ICS 13.060.25 Z 16 DB37 山东省地方标准 DB37/T 4013 2020 养殖水体 中三嗪类、酰胺类、二硝基苯 胺类除草剂的 测定 气 相色谱-质 谱法 Determination of triazine,amide,dinitroaniline herbicides in aquaculture water by gas chromatography mass spectrometry 2020-07-09 发布 2020-08-09 实施 山 东 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB37/T 4013 2020 I 前 言 本标准 按照GB/T 1.1 2009 给出 的规 则起 草。请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利。本文 件的 发布机 构不 承担 识别 这些 专利的 责任。本标准 由山 东省 农业 农村 厅提出 并组 织实 施。本标准 由山 东省 农业 标准 化技术 委员 会渔 业标 准化 分技术 委员 会（鲁TC03)归 口。本标准 起草 单位：山 东省 海洋资 源与 环境 研究 院、山东省 水产 品质 量检 验中 心。本标准 主要 起草 人：张 秀 珍、徐英 江、张华 威、宫 向 红、刘小 静、韩典 峰、田 秀 慧、黄会、任 传博。DB37/T 4013 2020 1 养 殖水体 中三嗪类、酰胺 类、二硝 基苯胺 类除草剂 的测定 气 相色谱-质 谱法 1 范围 本标准 规定 了养 殖水 体中16 种三 嗪类、酰 胺类、二 硝 基苯胺 类除 草剂 的气 相色 谱-质 谱测 定方 法。本标准 适用 于养 殖海 水及 养殖淡 水中 三嗪 类、酰 胺 类、二硝 基苯 胺类 除草 剂 的测定，其他 水体 可参照执行。2 规范性 引 用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 6682 分 析实 验室 用 水规格 和试 验方 法 3 原理 过滤后 的试 样，经固 相萃 取柱富 集净 化后，采 用气 相色谱-质 谱法 测定，外 标 法定量。4 试剂和 材料 除另有 规定 外，所有 试剂 均为分 析纯，水 为符 合GB/T 6682 中规 定的 一级 水。4.1 试剂 4.1.1 氯化钠（NaCl）。4.1.2 乙酸乙 酯（C4H8O2）：色谱 纯。4.1.3 甲醇（CH3OH）：色 谱纯。4.1.4 正己烷（C6H14）：色 谱纯。4.1.5 丙酮（CH3COCH3）：色谱 纯。4.2 溶液配 制 正己烷-丙 酮溶 液：正己 烷 与丙酮 等体 积混 合。4.3 标准品 标准物 质：16种 除草 剂标 准品：纯度 98%，标准 品信息 参照 附录A。4.4 标准溶 液配 制 4.4.1 标准贮 备液：称 取扑 灭津、阿特 拉津、特 丁津、西 玛津、乙草 胺、甲草 胺、环草津、敌 草净、扑草净、莠灭 净、异丙 甲 草胺、西 草净、二 甲戊 乐 灵、丁草 胺、草净 津、丙 草胺 各 10 mg（精确 至0.01 DB37/T 4013 2020 2 mg），用乙 酸乙 酯溶 解，分别定 容 至10 mL，配制 成1.0 mg/mL 标 准贮 备液，于4 下 避光 保存，有 效使用期 为 6 个月。4.4.2 混合标 准工 作液：分 别移 取扑灭 津 等 16 种除 草剂 标 准贮备 液，用乙 酸乙 酯稀 释成混 合标 准工 作液，使 其中 扑灭 津、阿特 拉津、特丁 津、西玛 津、敌草净、扑 草净、莠 灭净、异丙 甲草 胺的 浓度 均为1.0 g/mL，环草 津、西 草净、甲 草胺、乙 草胺、丙草胺、丁草 胺的 浓度 均 为 1.5 g/mL，草 净津、二甲戊乐 灵的 浓度 均 为 2.0 g/mL，于 4 下避 光保 存，有 效使 用期 为1 个月。4.5 材料 4.5.1 0.45 m 混 合纤 维素 滤膜。4.5.2 固相萃 取柱：HLB，60 mg/3 mL，或相 当者。5 仪器和 设备 5.1 气相色 谱-质谱 联用 仪：配 电子轰 击离 子源（EI 源）。5.2 电子天 平：感 量0.000 01 g。5.3 离心机：转 速不 低 于4 000 r/min。5.4 抽滤装 置。5.5 固相萃 取装 置。5.6 氮吹仪。5.7 旋涡混 合器。5.8 移液管：1 mL。6 试样制 备与 保存 6.1 养殖海 水 将待测 养殖海水用抽滤 装置经0.45 m混 合纤维素滤膜过 滤后，备用。采 集的样品 应于2 8 冷藏、避光 保存，2 d内 分 析或萃 取完 毕。萃取 液应 于2 8 冷 藏、避光 保 存，8 d 内 分析 完毕。