ICS 65.020.30 B 43 DB5107 四 川 省（绵 阳 市）地 方 标 准 DB5107/T 58 2018 养鸡场鸡 白痢净化 技术规范 2018-12-18 发布 2019-03-01 实施 绵 阳 市 质 量 技 术 监 督 局 发布 DB5107/T 58 2018 I 目 次 前言.III 1 范围.1 2 规 范性 引用 文件.1 3 术 语和 定义.1 4 材 料准 备.2 4.1 器械 设备.2 4.2 试剂.2 4.3 诊断 试剂.2 5 鸡 群净 化.2 5.1 净化 流程.2 5.2 初筛.3 5.3 操作 方法.3 5.4 结果 判定.3 5.5 阳性 鸡处 理.3 5.6 确诊.3 5.7 污染 区处 理.3 6 卫 生防 疫.3 6.1 选址.3 6.2 消毒 池.3 6.3 生产 区入 口消 毒.4 6.4 鸡舍 消毒.4 6.5 防疫 管理.4 6.6 注意 事项.4 7 消毒.4 7.1 圈舍 消毒.4 7.2 种蛋 消毒.4 7.3 设备 器具 消毒.4 7.4 饮水 消毒.4 8 净 化标 准.5 8.1 标准.5 8.2 抽检.5 附录A（规 范性 附录）鸡白痢 沙门 氏菌 引物 序列 表.5 DB5107/T 58 2018 II 附录 B（资 料性 附录）养鸡场 鸡白 痢净 化工 作记 录 表.6 DB5107/T 58 2018 III 前 言 本标准 按GB/T 1.1-2009 标准化 工作 导则 第1 部份：标准 的结 构和 编写 给 出的规 则起 草。本标准 由绵 阳市 农业 局提 出并归 口。本标准 主要 起草 单位：绵 阳市农 业科 学研 究院 本标准 主要 起草 人员：王 育伟、肖龙、李 廷见、张 晓晖、周爱 民、王强、李 波、刘 亚东、赖 爽、刘卜玮、王鑫。DB5107/T 58 2018 1 养 鸡场 鸡 白痢净化 技术规 范 1 范围 本标准 规定 了养 鸡场 鸡白 痢净化 的技 术术 语、技术 要求、材料 准备、鸡 群净 化、卫 生防 疫、消毒 和净化标 准的 要求。本标准 适用 于绵 阳市 行政 辖区内 养鸡 场鸡 群的 鸡白 痢净化。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日 期的引 用文 件，仅注 日期 的 版本适 用于 本文 件。凡是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有 的修改 单）适用 于本 文件。NY/T 2838 禽沙 门氏 菌病 诊断技 术 NY 5027 无公 害食 品畜 禽 饮用水 水质 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。3.1 鸡白痢 pullorum disease 由鸡白 痢沙 门氏 杆菌 引起 鸡的一 种常 见的 垂直 传播 性传染 病。3.2 肉鸡 broiler chicken 是指饲 养用 来 专 门生 产鸡 肉的鸡。3.3 蛋鸡 laying hens 是指专 门饲 养用 来生 产和 供应鸡 蛋的 鸡。3.4 种鸡 breeding bird 种鸡是 专门 用于 繁殖 生产 下一代 仔鸡 的鸡。3.5 种蛋 hatching egg DB5107/T 58 2018 2 用以繁 殖后 代的 鸡卵。3.6 全进全 出 all-in and all-out system 将同一 生产 单元 内的 所有 鸡群同 时转 进转 出，并对 鸡舍进 行清 洗、消毒 的生 产模式。3.7 净道 non-pollution road 运送饲 料、雏鸡、种 蛋等 清洁生 产资 料和 人员 进出 的道路。3.8 污道 pollution road 运送粪 便、病死 及淘 汰鸡、养殖 废弃 物等 污染 物品 的道路。3.9 净化 eradication 对某病 发病 地区 采取 一系 列措施，达 到消 灭和 清除 传染源 的目 的。