ICS 67 X 04 DB13 河北省地方标准 DB 13/T 5189.1 2020 天然植物 提取物中 危害成分 检测 第1 部分：亚硝酸 盐的测定 2020-06-28 发布 2020-07-28 实施 河 北 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB13/T 5189.1 2020 I 前 言 本标准 按照GB/T 1.1-2009 给出的 规则 起草。DB13/T 5189 天然 植物 提 取物中 危害 成分 的测 定 共分12 个部 分：第1 部 分：亚硝 酸盐 的测 定；第2 部 分：二氧 化硫 的测 定；第3 部 分：正己 烷、丙酮、乙酸 乙酯、甲 醇和 乙 醇5 种有 机溶 剂残 留的 测定；第4 部 分：辣椒 提取 物中 砷、铅、镉、铬、汞 的测 定；第5 部 分：万寿 菊提 取物 中对氧 基苯 胺的 测定；第6 部 分：万寿 菊提 取物 中乙氧 基喹 啉的 测定；第7 部 分：天然 番茄 红中 苯并 芘 的测 定；第8 部 分：辣椒 提取 物中 苏丹红 的测 定；第9 部 分：辣椒 提取 物中 叔丁基 对苯 二酚 的测 定；第10 部分：辣 椒红 中赭 曲 霉毒 素 A 的 测定；第11 部分：叶 黄素 中苯 的 测定；第12 部分：甜 菊糖 苷中 邻 苯二甲 酸酯 的测 定。本部分 为DB13/T 5189的 第1部分。本标 准 由河 北省 市场 监督 管理局 提出。本部分 起草 单位：河 北省 食品检 验研 究院、晨 光生 物科技 集团 股份 有限 公司、石家 庄海 关技 术 中心、清 河县 食品 药品 检验 检测中 心。本部分 主要 起草 人：史国 华、郭 美娟、杨 清山、张 兰天、田丽 娜、艾连 峰、马新颜。DB13/T 5189.1 2020 1 天 然植物 提取物中 危害成 分检测 第1 部分：亚硝酸 盐的测 定 1 范围 本部分 规定 了天 然植 物提 取物中 亚硝 酸盐 的测 定方 法。本部分 适用 于天 然植 物提 取物中 亚硝 酸盐 的测 定。2 规范性 引用 文件 下列文 件 对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 注日 期的版 本 适 用于 本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有修 改单）适 用于 本文件。GB/T 6682 分 析实 验室 用 水规格 和试 验方 法。3 原理 亚硝酸 盐采 用盐 酸萘 乙二 胺法测 定。试样 经沉 淀蛋 白质、除去 脂肪 后，在弱 酸条件 下，亚硝 酸 盐与对氨基苯磺酸重氮 化后，再与盐酸萘乙二胺 偶合形成紫红色染料，采 用紫外分光光度法，在538 nm处测吸 光度，外 标法 测得 亚硝酸 盐含 量。4 试剂或 材料 除非另 有说 明，本方 法所 用试剂 均为 分析 纯，水为GB/T 6682 规 定的 三级 水。4.1 试剂 4.1.1 亚铁氰 化钾K4Fe（CN）6 3H2O。4.1.2 乙酸锌Zn（CH3COO）2 2 H2O。4.1.3 硼 酸钠（Na2B4O7 10H2O）。4.1.4 盐酸（HCl，=1.19 g/mL）。4.1.5 对氨基 苯磺 酸（C6H7NO3S）。4.1.6 盐酸萘 乙二 胺（C12H14N2 2 HCl）。4.2 试剂配 制 4.2.1 亚铁氰 化钾 溶液（106 g/L）：称 取106.0 g 亚 铁氰 化钾，用水 溶解，并 稀释 至 1000 mL。4.2.2 乙酸锌 溶液（220 g/L）：称取 220.0 g 乙 酸锌，先 加 30 mL 冰 乙酸 溶解，用 水 稀释 至 1000 mL。4.2.3 饱和硼 砂溶 液（50 g/L）：称取 5.0 g 硼酸 钠，溶 于 100 mL 热水 中，冷却 后 备用。