6.2 养殖淡 水 在待测 养殖 淡水 中加 入氯 化钠，使之 浓度 达到3%，用抽滤 装置 经0.45 m混 合纤维 素滤 膜过 滤后，备用。采 集的 样品 应于2 8 冷 藏、避 光保 存，2 d内 分析 或萃 取完 毕。萃 取液应 于2 8 冷藏、避光保 存，8 d 内分 析完 毕。7 测定步 骤 7.1 提取与 净化 准 确 量 取500 mL 处 理 后 的 养 殖 用 水 样 品 于1 000 mL 三 角 瓶 中，加 入20 mL 甲 醇，混 匀。依 次 用 甲 醇（4.1.3）3 mL、水3 mL活化HLB 固相 萃取 小柱（4.5.2），将水 样品 全部 通过 固 相萃取 小柱 后，用水3 mL淋洗，抽干5 min，加正己烷-丙酮溶液（4.2.1）6 mL 洗脱。收集洗 脱液，40 氮吹 至近干，用乙 酸乙酯（4.1.2）定 容至1 mL，供气相 色谱-质 谱联 用仪 分 析。7.2 标准曲 线的 绘 制 DB37/T 4013 2020 3 准确移 取适量 的混合 标准 使用液（4.4.2），用乙 酸 乙酯稀 释成一 系列 的混合 标准工 作液，使其 中扑灭津、阿 特拉 津、特丁 津、西 玛津、敌 草净、扑 草净、莠灭 净、异丙 甲草 胺浓度 分别 为5.00 g/L、10.0 g/L、20.0 g/L、50.0 g/L、100 g/L，环草津、西草 净、甲 草胺、乙草 胺、丙 草胺、丁草胺 浓度分别 为7.50 g/L、15.0 g/L、30.0 g/L、75.0 g/L、150 g/L，草 净津、二 甲戊乐灵 浓度分别 为10.0 g/L、20.0 g/L、40.0 g/L、100 g/L、200 g/L，临用 时 配制。以定 量离 子峰 面积为纵 坐标，对 应的 浓度 为横坐 标，绘制 标准 工作 曲线。7.3 测定 7.3.1 气相色 谱参 考条 件：a)色谱柱：DB-17ms 毛 细管 柱，30 m0.25 mm 0.25 m，或相 当者；b)载气：高纯 氦气，纯 度99.999%，流速1.0 mL/min；c)进样方 式：无分 流进 样；d)进样量：1 L；e)进样口 温度：260；f)柱温：起始 温 度 50，保 持 1 min；以 20/min 升 温至200，保 持 10 min，以 10/min升温 至240，以 30/min 升 温至300，保持3 min。7.3.2 质谱参 考条 件：a)离子源：EI 源；b)接口温 度：280；c)离子源 温度：230；d)四级杆 温度：150；e)溶剂延 迟：4.0 min；f)测定方 式：选择 离子（SIM）监测 模式，定 量离 子和 定性离 子见 表1。表1 待测物 定量 离子 和定 性离 子 化合物名称 定量离子 m/z 定性离子 1 m/z 定性离子 2 m/z 扑灭津 214 229 172 阿特拉津 200 215 173 特丁津 214 173 229 西玛津 201 186 173 乙草胺 162 223 174 甲草胺 160 188 217 环草津 212 227 170 敌草净 213 198 171 扑草净 241 184 226 莠灭净 227 170 185 异丙甲草胺 162 238 146 西草净 213 170 185 DB37/T 4013 2020 4 表1 待测 物定 量离 子和 定性离 子（续）化合物名称 定量离子 m/z 定性离子 1 m/z 定性离子 2 m/z 二甲戊乐灵 252 281 162 丁草胺 176 160 188 草净津 225 198 240 丙草胺 162 238 176 7.3.3 测定方 法 7.3.3.1 定性方 法 在 同 样 测 试条 件 下，试 样液 中 待 测 物的 保 留时 间 与标 准 工 作 液中 待 测物 的 保留 时 间 偏 差在 0.10 min 以内，在 扣除背 景后 的 样品质 谱图中，所 选择的 特征离 子均应 出现，且检 测到的 离子的 相对 丰度，应与浓 度相 当的 校正 标准 溶液相 对丰 度一 致。其允 许偏差 应符 合表2要 求。表2 定性确 证时 相对 离子 丰度 的允许 偏差 相对离子丰度%允许偏差%50 1 0 2050 1 5 1020 2 0 1 0 5 0 7.3.3.2 定量方 法 按7.3.1 和7.3.2 设定 仪器 条件，待仪 器稳 定后，根 据 表1中 的定 量离 子分 别对16种除草 剂进 行测 定，记录保 留时 间和 峰面 积，以峰面 积按 外标 法进 行单 点或多 点校 准定 量，标准 工作液 和试 样液 中待 测 物 的响应值 均应 在仪 器检 测线 性范围 内。标准 溶液、空 白加标 样品 的选 择离 子流 图参见 附录B。7.4 空白试 验 除不加 试样 外，均按 上述 步骤进 行。