ICS 67.120.30 B 52 DB32 江苏省地方标准 DB 32/T 3719 2020 中华绒螯 蟹“诺亚1 号”Chinese mitten-2020-01-06 发布 2020-01-30 实施 江 苏 省 市 场 监 督 管 理 局发布 DB 32/T 3719-2020 I 前 言 本标准 按 照 GB/T 1.1 2009 给出 的规 则起 草。本标准 由江 苏诺 亚方 舟农 业科技 有限 公司 提出。本标准 起草 单位：江 苏诺 亚方舟 农业 科技 有限 公司、中国 水产 科学 研究 院淡 水渔业 研究 中心。本标准 主要 起草 人：庄红 根、徐 跑、戴飞、董 在杰、郭风 英。DB 32/T 3719-2020 1 中 华绒螯 蟹 诺亚 1 号 1 范围 本标准 规定 了中 华绒 螯蟹“诺亚 1 号”产品 的术 语 和定义、要 求、规 格、试 验方法、检 验规 则、捕捞、暂 养、标志、捆 扎、包装、运输、贮 存。本标准 适用 于中 华绒 螯蟹“诺亚 1 号”的 成品。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日 期的引 用文 件，仅注 日期 的 版本适 用于 本文 件。凡是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有 的修改 单）适用 于本 文件。GB/T 191 包装 储运 图示 标 志 GB 5009.3 食品 安全 国家 标准 食品 中水 分的 测定 GB 5009.4 食品 安全 国家 标准 食品 中灰 分的 测定 GB 5009.5 食品 安全 国家 标准 食品 中蛋 白质 的测 定 GB 5009.6 食品 安全 国家 标准 食品 中脂 肪的 测定 GB 5009.11 食 品安 全国 家 标准 食品 中总 砷及 无机 砷 的测定 GB 5009.12 食品 安全 国家 标准 食品 中铅 的测 定 GB 5009.15 食品 安全 国家 标准 食品 中镉 的测 定 GB 5009.17 食品 安全 国家 标准 食品 中总 汞及 有机 汞 的测定 GB/T 5009.19 食品 中有 机 氯农药 多组 分残 留量 的测 定 GB/T 5009.162 动物 性食 品中有 机氯 农药 和拟 除虫 菊酯农 药多 组分 残留 量的 测定 GB 5009.190 食 品安 全国家 标准 食品 中指 示性 多氯 联 苯含量 的测 定 GB 5009.205 食 品安 全国 家标准 食 品中 二噁 英及 其 类似物 毒性 当量 的测 定 GB 5009.268 食 品安 全国 家标准 食 品中 多元 素的 测 定 GB 5749 生 活饮 用水 卫生 标准 GB 11607 渔业 水质 标准 GB/T 17924 地 理标 志产 品 标准 通用 要求 GB/T 19783 中 华绒 鳌蟹 GB/T 19857 水 产品 中孔 雀 石绿和 结晶 紫残 留量 的测 定 GB/T 20014.14 良 好农 业 规范 第 14 部分：水 产池 塘养殖 基础 控制 点与 符合 性规范 GB/T 20361 水产 品中 孔雀 石绿和 结晶 紫残 留量 的测 定 高 效液 相色 谱荧 光检 测 法 GB/T 20366 动物 源产 品中 喹诺酮 类残 留量 的测 定 液 相色谱-串联 质谱 法 GB/T 21317 动 物源 性食 品 中四环 素类 兽药 残留 量检 测方法 GB/T 21323 动 物组 织中 氨 基糖苷 类药 物残 留量 的测 定 高 效液 相色 谱-质谱/质 谱法 GB/T 22338 动 物源 性食 品 中氯霉 素类 药物 残留 量测 定 GB 23200.92 食 品安 全国家 标准 动物 源性 食品 中五 氯 酚残留 量的 测定 液 相色 谱-质谱法 DB 32/T 3719-2020 2 SC/T 3015 水产 品中 土霉 素、四 环素、金 霉素 残留 量的测 定 SC/T 3016 水产 品抽 样方 法 SC/T 9101 淡水 池塘 