ICS 71.040 Z 22 备案号：DB21 辽 宁 省 地 方 标 准 DB21/T 3304 2020 畜禽粪便 中西玛津 残留量的 测定 气相色谱-质谱法 Determination of simazine residue in livestock manure Gas chromatography-mass spectrometry method 2020-09-30 发布 2020-10-30 实施 辽 宁 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB21/T 3304 2020 I 前 言 本标准 按 照GB/T 1.1-2009 标 准化 工作 导则 给 出 的规则 编写。本标准 由 辽 宁省 农业 农村 厅 提出 并归 口管理。本标准 起草 单位：沈 阳海 关技术 中心、沈 阳农 业大 学、辽 宁省 农业 科学 院。本标准 主要 起草 人：徐宜 宏，付 海滨，李 晓东，姜 玲玲，金雁，胡 姝，张敏，李丽 娜。本标准 发 布 实施 后，任何 单 位和个 人如 有问 题和 意见 建议，均可 以通 过来 电和 来 函等方 式进 行反 馈，我们将 及时 答复 并认 真处 理，根 据实 际情 况依 法进 行评估 及复 审。归口管 理部 门通 讯地 址：辽 宁省农 业农 村厅（沈阳 市和 平区太 原北 街2 号），联系 电话：024-23447862 标准起 草单 位通 讯地 址：辽宁省 沈阳 市沈 河区 东滨 河路106 号，联 系电 话：024-24808859 DB21/T 3304 2020 1 畜 禽粪便 中西玛津 残留量 的测定 气 相色谱-质 谱法 1 范围 本标准 规定 了畜 禽粪 便中 西玛津 残留 量的 气相 色谱-质谱检 测方 法。本标准 适用 于 畜 禽粪 便中 西玛津 残留 量的 检测。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日 期的引 用文 件，仅注 日期 的 版本适 用于 文本 件。凡是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有 修改单）适 用于 本文 件。GB/T 6682 分析 实验 室用 水规格 和试 验方 法 3 方法提 要 试样经 乙酸乙 酯-乙 腈混合 溶液提 取，通 过弗 罗里硅 土固相 萃取柱 或中 性氧化 铝固相 萃取柱 净化，气相色 谱-质谱 法（GC-MS）测定 与确证，外标 法定 量。4 试剂和 材料 除另有 规定 外，所用 试剂 均为分 析纯，水为GB/T 6682 规 定的 一级 水。4.1 正己烷：色 谱纯；4.2 石油醚：分 析纯，30-60；4.3 乙腈：色 谱 纯；4.4 丙酮：色谱 纯；4.5 乙酸乙 酯-乙腈（1+1，V+V）：量 取50 mL 乙酸 乙酯 和 50 mL 乙 腈，混合 均匀；4.6 石油醚-丙 酮（1+1，V+V）：量 取50 mL 石 油醚 和 50 mL 丙 酮，混合 均匀；4.7 正己烷-石 油醚（1+1，V+V）：量 取50 mL 正己 烷 和50 mL 石油 醚，混合 均匀；4.8 无水硫 酸钠：于650 灼 烧4h，用 前于105烘 4h，冷却 后贮 于密 闭容 器中，备用；4.9 西玛津 标准 品(CAS：122-34-9)：纯度 98%；4.10 西玛津 标准 储备 溶液：准 确称取 适量 的西 玛津 标准 品，用 丙酮 配制 成浓 度 为 100 g/mL 的标准储 备溶 液；该溶 液 在0 4 条 件下 保存（有 效期 为 6 个 月）；4.11 西玛津 基质 标准 工作 溶液：根据需 要吸 取一 定体 积 的标准 储备 液（4.10），用 空白样 品提 取液配成 所需 浓度 的基 质标 准工作 溶液；DB21/T 3304 2020 2 4.12 弗罗里 硅土 固相 萃取 柱：500 mg，6 mL 或 相当 者；4.13 中性氧 化铝 固相 萃取 柱：1 g，3 mL 或相 当者。5 仪器 和设 备 5.1 气相色 谱-质谱 仪（GC-MS）：配 有电 子轰 击源（EI）；5.2 分析天 平：感 量0.1 mg 和0.1 g；5.3 氮吹仪：可 控温；5.4 均质器：转 速不 低 于 10000 r/min；5.5 离心机：转 速不 低 于 4000 r/min；5.6 涡旋混 匀机。6 试样制 备与 保存 将采集 的新 鲜畜 禽粪 样品,置于 洁净 的塑 料袋 中,混 匀，使 固液 均匀 分布 后，洁 净容器 内作 为试 样。密封并 标明 标记。-18 以 下冷冻 干燥 保存。在抽样 及制 样的 操作 过程 中，应 防止 样品 受到 污染 或发生 残留 物含 量的 变化。7 测定步 骤 7.1 提取 称取试 样2g（精 确至0.01g），转 入100 mL 离心 管中。加入20 mL 乙 酸乙 酯-乙 腈混合 溶剂（4.5），均质提 取40 s，4000 r/min 离心5 min，提取 液经10 g 无水硫 酸钠 柱(4.8)过滤 至浓缩 管，残 渣再加 入20 mL 乙 酸乙 酯-乙 腈混合 溶剂（4.5），重复 上述 操 作。