8 结果计 算和 表述 按式（1）分别 计算 试样中16 种除 草剂的 含量（ng/L 计算结 果需扣 除空 白值，测定结 果用两 次平 行测定的 算术 平均 值表 示，保留三 位有 效数 字。.(1)式中：X 试样 中被 测组 分的 含量，单位 为纳 克每 升（ng/L）；ci 试样 溶液 中对 应的 被测组 分浓 度，单位 为微 克每升（g/L）；V1 试样 溶液 定容 体积，单位 为毫 升（mL）；DB37/T 4013 2020 5 V 供试 试样 总体 积，单位为 毫升（mL）。9 检测方 法的 灵敏 度、准确 度和精 密度 9.1 灵敏度 扑灭津、阿特 拉津、特 丁津、西 玛津、敌草 净、扑草 净、莠 灭净、异丙 甲草胺 检出 限分别 为5.0 ng/L、定量限 分别 为10 ng/L；环 草津、西草 净、甲 草胺、乙草胺、丙 草胺、丁草 胺 检出限 分别 为7.5 ng/L、定量限分 别为15 ng/L；草 净 津、二 甲戊 乐灵 检出 限分 别为10 ng/L、定量 限分 别 为20 ng/L。9.2 准确度 扑灭津、阿 特拉 津、特 丁 津、西 玛津、敌 草净、扑 草净、莠灭 净、异丙甲 草 胺在添 加浓 度10 ng/L 100 ng/L 时，回收 率均 为70%120%；环草 津、西 草 净、甲 草胺、乙草胺、丙 草胺、丁草胺 在添 加浓 度15 ng/L 150 ng/L 时，回 收率均 为70%120%；草 净津、二甲 戊乐 灵在 添加 浓度20 ng/L 200 ng/L时，回收率 均为70%120%。9.3 精密度 本方法 的批 内相 对标 准偏 差小于15%，批 间相 对标 准偏差 小于15%。DB37/T 4013 2020 6 A A 附 录 A（资料 性附 录）16 种 除草 剂标 准品 信 息 表A.1 16 种 除草 剂中、英 文名 称、分子 式、分子 量 及CAS 号 中文名称 英文名称 分子式 分子量 CAS 号 扑灭津 Propazine C9H16ClN5 229 139-40-2 阿特拉津 Atrazine C8H14ClN5 215 1912-24-9 特丁津 Terbuthylazine C9H16ClN5 229 5915-41-3 西玛津 Simazine C7H12ClN5 201 122-34-9 乙草胺 Acetochlor C14H20ClNO2 269 34256-82-1 甲草胺 Alachlor C14H20ClNO2 269 15972-60-8 环草津 Cyprazine C9H14ClN5 227 22936-86-3 敌草净 Desmetryn C8H15N5S 213 1014-69-3 扑草净 Prometryn C10H19N5S 241 7287-19-6 莠灭净 Ametryn C9H17N5S 227 834-12-8 异丙甲草胺 Metolachlor C15H22ClNO2 283 51218-45-2 西草净 Simetryn C8H15N5S 213 1014-70-6 二甲戊乐灵 Pendimethalin C13H19N3O4 281 40487-42-1 丁草胺 Butachlor C17H26ClNO2 311 23184-66-9 草净津 Cyanazine C9H16ClN5 240 21725-46-2 丙草胺 Pretilachlor C17H26ClNO2 311 51218-49-6 DB37/T 4013 2020 7 B B 附 录 B（资料 性附 录）16 种 除草 剂标 准溶 液、空 白海水 加标 样品、空 白淡 水加标 样品 色谱 图 1.扑灭津；2.阿 特 拉津；3.特丁津；4.西玛 津；5.乙草胺；6.甲 草胺；7.环草 津；8.敌 草 净；9.扑 草 净；10.莠灭净；11.异丙甲草胺；12.西草 净；13.二甲戊乐灵；14.丁草 胺；15.草净津；16.丙草胺 图B.1 16 种 除草 剂标 准溶 液总 离 子流图（50.0 g/L）DB37/T 4013 2020 8 1.扑灭津；2.阿 特 拉津；3.特丁 津；4.西玛 津；5.乙草胺；6.甲 草胺；7.环草 津；8.敌 草 净；9.扑 草 净；10.莠灭净；11.异丙甲草胺；12.西草 净；13.二甲戊乐灵；14.丁草 胺；15.草净津；16.丙草胺 图B.2 空白海 水加 标样 品总 离子 流图（20.0 ng/L）DB37/T 4013 2020 9 1.扑灭津；2.阿 特 拉津；3.特丁 津；4.西玛 津；5.乙草胺；6.甲 草胺；7.环草 津；8.敌 草 净；9.扑 草 净；10.莠灭净；11.异丙甲草胺；12.西草 净；13.二甲戊乐灵；14.丁草 胺；15.草净津；16.丙草胺 图B.3 空白淡 水加 标样 品总 离子 流图（20.0 ng/L）_