结 果 试样中 苯含 量按 式（1）计 算。mVX（1）式中：X试 样中 苯的 含量，单 位 为毫克 每千 克（mg/kg）；从标 准 工作 曲线 上查 出 的试样 溶液 中苯 的质 量浓 度，单 位为 微克 每毫 升（g/mL）；V样 液最 终定 容体 积，单 位为毫 升（mL）；m试 样质 量，单位 为克（g）。计算结 果以 重复 性条 件下 获得的 两次 独立 测定 结果 的算术 平均 值表 示，保留 至小数 点后 一位。8 精密度 在重复 性条 件下 获得 的两 次独立 测试 结果 的绝 对差 值不得 超过 算术 平均 值的10%。9 检出限 和定 量限 检出限 为0.1 mg/kg，定 量 限为0.3 mg/kg。DB13/T 5189.11 2020 4 A A 附 录 A（资料 性附 录）苯标准 溶液 总离 子流 色谱 图 A.1 苯标准 溶液 总离 子流 色谱 图，如 图A.1 所示。图 A.1 苯 标准 溶液 总离 子 流色谱 图 苯