ICS 65.1 50 B 51 DB45 广西壮族自治区地方标准 DB 45/T 1651 2017 珠母贝人工繁殖技术规范 Technnical specifications for artificial propagation of Pinctada margartifera 2017-12-30 发布 2018-01-30 实施广西壮族自治区质量技术监督局 发布 DB 45/T 1 65 1 20 17 I 目 次 前 言.II 1 范围.1 2 规范性引 用文件.1 3 术语和定 义.1 4 繁殖场海 区环境.1 5 亲贝选择.1 6 催产与人 工授精.2 7 幼虫筛选 与孵化.2 8 幼虫培育.3 9 采苗.4 10 收苗.4 DB 45/T 1 65 1 20 17 II DB 45/T 1 65 1 20 17 III 前 言 本标准按照G B/T 1.12 0 09 给出的规 则起草。本标准由北海市质量技术监督局提出。本标准由广西珍珠及珍珠制品标准化技术委员会技术归口。本标准起草单位：国家珍珠及珍珠制品质量监督检验中心、广东海洋大学。本标准主要起草人：廖斌、童银洪、关安春、阮然、刘永、苏珠芳、陈虹才、邓晶晶、梁耀娟、沈 子洋。DB 45/T 1 65 1 20 17 1 珠母贝人工繁殖技术规范 1 范围 本标准 规定 了珠母 贝（Pi nc ta da m arg ar it if er a（Li nn e）人工繁殖的环境条件、亲贝选择、催产与人工授精、幼虫筛选与孵化、幼虫培育、采苗与收苗技术。本标准适用于广西境内珠母贝的人工繁殖。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 1 16 07 渔业水质标准 NY 5 05 2 无 公害食品 海水养殖用水水质 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 洗卵 e gg-wa sh in g 在珠母贝胚胎发育的沉降期内，去掉上层海水以降低劣质胚体比例和减少水体中多余精子、亲贝排泄 物等杂质，达到净化水质、保留优质胚体的过程。3.2 幼虫筛选 em br yo s el ect io n 在珠母贝胚胎发育至担轮幼虫期，收集和利用上浮的优质幼虫，淘汰中下层劣质幼虫，以降低劣质幼 虫比例的过程。4 繁殖场海区环境 应选择在潮流畅通、底质为沙或沙泥、没有污染的海区；盐度25 3 5；p H值8.08.6。水 质应符 合GB 1 16 07 和NY 5 05 2 的 规定。5 亲贝选择 亲贝选择如下：珠母贝亲体为 3 龄 5 龄 天然贝；壳高 10 c m 以 上、体重 50 g 以上；DB 45/T 1 65 1 20 17 2 贝壳外观完整，边 缘生长线明显，体 色黑褐色，外 缘鳞片粗壮、完整；贝壳内 侧 边 缘 珍珠质 呈深黑色 或 孔雀绿色；软 体 部饱满、富 有 弹 性。6 催产与人工授精 6.1 催产 6.1.1 温度刺激法 将 亲贝 置 于1 8 2 0 环境中30 m in 5 0 m in，再将 亲贝 置 于29 30 的海水中 浸泡 20 m in 30 m in，然 后移 入 23 2 6 海水中。按4：1 5：1的 雌雄 比 将 亲贝 移入 产 卵池 或孵化 池 中 待 排 放 精 卵。6.1.2 温度结合化学药物刺激法 把 亲贝 阴干 2 h 3 h，再置 于 浓 度为4 10-46 10-4、温 度为29 30 的 氨 海水 浸泡 30 m in 4 0 m in，然 后移入 23 26 的 砂滤 海水。按4：1 5：1的 雌雄 比 将 亲贝 移入 产 卵池 或孵化 池 中 待 排 放 精 卵。6.1.3 阴干结合藻液、温度刺激法 把 亲贝 阴干 1 h 2 h，再置 于 阳光 下 暴晒 20 m in，然 后置 于10 万 c el l 2 0 万 c el l 的 扁藻 或 金藻液 中 滤 食20 m in 30 m in，按4：1 5：1的 雌雄 比 将 亲贝 移入 产 卵池 或孵化 池 中 待 排 放 精 卵。