4.2.4 盐酸（20%）：量 取 20 mL 盐酸，用 水稀 释至100 mL。DB13/T 5189.1 2020 2 4.2.5 对氨基 苯磺 酸溶 液（4 g/L）：称 取0.4 g 对氨 基苯 磺酸，溶 于100 mL 20%盐 酸中，混匀，置棕色瓶 中，避光 保存。4.2.6 盐酸萘 乙二 胺溶 液（2 g/L）：称 取0.2 g 盐 酸萘 乙 二胺，溶 于100 mL 水 中，混匀，置棕 色瓶中，避 光保 存。4.3 标准品 4.3.1 亚硝酸 钠（NaNO2，CAS 号：7632-00-0）：基准试 剂，或 采用 具有 标准 物质 证 书的亚 硝酸 盐标准溶液。4.4 标准溶 液配 制 4.4.1 亚硝酸 钠标 准溶 液（200 g/mL，以 亚硝 酸钠 计）：称 取 0.1 g（精确 到 0.1 mg）于 110 120 干燥 恒重 的亚 硝酸 钠，加水 溶解，移 入500 mL 容量瓶 中，加水 稀释 至刻 度，混 匀。4.4.2 亚硝酸 钠标 准使 用液（5.0 g/mL）：临用 前，吸 取5.50 mL 亚 硝酸 钠标 准溶 液，置 于 100 mL容量瓶 中，加水 稀释 至刻 度。5 仪器和 设备 5.1 天平：感量 为1 mg 和0.1 mg。5.2 恒温干 燥箱。5.3 分光光 度计。6 试验步 骤 6.1 试样提 取 称取均 匀样 品5 g（精确 至0.001 g），置 于250 mL 具 塞锥形 瓶中，加15.5 mL 50 g/L 饱 和硼 砂溶 液，加入70 左 右的 水约150 mL，混匀，于 沸水 浴中 加热15 min，取 出置冷 水浴 中冷 却，并 放置 至室 温。将上述提 取液 全部 转移 至200 mL 容 量瓶 中，加入5 mL106 g/L 亚 铁氰 化钾 溶液，摇 匀，再 加入5 mL 220 g/L乙酸锌溶液，以沉淀 蛋白质。加水至刻度，摇 匀，放置30 min，除去上 层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初 滤液30 mL，滤液 备 用。6.2 测定 吸取40.0 mL 上述 滤液 于50 mL 带塞 比色 管中，另 吸取0.00 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80 mL、1.00 mL、1.50 mL、5.00 mL、5.50 mL 亚 硝酸 钠标 准使用 液（相当 于0.0 g、1.0 g、5.0 g、4.0 g、4.0 g、5.0 g、7.5 g、10.0 g、15.5 g 亚 硝 酸钠），分 别置 于50 mL 带 塞比色 管中。于标 准管与试样 管中 分别 加入2 mL 4 g/L对 氨基 苯磺 酸溶 液，混匀，静置3 min 5 min 后 各加入1 mL 2 g/L 盐酸 萘乙二胺 溶液，加 水至 刻度，混匀，静置15 min，用1 cm比色 皿，以零 管调 节零 点，于 波长538 nm 处测 吸光度，绘制 标准 曲线 比较。同时 做试 剂空 白。7 试验结 果 DB13/T 5189.1 2020 3 试样中 亚硝 酸盐（以 亚硝 酸钠计）的 含量 按式（1）计算。10001000011 VVmmX（1）式中：X-试样 中的 亚硝 酸盐 的含 量，单 位为 毫克 每千 克（mg/kg）；1m-测定 用样 液中 亚硝 酸钠 的质量，单 位为 毫克（g）；1000-转化 系数；m-试样 质量，单 位为 克（g）；1V-测定 用样 液体 积，单位 为毫升（mL）；0V-试样 处理 液总 体积，单 位为毫 升（mL）。计算结 果保 留两 位有 效数 字。8 精密度 在重复 性条 件下 获得 的两 次独立 测试 结果 的绝 对差 值不得 超过 算术 平均 值的10%。9 检出限 和定 量限 检出限 为0.5 mg/kg，定 量 限为1.5 mg/kg。_