养殖 水排放 要求 SN/T 1928 进出 口食 品中 硝基咪 唑残 留量 检测 方法 液相色 谱-质谱/质谱 法 SN/T 3032 出口 食品 中三 聚氰胺 和三 聚氰 酸检 测方 法 液 相色 谱-质谱/质谱 法 SN/T 3235 出口 动物 源食 品中多 类禁 用药 物残 留量 检测方 法 液相 色谱-质谱/质谱法 DB32/T 593 中 华绒 螯蟹 产 品 农业部783 号公 告-1-2006 水产品 中硝 基呋 喃类 代谢 物残留 量的 测定 液 相色 谱-串联质谱法 农业部1025 号公 告-23-2008 动物 源食 品中 磺胺 类药 物 残留检 测 液相 色谱-串联 质谱法 农业部1077 号 公告-1-2008 水产品 中17中 磺胺类 及15 种诺喹 酮类药 物残留 检测 液相色 谱-串联质谱法 3 术语 和定 义 3.1 中 华绒 螯蟹“诺亚 1 号”中华绒 螯蟹“诺亚1 号”（以下统 称诺亚1号蟹）是指 选用“诺亚1 号”蟹 种养 殖 的成蟹，其质 量符合GB/T 19783 的 要求。4 要求 4.1 环 境条 件 水质应 清新 无污 染，符 合GB11607规定。pH 值7.5-8.5，溶 解氧，水深1.2-2.0m，透明 度0.4m以上，池底 平坦，淤 泥少。4.2 蟹种 亲本为 诺亚方 舟基 地或长 江水系 培育而 成的 国家水 产新品 种“诺亚1号”，大 眼幼体 由诺亚 方舟 在定点蟹苗繁育场繁 育而成，规格为14 万头/kg，一龄蟹种由诺亚方舟及 子公司的蟹种培育基地培育 成，规格为20只/kg-120只/kg，并符合 相应 的国 家标 准。4.3 养 殖周 期 在养殖 基地 内连 续饲 养周 期不少 于200天。4.4 感 官要 求 诺亚1 号蟹 的感 官应 符合 表1要求。表1 诺亚1 号蟹的感官指标 项目 指标 体表 体表清洁，纹理清晰，没有寄生虫及其他附着物。背面淡青色或黄褐色，腹部灰白。甲壳 坚硬，头胸甲呈方圆形，后半部宽于前半部，中央隆起，表面凹凸不平。活力 反应灵敏，活力强。气味 具有诺亚1 号蟹固有的鲜味，无异味。鳃 鳃丝清晰完整，无色或微褐色。附肢 附肢完整，关节处肌肉饱满。组织 肌肉纹理清晰，有弹性，不易剥离。水煮 肌肉组织紧密有弹性，肉质鲜嫩，蟹黄厚实酥松，气味微甜。DB 32/T 3719-2020 3 4.5 产 品分 级 4.5.1 规格 等级 诺亚1 号蟹 按个 体 体 重的 不 同分成 特级、一 级、二级、三级、四 级、五级，规 格应符 合表2的 规 定。表2 诺亚1 号蟹的规格等级 规格 g/只 雄蟹 雌蟹 特级 300 200 一级 250-299 175-199 二级 200-249 150-174 三级 175-199 125-149 四级 150-174 100-124 五级 150 100 4.5.2 质量 等级 诺亚1 号蟹 分为 一级、二 级 共两个 质量 等级，等 级指 标应符 合表3的 规定。表3 诺亚1 号蟹的质量等级 项目 一级 二级 外观 蟹体清洁，无斑点，附肢齐全。蟹体清洁，斑点少，附肢齐全。内在品质 性腺饱满，无透明区 性腺有1-2mm 透明区。肥满度，g/cm 0.41 0.36 性腺占体重的百分比，%7.5 6.5 4.6 理 化指 标 10 月中 旬至11月 中旬，蟹 体的理 化指 标应 符合 表4 的 规定。表4 诺亚1 号蟹的理化指标 项目 雄蟹 雌蟹 粗蛋白/（%）14.5 15.5 粗脂肪/（%）7.5 9.5 水分/（%）68 65 灰分/（%）1.8 1.5 4.7 安 全卫 生指 标 安全 指 标应 符合 表 5 的规 定。