ICS 13.060 C 51 DB37 山东省地方标准 DB37/T 4159 2020 水质 苦 味酸的测 定 液相色谱-串联质谱 法 Water quality Determination of trinitrophenol Liquid chromatography-Tandem mass spectrometry 2020-09-25 发布 2020-10-25 实施 山 东 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB37/T 4159 2020 I 目 次 前言.II 1 范 围.1 2 规 范性 引用 文件.1 3 方 法原 理.1 4 试 剂和 材料.1 5 仪 器和 设备.2 6 样品.2 7 分 析步 骤.2 8 结 果计 算与 表示.3 9 精 密度 与准 确度.4 10 质 量保 证和 质量 控制.4 DB37/T 4159 2020 II 前 言 本标准 按照GB/T 1.1 2009 给出 的规 则起 草。本标准 由山 东省 住房 和城 乡建设 厅提 出并 组织 实施。本标准 由山 东省 城镇 给水 排水标 准化 技术 委员 会归 口。本标准 起草 单位：山东 省 城市供 排水 水质 监测 中心、山 东珞 珈计 量检 测有 限 公司、济 南市 疾病 预防控制中 心、国 家城 市供 水 水质监 测网 青岛 监测 站、山东省 分析 测试 中心、中 国兵器 工业 集团 第五 三研 究所。本标准 主要 起草 人：孙韶 华、贾 瑞宝、王 明泉、赵 清华、辛晓 东、宋艳、刘 莉、刘 仲、王晓 芳、赵汝松、高岩 立、冀克 俭、王晓利、梁 玉、刘岚 铮。DB37/T 4159 2020 1 水质 苦 味酸的测 定 液 相色谱-串 联质谱 法 警告：实 验中 使用 的溶 剂 和试剂 均具 有一 定的 毒性，对 健康 具有 潜在 的危 害，应 尽量 避免 与这 些化学品的 直接接 触。样品制 备过程 应在通 风橱 中进行，操作 时应按 规定 要求佩 戴防护 器具,避免接 触皮 肤和衣物。1 范围 本标准 规定 了测 定生 活饮 用水及 其水 源水 中苦 味酸 的液相 色谱-串 联质 谱法。本标准 适用 于生 活饮 用水 及其水 源水 中苦 味酸 的测 定。进样量10 L时，本 标准 的方法 检出 限为1 g/L，测定下 限为4 g/L。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 5750.2 2006 生 活 饮用水 标准 检验 方法 水 样的采 集与 保存 GB/T 5750.3 2006 生 活 饮用水 标准 检验 方 法 水 质分析 质量 控制 GB/T 32465 化 学分 析方 法验证 确认 和内 部质 量控 制要求 GB/T 33087 仪 器分 析用 高纯水 规格 及试 验方 法 HJ/T 91 地表 水和 污水 监 测技术 规范 HJ/T 164 地下 水环 境监 测技术 规范 3 方法原 理 样品经0.22 m 针头 过滤 器过滤 后直 接进 样，经液 相色谱 仪分 离后 进入 串联 质谱仪，采 用多 反应 监测（MRM）模式，根 据保 留 时间和 特征 离子 峰进 行定 性分析，外 标法 定量 分析。4 试剂 和 材料 4.1 载气：高纯 氮，纯度 99.999%。4.2 高纯水：水 质应 满 足 GB/T 33087 的 规定。4.3 甲醇：色谱 纯。4.4 苦味酸 标准 溶液：=100 mg/L，溶剂 为甲 醇，有证 标 准物质。4.5 一次性 针头 过滤 器：0.22 m，聚四 氟乙 烯（PTFE）材 质。4.6 一次性 注射 器：2.5 mL。4.7 标准 贮 备液 的制 备：=10.0 mg/L。取 1.00 mL 苦味 酸标准 溶液（4.4），用高 纯水（4.2）稀释 并定容 至10 mL，配制10.0 mg/L 苦 味酸 标准 贮备 液。于 4 以下 冷藏 密封 避光 保存。DB37/T 4159 2020 2 4.8 标准使 用液 的制 备：=1.00 mg/L。取1.00 mL 苦味 酸贮备 液（4.7），用 高纯 水（4.2）稀 释并 定容至 10 mL，配 制1.00 mg/L 苦味 酸标 准使 用液。于4 以 下冷 藏密 封避 光保 存。5 仪器和 设备 5.1 液相色 谱-串联 质谱 仪：配 有电喷 雾离 子源。5.2 色谱柱：C18 色 谱柱（3.5 m，2.1 mm 100 mm）或 其他性 能等 效的 色谱 柱。5.3 样品瓶：玻 璃瓶，2 mL。5.4 容量瓶：10 mL。5.5 采样瓶：棕 色玻 璃瓶，具 有玻璃 塞。5.6 微量注 射器：100 L 和1 000 L。