合 并滤液 于同 一浓缩 管中，于40 减压 蒸发至近干,待净 化。7.2 净化 7.2.1 禽 类粪 便样 品：用 2 mL 正 己烷（4.1）将 上述 残渣 涡 旋混合 溶解，注 入预 先 用5 mL 正 己烷 淋洗的 弗罗 里硅 土固 相萃 取柱（4.12）中净 化。分 别用10 mL 正己 烷，10 mL 石油醚 淋洗，弃掉 淋洗 液。用 10 mL 石 油醚-丙 酮（4.6）的 混合 溶剂 洗脱，控 制 流速 2 3 mL/min。收集 全部洗 脱液 于浓 缩管 中，于 40 减 压蒸 发至 近干，用正己 烷（4.1）定 容至1.0 mL，涡 旋混 合溶 解残 渣，供 GC-MS 测定。7.2.2 畜 类粪 便样 品：用 2 mL 正 己烷将 上述 残渣 涡旋 混合 溶解，注入 预先 用5 mL 正 己烷预 淋洗 的中性 氧化 铝柱（4.13）中净化。分别 用 10 mL 用 正己烷，10 mL 正 己烷-石 油醚（4.7），弃 掉淋 洗液。用 10 mL 石 油醚-丙 酮（4.6）的 混合 溶剂 洗脱，控 制 流速 2 3 mL/min，收集 全部洗 脱液 于浓 缩管 中，于 40 减 压蒸 发至 近干，用正己 烷（4.1）定 容至1.0 mL，涡 旋混 合溶 解残 渣，供 GC-MS 测定。7.3 测定 7.3.1 气相色 谱-质谱 条件 a)色谱柱：DB-35 MS 柱（30 m0.25 mm 0.25 m），或相 当者；DB21/T 3304 2020 3 b)色谱柱 温度：；c)进样口 温度：280；d)接口温 度：300；e)电离 方式：电 子轰 击 源电离（EI），定量 离子 为 201 m/z，定 性离 子为186、173、203 m/z；f)离子源 温度：230；g)四 级杆 温度：150 h)载 气：氦气，纯 度99.999%，流 速2.0 mL/min；i)进 样方 式：无分 流，0.75 min 后 开启 分流 阀。j)进 样量：1 L；k)测 定方 式：选择 离子 监测（SIM）；l)溶 剂延 迟时 间：7.0 min。7.3.2 定性测 定 根据样 液中 西玛 津残 留量 情况，选定 浓度 相近 的标 准工作 溶液，标 准工 作溶 液和待 测样 液中 西玛 津的响应 值均应 在仪 器检测 的线性 范围内。标 准工作 溶液和 样液等 体积 交替进 样测定。在上 述GC-MS条件（7.3.1）下，西玛 津的 参 考保留 时间 为9.40-9.50 min，标 准品 色谱 图参 见附 录A中图A.1。进行气 相色谱-质谱 测定时，若被 测物质 色谱 峰保留 时间与 标准比 较，偏差在 2.5%之内，并且 在扣除背 景后的 样品 谱图中，所选 择的西 玛津 的特征 离子（m/z，定性离 子）均 出现，同时所 选择 离子的丰度比 与标准 物质 离子丰 度比相 一致，或相 似度在 允许偏 差之内（见 表1），被确证 的样品 可判 定为阳性检出。表1 定性确 证时 相对 离子 丰度 的最大 允许 偏差 相对离子丰度/%50 2050 1020 10 允许的相对偏差/%10 15 20 50 7.3.3 定量测 定 根据样 液中 西玛 津残 留量 的情况，选 定浓 度相 近的 基质标 准工 作溶 液，基质 标准工 作溶 液和 待测 样液中西 玛津 的响 应值 均应 在仪器 检测 的线 性范 围内，对标 准工 作溶 液与 样液 等体积 进样 测定，外 标 法 定量。7.4 空白试 验 除不称 取试 样外，其 余均 按上述 步骤 进行。7.5 结果计 算和 表述 15/min 240(3min)100 300(15min)8/min DB21/T 3304 2020 4 用色谱 数据 处理 机或 按式（1）计算 试样 中西 玛津 残 留量：10001000 m AV c AXs(1)式中：X 试样 中西 玛津 残留 量，单 位为 毫克 每千 克，mg/kg；A 样液 中西 玛津 的峰面 积；c 基质 标准 工作 溶液中 西玛 津的 浓度，单 位为微 克每 毫升，g/mL；V 样液 最终 定容 体积，单位 为毫 升，mL；As 基质 标准 工作 溶液中 西玛 津的 峰面 积；m 最终 样液 所代 表的试 样量，单 位为 克，g。注：计算结 果应 扣除 空白 值。8 定量 限 和回 收率 8.1 定量限 本方法 的定 量限 为0.01 mg/kg。8.2 添加浓 度范 围、回收 率 及 精密度 表2 样 品的 添加 浓度、回 收率及 精密 度的 实验 数据 样品 添加浓度/（mg/kg）回收率范围/（%）相对标准偏差(RSD)(n=6)/%畜类粪便样品 0.01 74.3-96.1 7.1 0.02 91.0-112.5 5.4 0.1 91.6-102.2 3.5 禽类粪便样品 0.01 90.0-104.7 4.7 0.02 92.0-102.7 2.1 0.1 93.5-104.2 3.1 DB21/T 3304 2020 5 附 录 A（资料 性附 录）西玛津 标准 品的 色谱 图 图A.1 西玛 津标 准品 的总 离子流 色谱 图 图A.2 西玛 津标 准品 的 全 扫描（EI）质谱 图 _ 9.40