3.10 焚尸炉 cremator 是专门 用于 焚化 病死 畜禽 尸体和 污染 物品 的设 备。4 材料准 备 4.1 器械设备 脚环、微量移 液器、采血 针、采 血管、显微 镜、超 净台、PCR 扩 增仪、电泳 仪、凝胶 成像系 统、水浴 锅和 冰箱 等。4.2 试剂 甲醛、高锰 酸钾、氢 氧化 钠、75%酒 精、戊二 醛消 毒 液，MgCl2、季 铵盐 消毒 液。4.3 诊断试 剂 鸡白痢 鸡伤 寒多 价凝 集抗 原、标准 阳性 血清、标准 阴 性血清、DNA 分子 量标 准品、电 泳缓 冲液（TEB）、taq DNA 聚 合酶、PCR 引物、DNA 提取 试剂 盒等。5 鸡群净 化 5.1 净化流 程 DB5107/T 58 2018 3 雏鸡最 早在3 15日 龄通过 腹泻、糊肛等 典型 白痢症 状进行 筛查，具备 典型症 状的雏 鸡在焚 尸炉 内焚烧处 理。5.2 初筛 5.2.1 在40 60 日龄 根据 典型 症 状和血 清平 板凝 集试 验进 行全群 鸡白 痢检 查。5.2.2 在100 120 日 龄利 用血 清 平板凝 集试 验进 行第 二次 全群鸡 白痢 检查，在130 150 日龄 再次 进行普检。5.2.3 鸡群在 检疫 有鸡 白痢 阳性 或可疑 鸡时，利 用PCR 方 法进行 确诊。5.2.4 若连续 两次 检疫 均为 鸡白 痢阴性 后，再隔1 个 月按 全群 的 1%抽检 一次，抽检 时若出 现鸡 白痢 阳性鸡，则全 群普 检。5.2.5 若无阳 性，则每 半年 按鸡 群的 1%进 行全 群抽 检。5.2.6 检出的 鸡白 痢阳 性鸡 一律 淘汰，病死 禽及 废弃 物品 根据 农 医发2017 25 号 病死 及病 害动 物无害化 处理 技术 规范 进 行无害 化处 理，对环 境和 笼具等 进行 彻底 消毒。5.3 操作方 法 5.3.1 将整群 鸡佩 戴脚 号，用采 血管进 行翅 静脉 采血 后静 置或者 离心 后获 得血 清，脚号与 采血 管条 形码对应 好。5.3.2 用微量 移液 器吸 取鸡 白痢、鸡伤 寒多 价凝 集抗 原0.03 mL，滴 在玻 璃板 上，同 时设置 阴性、阳性对照。5.3.3 以微量 移液 器吸 取0.03 mL 血清 滴于 抗原 上，将其 混合涂 成直 径2 cm 为宜。5.4 结果判 定 在2 min（室温）内观 察凝 集情况，抗 原与 血清 的混 合物呈 花斑 状但 背景 清晰，判定 为阳 性（+）；出现少 量的 凝集 片，背景 略清晰，为 可疑（+）；混 合物均 匀一 致，不出 现凝 集碎片，为 阴性（-）。5.5 阳性鸡 处理 发现血 清平 板凝 集试 验阳 性鸡 应 立即 扑杀，在 焚 尸 炉内进 行焚 烧处 理。5.6 确诊 采集可 疑鸡 泄殖 腔拭 子进 行鸡白 痢沙 门氏 菌PCR 扩 增，方 法 符合NY/T 2838 中禽 沙门氏 菌病 诊断 技术要求，引物 序列 表见 附录A。5.7 污染区 处理 阳性鸡 养殖 污染 区域 应及 时进行 严格 消毒，应 做重 点抽检 区域，净 化记 录表 参照附 录B。6 卫生防 疫 6.1 选址 养殖场 选址 应当 符合 建在 隔离条 件好、交 通便 利、远 离养殖 场 和 污染 源 的 区域；布局应 当科 学合 理，生产区 应当 和生 活区、办 公区严 格分 开。6.2 消毒池 DB5107/T 58 2018 4 养鸡场 大门 口应 设消 毒池，定期 清洗 消毒 池并 更换 消毒液。6.3 生产区 入口 消毒 生产区 入口 应当 设 立 消毒 间、更 衣室 和淋 浴室，更 衣室应 配备 紫外 消毒，定 期 更换 消毒 液。6.4 鸡舍消 毒 各鸡舍 门口 应铺 设消 毒 垫，撒布2%的 碱性 戊二 醛溶 液，孵 化厅 和种蛋 室 等区 域 应设 置紫 外消 毒 灯。