DB 32/T 3719-2020 4 表 5 诺亚 1 号蟹的安全指 标 序号 检验项目 指标 检测方法 1 镉（以 Cd 计），500 GB 5009.15 2 孔雀石绿a 不得检出 GB/T 19857 GB/T 20361 3 氯霉素，不得检出 GB/T 22338 4 氟苯尼考，100 GB/T 22338 5 呋喃唑酮代谢物 不得检出 农业部 783 号公告-1-2006 6 呋喃它酮代谢物 不得检出 农业部 783 号公告-1-2006 7 呋喃西林代谢物 不得检出 农业部 783 号公告-1-2006 8 呋喃妥因代谢物 不得检出 农业部 783 号公告-1-2006 9 恩诺沙星（以恩诺沙星与环丙沙星之和计），5 GB/T 20366 农业部 1077 号公告-1-2008 10 氧氟沙星 不得检出 GB/T 20366 农业部 1077 号公告-1-2008 11 培氟沙星 不得检出 GB/T 20366 农业部 1077 号公告-1-2008 12 洛美沙星 不得检出 GB/T 20366 农业部 1077 号公告-1-2008 13 诺氟沙星 不得检出 GB/T 20366 农业部 1077 号公告-1-2008 14 四环素，100 SC/T 3015 GB/T 21317 15 金霉素，100 SC/T 3015 GB/T 21317 16 土霉素，100 SC/T 3015 GB/T 21317 17 磺胺类（总量）b 不得检出 农业部 1025 号公告-23-2008 农业部 1077 号公告-1-2008 18 地西泮 不得检出 SN/T 3235 19 甲硝唑 不得检出 SN/T 1928 20 地美硝唑 不得检出 SN/T 1928 21 洛硝哒唑 不得检出 SN/T 1928 22 羟基甲硝唑 c 不得检出 SN/T 1928 23 羟甲基甲硝咪唑 d 不得检出 SN/T 1928 24 五氯酚酸钠（以五氯酚计）不得检出 GB 23200.92 25 甲基汞，mg/kg 0.5 GB 5009.17 DB 32/T 3719-2020 5 表 5（续）序号 检验项目 指标 检测方法 26 无机砷，mg/kg 0.5 GB 5009.11 27 铅，mg/kg 0.3 GB 5009.12 28 指示性多氯联苯，mg/kg 0.2 GB 5009.190 29 己烯雌酚，不得检出 SN/T 3235 30 溴氰菊酯，mg/kg 不得检出 GB/T 5009.162 注：a.孔雀石绿系指孔雀石绿 及其代谢物隐色孔雀石绿残留量之和，以孔雀石绿表示。b.磺胺类（总量）项目至少包含磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲 恶 唑、磺 胺 间 二 甲 氧 嘧 啶、磺 胺邻 二 甲 氧 嘧 啶、磺 胺 间 甲 氧 嘧 啶、磺 胺 氯 哒 嗪、磺 胺 喹 恶 啉，如 检 出 其 他 磺 胺 药 物 残 留，一 并 计 入 磺 胺 类（总量）并判定。c.羟 基 甲 硝 唑 为 甲 硝 唑 代 谢 物。d.羟 甲 基 甲 硝 咪 唑 为 地 美 硝 唑、洛 硝 哒 唑 代 谢 物。4.8 风 险监 控指 标 风险监 控指 标应 符合 表 6 要求。表 6 诺亚 1 号蟹的风险监 控指标 序号 项目类别 项目 指标 检测方 法 1 四环素 类 强力霉 素，g/kg 50 GB/T 21317 2 染料类 结晶紫 不得检 出 GB/T 19857 3 隐性结 晶紫 不得检 出 4 化学元 素类 铜，g/kg 20000 GB 5009.268 5 氨基糖 苷类 新霉素，g/kg 500 GB/T 21323 6 环境污 染物 二噁英 及其 多氯 联苯，pg/g 6.5 GB 5009.205 7 杀虫剂 六六六，mg/kg 0.05 GB/T 5009.19 8 滴滴涕，mg/kg 0.05 9 非法添 加物 三聚氰 胺 不得检 出 SN/T 3032 10 喹诺酮 类药 物 环丙沙 星，g/kg 5 GB/T 20366 11 丹诺沙 星，g/kg 5 12 沙拉沙 星，g/kg 5 13 麻保沙 星，g/kg 5 14 恶喹酸，g/kg 5 15 氟甲喹，g/kg 5 16 双（二）氟 沙星，g/kg 5 DB 32/T 3719-2020 6 5 检验 方法 5.1 感 官特 征 5.1.1 感官 检验 将试样 放在 白色 搪瓷 盘中，用目 测、手 掂、捏，鼻 嗅检查。