6 样品 6.1 样品 的 采集 和保存 按照HJ/T 91 和HJ/T 164 的 相关规 定采 集样 品。用采 样瓶（5.5）采 集样 品。按照GB/T 5750.2 2006 的 相关规 定保 存样 品。样品 采集后 在4 以 下冷 藏保 存，24 h内 完成 水样 过滤处理 并上 机测 试。若水 样中存 在残 留氯，加 入抗 坏血酸 去除 余氯。6.2 试样制 备 将水样 经一次 性针 头过滤 器（4.5）过 滤后，置于 进 样瓶中，待测。如 水样浓 度较高 或基体 复杂，可将样 品适 当稀 释后，再 经过一 次性 针头 过滤 器过 滤。6.3 空白试 样制 备 用高纯 水（4.2）代 替样 品，按照 与试 样制 备（6.2）相同的 步骤 制备 空白 试样。7 分析步 骤 7.1 色谱 分 析条 件 7.1.1 流 动相：A 相 高 纯水（4.2），B 相 甲醇（4.3），A:B=10:90（V:V），等度 洗脱。7.1.2 流速：0.25 mL/min。7.1.3 柱温：30。7.1.4 进样 体 积：10 L。7.2 质谱分 析条 件 7.2.1 离子源：电 喷雾 离子 源，负离子 模式。7.2.2 离子源 温度：350。7.2.3 扫描方 式：MRM，多 反应 监 测条件 见 表 1。DB37/T 4159 2020 3 表1 苦味酸的 ESI-MS/MS 质量 条件参 数 中文名 母离子 m/z 子离子 m/z 碎裂电压 V 碰撞能 V 苦味酸 228 197.9 109 8 181.9 109 12 7.3 校准曲 线的 绘制 7.3.1 本方法 使用 外标 法定 量。7.3.2 校准系 列的 配制：取 6 个10 mL 容量 瓶，用微 量注 射 器（5.6）依次 准确 加入40 L、100 L、150 L、200 L、250 L、500 L 标准 使用 液（4.8），用高 纯水（4.2）定 容至刻 度，配制 浓度 分别为4 g/L、10 g/L、15 g/L、20 g/L、25 g/L、50 g/L 校 准系 列，现用 现配。7.3.3 按照质 量浓 度从 低到 高依 次进样，以 校准 系列 溶液 中目标 组分 的质 量浓 度为 横坐标，以 峰面 积为纵坐 标，绘制 校准 曲线。7.4 试样测定 7.4.1 采用自 动进 样器，进 样量 为 10 L。7.4.2 按照与 校准 曲线 的绘制（7.3）相 同的 步骤 进行 试样（6.2）的 测定。7.4.3 苦味 酸 MRM 色谱 图见 图 1。图1 苦味 酸MRM 色谱 图 7.5 空白试 验 按照与 试 样 测定（7.4）相 同的步 骤进 行空 白试 样（6.3）的 测定。8 结果计 算与 表示 8.1 定性结 果 根据苦 味酸MRM 色谱 图中 的 保留时 间和 特征 离子 对进 行定性 分析。8.2 定量结 果 DB37/T 4159 2020 4 根据样 品中 目标 物定 量离 子对的 峰面 积，外标 法定 量。苦 味酸 的定 量离 子对 为228 181.9。8.3 结果计 算 水样中 目标 化合 物的 质量 浓度计 算见 式（1）：=Abk.(1)式中：水样 中目 标 化 合物 的 质量 浓度（g/L）；A 水样 中目 标化 合物 对应的 峰面 积；k 校准 曲线 的斜 率；b 校准 曲线 的截 距。测定结 果位 数的 保留 与测 定下限 一致，最 多保 留三 位有效 数字。9 精密度 与准 确度 9.1 精密度 4家实验 室分别 测定 浓度为4 g/L、30 g/L、50 g/L的样 品，实验室 内相 对 标准偏 差为0.8%4.5%；实验 室间相 对标 准 偏差分 别为6.8%、7.0%和5.5%；重复 性限为0.35 g/L、1.3 g/L 和2.1 g/L；再现 性限 为0.86 g/L、7.0 g/L 和8.7 g/L。9.2 准确度 4家实 验室 分别 测定 地表 水、地下 水、出厂水 及管 网水 加标样 品。加标 浓度 分别 为4 g/L、30 g/L、50 g/L 时，加 标回 收率 分别为80.9%107%、93.0%101%、88.7%97.7%。10 质量保 证和 质量 控制 10.1 空白试 验 每批次 样品 应做 空白 试验，测定 结果 不能 超过 方法 的 检出 限。10.2 校准曲 线要 求 分析样品 之前应建立能够覆盖样品 浓度范围的至少6个浓度点 的校准曲线，曲线的相关 系数r2应大于0.995。10.3 平行样 平行双 样测 定结 果的 相对 偏差满 足GB/T 5750.3 2006 的要 求。10.4 基体加 标 基体加 标样 品的 加标 回收 率范围 满足GB/T 32465 的 要求。_