6.5 防疫管 理 严格控 制生 产区 内人 员流 动，非生 产人 员不 得进 入 生产区，工作 人员 进入 鸡 舍前要 经过 淋浴、更换工作服、鞋、帽 和紫 外线 消毒。工作 服每 周至 少洗 涤两次 以保 持清 洁，定期 对更衣 室衣 物进 行紫 外 线 照射消毒。各 鸡舍 所有 设备、生产 工具 及工 作服 等仅 限本舍 使用，不 得交 叉使 用。6.6 注意事 项 6.6.1 饮用水 质应 符 合NY 5027 的要求，饮 水箱 与饮 水管 应经常 清洗，避 免鸡 白痢 沙门氏 菌滋 生。6.6.2 禁止使 用受 鸡白 痢 沙 门氏 菌污染 的 饲 料及 原料。6.6.3 饲料库 房要 坚固、干 燥和 密闭，禁止 鼠类、猫 和蚊 蝇等传 播疫 病。6.6.4 鸡场院 内所 有空 场、道路、门口 等区 域每 周至 少 用2%烧碱 喷洒 消毒 一次。6.6.5 鸡舍必 须每 天清 扫鸡 粪，将 其堆 放在 远离 养殖 场的 固定区 域发 酵和 无害 化处 理。6.6.6 场区内 净道 和污 道分 开，互不交 叉，污道 定期 进行 消毒。6.6.7 运输工 具和 器具 要定 期进 行清洗 和消 毒。6.6.8 引进的 种鸡、种 蛋或 鸡苗 均应来 自鸡 白痢 净化 的养 鸡场，引入 后应 全部 隔离 并建议 合格 后方 可进入。6.6.9 养殖场 所有 出场 的养 殖废 弃物与 污水 均应 当进 行严 格的无 害化 处理。7 消毒 7.1 圈舍消 毒 圈舍消 毒鸡 淘汰 后建 议先 彻底清 除圈 舍内 的粪 便，然后用 高压 清水 按“顶棚 墙壁 鸡笼 水食 槽 地面”的 顺序 冲洗 干净，再用0.2%戊 二醛 溶液 对顶 棚、墙 壁高 密度 消毒，水 食 槽用无 腐蚀 消毒 液擦 洗，地面喷 洒2%的氢 氧化 钠溶 液。圈舍 所有 物品、笼具 安装好 后，每 立方 米按38%甲醛溶 液42 mL、高 锰酸 钾21 g、水21 mL 的比 例封 闭 熏蒸3 h 以 上并 空圈 半月 以 上，经 检测 无鸡 白痢 沙门 氏菌后 方可 进鸡。7.2 种蛋消 毒 种蛋消 毒 当 天收 集的 种蛋 摆放在 熏蒸 箱内 消毒，每 立方米 按38%甲 醛溶 液14 mL、高 锰酸 钾7 g、水7 mL 的 比例 熏蒸20 min。7.3 设备器 具消 毒 孵化箱、笼具、出 雏筐、食 槽等表 面使 用2%戊二 醛溶 液喷洒 消毒，然后 每立 方米 按38%甲醛 溶 液28 mL、高锰酸 钾14 g、水14 mL 的 比例熏 蒸30 min。7.4 饮水消 毒 DB5107/T 58 2018 5 饮用水 应当 过滤 后使 用，可以定 期用0.1%的高 锰酸 钾溶液 消毒，储水 池、管 道和水箱 应 当经 常清 洗消毒。8 净化标 准 8.1 标准 鸡群连 续两 次（两次 间隔 不少于21 d）抽 检，鸡白 痢 阳性率 均在0.1%以下（包 括0.1%），该鸡 群为鸡白痢 净化 鸡群。8.2 抽检 鸡群鸡 白痢 净化 是个 动态 变化过 程，达到 净化 标准 后 应当 持续 进行 净化 抽检 和卫生 防疫。DB5107/T 58 2018 6 附 录 A（规范 性附 录）鸡白痢 沙门 氏菌 引物 序列 表 表A.1 鸡 白痢 沙门 氏菌 引 物序列 表 基因 引 物名称 引 物序列 目 的片段大 小 Hut hut-F 5-atgttgtcctgcccctggtaagaga-3 495bp hut-R 5-actggcgttatcccctttctctgctg-3 glgc SGP-F 5-cggtgtactgccccgctat-3 252bp SGP-R 5-ctgggcattgacgcaaa-3 DB5107/T 58 2018 7 附 录 B（资料 性附 录）养鸡场 鸡白 痢净 化工作 记录 表 表B.1 养 鸡场 鸡白 痢净 化 工作 记录 表 单位名 称：圈号：品 种：脚号 血 清条形码 普检1 普检2 普检2 备注 记录人：_