当 感官 难以 判定 产品质 量时，进 行水 煮试验。5.1.2 水煮 试验 将 2-3 只蟹用清 水洗 净放 入蒸煮 容器 中，加少 量水，以刚 没过 整蟹 为准，煮 10-15 分钟，打开 盖，闻其味，品 尝肉 质。5.2 等 级检 验 5.2.1 规格 等级 用灵敏 度 为 0.1g 的 天秤 称 重，进 行规 格分 级。5.2.2 肥满 度的 测定 按 DB32/T 593 的方 法执 行。5.3 蛋 白质 的测 定 按 GB 5009.5 的 方法 执行。5.4 脂 肪的 测定 按 GB 5009.6 的 方法 执行。5.5 水 分的 测定 按 GB 5009.3 的 方法 执行。5.6 灰 分的 测定 按 GB 5009.4 的 方法 执行。6 检验 规则 6.1 组 批规 则 同一养 殖场、同 等级、同 批次、同时 收获 的诺 亚 1 号蟹为 一个 检验 批次。6.2 抽 样方 法 按 SC/T 3016 的 规定 执行。6.3 检 验分 类 产品检 验分 为出 场检 验和 型式检 验。6.3.1 出场 检验 每批产 品出 场前，出 场检 验由生 产者 执行，检 验项 目为等 级规 格、感官 指标。6.3.2 型式 检验 型式检 验是 对产 品进 行全 面考核，即 对本 标准 规定 的全部 要求 进行 检验，有 下列情 形之 一者 应进 行型式检 验：a)申请绿 色食 品农 产品 标识；b)有关行 政部 门提 出型 式检 验要求；c)前后两 次抽 样检 验结 果差 异较大；d)正常养 殖时，每 年至 少一 次型式 检验；6.4 判 定规 则 6.4.1 所有 检验 指标 都符 合 本标准 的规 定，则判 定该 批次产 品合 格。6.4.2 卫生 标准 中有 一项 不 符合本 标准 的规 定，则判 定该批 次产 品不 合格。DB 32/T 3719-2020 7 6.4.3 除卫生 指标外 的其 他 指标有 两项或 两项 以上不 符合本 标准的 规定，则判 定该产 品不合 格，有一项指标不 合格，可 降级 或进 行复检，以 复检 结果 为准。7 捕捞 及暂 养 7.1 捕捞 捕捞方 式可 以是 地笼 捕捞、塘 埂捕 捉和 干塘 捕捞 等，但 不得 使用 灯光 捕捞。捕捞后 池塘 尾水 排放 符合 SC/T 9101 的 要求。7.2 暂养 成蟹捕捞后在暂养塘分规格分网箱暂养，上市前经专用清洗池清水暂养（15-30）分钟，清洗用水符合 GB 5749 的 规定，彻 底去除 成蟹 鳃中 泥沙。8 标志、捆 扎、包装、运 输、贮 存 8.1 标志 诺亚 1 号蟹 的标 志使 用，应符 合 GB/T 17924 规定。8.2 捆扎 诺亚 1 号蟹 用棉 绳或 香草 将蟹的 两只 大螯 及附 肢捆 扎住，捆扎 物不 得超 过蟹 体重量 的 5%。8.3 包装 8.3.1 将蟹头 部朝下 整齐 排 列于包 装容器 中，包装容 器应有 透气孔；包 装材料 应卫生、洁净，无 毒、无害。8.3.2 运输 包装 物的 图示 标 志应符 合 GB/T 191 的规 定。8.4 运 输、贮存 8.4.1 在低温 清洁的 环境 中 装运，保证鲜 活，防止挤 压。运 输工具 应清 洁卫生、无毒、无异 味，不得与有毒有 害物 品混 运和 重压，严防 运输 污染。8.4.2 活体 诺亚 1 号 蟹应 贮 存 于洁 净环 境中，防 止有 毒有害 物质 的污 染及 其他 损害。9 记录 符合 GB/T 20014.14 的 要 求，及时 登 记蟹 种、饲料、饵 料、药物 等投入 品的 使用情 况，记录 保存 时间不得 少 于 2 年。DB 32/T 3719-2020 8 附录 A（规范 性附 录）A.1 亲本 来源 和类 型 A.1.1 亲 本来 源 2005 年 采用 长江 水系 野生 中华绒 螯蟹 为基 础群 体，经群体 继代 选育 而成。2014 年2015 年经 历生 产小 试、中 试 试验，2017 年4月 经 全国 水 产原 种 和良 种审 定 委员 会 审定，定名 为诺 亚1 号（品 种登 记号：GS-01-005-2016）。A.1.2 亲 本特 性 形态指 标：“青 背、白 肚、金 爪、黄 毛”，是 指背 甲淡青 色，腹 部银 白色 或 灰白色，螯足 具有 浓密的绒毛，步 足上 的刚 毛呈 金黄色；步 足长，额 齿明 显，额 齿间 缺刻 较深，呈“U”字 型。生物学 指标：性 腺发 育良 好，体 重规 格达 标（雄蟹 大于200g，雌蟹 大于150g）。A.2 主要 特征 A.2.1 形 态学 特征 头胸甲 呈方圆 形，后半部 宽于前 半部，中央 隆起，表面凹 凸不平。额 缘具4尖 齿，齿 间缺刻 较深，第4尖齿小而明显，内额齿间缺刻 呈“U”型。额部两侧有 一对带柄的复眼。头胸部 两侧有5对 足，第1对为螯 足，末端 似钳，布 满棕褐 色绒 毛，后4对 为步 足，长 节末 前角 各有1 尖齿。腹部 覆以 腹甲，腹部 扁平，雄 蟹腹 脐呈 三角 形，雌蟹腹 脐呈 卵圆 形。头胸 甲背面 淡青 色或 黄褐 色，腹部灰 白。诺亚1 号蟹 的外 部形 态见 图1和图2。雌性 雄性 图1 诺亚1 号蟹 外形（背 面）雌性 雄性 图2 诺亚1 号蟹 外形（腹 面）DB 32/T 3719-2020 9 A.2.2 可 量性 状 诺亚1 号蟹 的主 要形 态性 状 比值见 表1。A.3 形体 与繁 殖 A.3.1 形 体指 标 诺亚 1 号蟹 体重 与头 胸甲 长的关 系式 为：雄蟹：W=0.0207L2.2173(R=0.8538)，雌蟹：W=0.0041L2.5372(R=0.8247)。式中：W 体重，g；L 头胸甲 长，cm。A.3.2 繁殖 A.3.2.1 诺亚 1 号 蟹生 殖洄 游一般 在 10 月 中下 旬-11 月下旬。A.3.2.2 性成 熟雌 蟹可 进行 一次交 配，多次 产卵。A.3.2.3 不同 体重 诺亚 1 号 蟹抱卵 量见 表 2。表 2 不同 体重 诺亚 1 号 蟹的抱 卵量 体重/g 抱卵量/粒 100 200 750 000 表 1 诺亚 1 号蟹 主 要形 态 性状比 值 项目 平均值 标准差 雄 雌 体高/头胸甲长 0.560 0.022 0.574 0.018 头胸甲宽/头胸甲长 1.106 0.026 1.073 0.027 中额齿间距/头胸甲长 0.077 0.006 0.072 0.009 两侧额齿间距/头胸甲长 0.228 0.011 0.226 0.011 第一侧齿间距/头胸甲长 0.603 0.018 0.584 0.014 侧缺刻至前疣状突/头胸甲长 0.081 0.010 0.081 0.007 侧缺刻至中疣状突/头胸甲长 0.189 0.008 0.182 0.011 侧缺刻至后疣状突/头胸甲长 0.224 0.011 0.216 0.012 第四侧齿至中缺刻/头胸甲长 0.695 0.011 0.671 0.013 第四侧齿至侧缺刻/头胸甲长 0.645 0.012 0.628 0.012 第四侧齿至前疣突/头胸甲长 0.637 0.013 0.618 0.017 第二步足长节长/头胸甲长 0.778 0.025 0.690 0.032 第二步足趾节长/头胸甲长 0.430 0.060 0.407 0.027 DB 32/T 3719-2020 10 A.4 遗传 学特 性 A.4.1 细 胞遗 传学 特性 诺亚1 号蟹 的染 色体 数目 为146（2n），为 点状 型。图 3 诺亚 1 号 蟹染 色体 A.4.2 生 化遗 传学 特性 诺亚 1 号蟹 肌肉 组织 脂酶（EST）同工 酶的 电泳 图 谱见 图 4。图 4 诺亚 1 号 蟹肌 肉组 织 脂酶（EST）同工 酶电 泳 图 A.4.3 分 子遗 传学 特性 A.4.3.1 RAPD 筛选到 2 个 RAPD 引物 S1 与 S15 在诺 亚 1 号蟹 群 体中扩 增条 带清 晰，扩增 产物长 度分 别为 950bp和 750bp（图 5，6）。DB 32/T 3719-2020 11 图 5 引物 S1PCR 扩增 M：100bp DNA ladder，1-15：雌 蟹，16-24：雄 蟹 图 6 引物 S15 PCR 扩增 M：100bp DNA ladder，1-15：雌 蟹，16-24：雄 蟹 A.4.3.2 核糖 体内 转录 区 1 用所设 计的 特异 引物 ITS1，在诺 亚 1 号蟹 群体 中的 核糖体 转录 区 1 中进 行扩 增，均 可扩 出一 条大小为 390bp 的条 带，见 图 7。图 7 引物 ITS1PCR 扩增 M：DL2000，1-15：雌 蟹，16-24：雄 蟹 A.5 检测 方法 A.5.1 形 态特 征 目测检 查。DB 32/T 3719-2020 12 A.5.2 可 量指 标 10 月-11 月取 性成 熟蟹，雌雄个 体样 本数 均大 于 30 只。用感 量不 低于 0.001g 的天平 称重，计算，取算术 平均 值。A.5.3 繁 殖力 测定 在繁殖 季节，将 附着 在抱 卵蟹腹 部刚 毛上 的受 精卵 刮下称 重。取 3 组样 品，采用 0.001g 电 子天 平各称 取 1g 卵，在解 剖镜 下 计数，计算 平均 每克 卵粒 数和抱 卵数。A.5.4 染 色体 测定 按 GB/T 18654.12 的规 定 执行。A.5.5 同 工酶 测定 按 GB 17716 中 的第 6 章 的规定 执行。A.5.6 随 机扩 增多 态（RAPD）测定 A.5.6.1 样本 采集 与保 存 取约 200mg 肌肉、肝脏、血液或 性腺 的新 鲜样 品，于液氮、干 冰及-30低 温 保存，或于 95%乙醇保存。A.5.7 基 因组 DNA 提取 采用酚-氯仿 抽提 法提 取基 因组 DNA。取个体 新鲜 肌肉 组织（步 足或螯 足）约 200mg，于 冰 上预冷 的研 钵内 研磨，放 入 1.5mL 的 eppendorf离心管 中，加 入 2 倍 体积 的裂解 缓冲 液（10mmol/L Tris-HCL，pH 值 8.0；0.1mol/L EDTA，pH 值 8.0；0.5%SDS）混匀，加入 蛋白 酶 K 至终浓 度为 100 g/mL，56消化 3-4h。冷却 至 室温后，室温 下 13200r/min 离心 10min，取上清液加 入等体积的平 衡酚-氯仿-异戊醇（25:24:1）剧烈混 匀，13200 r/min 室温离心10min。取粘 稠水 相，加 入 2 倍体 积的 无水 乙醇，-20 静置 30min，13200 r/min 室温 离心 10min，弃 上清液晾 干。将 上述沉 淀溶 于 200 LTE（2ml TE，pH 值 7.6，溶 解 2mg 粗制 胰 蛋白 酶 RNase I），37 消化 30min。1%琼 脂糖 凝胶 电泳观 察提 取 的 DNA 浓度 和纯度，4 保 存。A.5.7.1 基因 组 DNA 的 PCR 扩增 在 0.5mL 的薄壁管中 加入总 体积 为 25 L 的 PCR 反 应混 合液。其 中 2.5 L10 PCR 反 应缓 冲液（100mmol/L Tris-HCL，500mmol/L KCl，1.3mg/mL BSA，0.01%Gelatin，pH 值 8.4）；2 LMgCl2(2.5mmol/L)；1 L dNTP（2.5 mmol/L）；1 LRAPD 引 入物（10 mol/L）；0.2 Taq 酶（5U/L）；0.7 L 基因组 DNA；ddH2O 补 足体 积。PCR 扩 增程 序：94 预变 性 7min；94 变性 1 min，37 退火 1min，72 延伸 2min，4045 个循环；72 延伸 10min，4 保存。每次 反应 设置 不含 模板的 空白 对照。A.5.7.2 PCR 扩 增产 物的 电 泳分离 与观 察 将扩增 产物 置 于 1%琼 脂糖 凝胶上 进行 电泳，取 10 LPCR 扩增 产物，用 移液 器将 样品加 入样 品孔。以溴酚 蓝做 指示 剂，在 5V/cm 凝胶的电 压下 进行 电 泳。当 指示 剂迁 移至 足够 分离 DNA 片 段的 距离 时，停止电 泳。用 0.5 g/mL 的 溴化乙 锭染 色 20min 后，在凝胶 成像 系统 下 观 察并 照相。_