6.2 人工授精 6.2.1 受精环境 水 温 26 30，盐度2 8 32。6.2.2 精卵成熟度检查 去 除 亲贝 右 壳、外 套膜 和 鳃使生 殖 腺裸露，用 消毒脱脂棉擦 去体 液 和海水。用 吸管刺入生 殖 腺吸取 精 卵，置 于3 10-55 10-5的 氨 海水中，在 显微镜 下观 察：精 子 活动活泼 则为 成熟 精子；成熟 的 卵 子 呈淡黄 色，圆形 或 卵圆形，卵膜光滑，卵核 大 而明显，位 于 细胞 中 央，卵黄颗粒分布均匀，色素较浓，卵径 50 m6 0 m。6.2.3 授 精 在 100 m L 20 0 m L烧杯 中 装 好砂滤 海水，用 吸管分 别吸取雌、雄 亲贝的 卵 子、精子于 烧杯 中。在 受 精 缸 或水 族箱 中 配好 6 10-58 10-5的 氨 海水。精、卵 用筛 绢 过 滤，先倒入卵 子，过5 m in 1 0 m in 后倒入 精 子，并充分搅拌混 合。光 学 显微镜 下观 察卵 子 受 精 情况，受 精 率 在90%以上则用于人工繁殖，受 精 率 在90%以下则 弃之 不用。7 幼虫筛选与孵化 7.1 洗卵 在胚胎发育的沉降期 时间（受 精 后 3 h）内，每隔 30 m in 5 0 m i n进行一次洗 卵操作，共洗 卵 2 次 至3 次。7.2 幼虫筛选 DB 45/T 1 65 1 20 17 3 胚胎发育5 h 后进入担轮幼虫期，每隔1小时收集 一次上浮的优质幼虫并入孵化池，共收集3次。7.3 孵化 孵化池中担轮幼虫密度控制在50个/m L10 0 个/mL之间。暂养1 2 h后，胚体 发育至面盘幼虫。8 幼虫培育 8.1 幼虫投放 将幼虫移入加有1米左右 水深砂滤海水的育苗池，使幼虫密度为2个/m L 3个/m L。育 苗 池水温23 26，盐度 2 53 3。8.2 水质管理 育苗池 幼虫下池后的3 d4 d 内，每天 添加一部分新 鲜砂滤海水，第三天或第四天 加满，然后开始换水。换水量从初期的1/5 到 后期的1/3 1/2，换水 时温差不能超过1。前 期 换水用孔径64 m的尼龙 筛绢 再过滤。8.3 投饵 8.3.1 饵料种类 面盘幼虫期饵料种类：光合细菌、干酵母、湛江等鞭金藻、球等鞭金藻、绿色巴夫藻、亚心形扁藻。壳顶期幼虫、眼点期幼虫饵料种类：在面盘幼虫期饵料种类中增加角毛藻。附着幼苗饵料种类：光合细菌、干酵母、湛江等鞭金藻、球等鞭金藻、绿色巴夫藻、亚心形扁藻、角 毛藻。8.3.2 投饵量 不同发育阶段的投饵量见表1。表1 珠母贝幼体不同发育阶段的饵料量参考表 发育阶段 每天投饵量，cell/mL 亚心形扁藻 湛江等鞭金藻 D 形期 200400 200400 壳顶初期 400800 400800 壳顶中期 8001 100 500800 壳顶后期 1 1001 500 600900 附着和幼苗 1 5002 000 1 0002 000 幼苗至收苗 2 0003 000 注1：饵料主要以金藻和扁藻为主，其他饵料为辅（金藻、扁藻供应不足时使用）。注2：D 形期以金藻为主，占投喂量的 50%100%，其他发育时期以扁藻为主，比例占投喂量的 50%100%。8.4 充气 用空气压缩机或鱼泵连续充气，溶解氧保持4.30 mg/L以上。DB 45/T 1 65 1 20 17 4 9 采苗 9.1 附苗器种类 9.1.1 塑料薄板 材 质为 聚氯乙烯，颜色 为 黑色 或 红色，规 格 为1 8 cm 20 c m、18 cm 22 cm、20 cm 2 0 cm，穿连 成串，每串 10 片 13 片，片 与 片 之间间隔 10 c m1 5 cm。9.1.2 胶丝网布 将材 质为 聚氯乙烯 的40 目胶丝网布裁剪成 11 0 cm 25 cm，一端 中 间绑吊绳，另一端两角绑坠 子。9.1.3 附着绳 采用 遮光率 95%的 太阳遮 光网裁剪成 11 0 cm 3 cm，拧成绳 子，一端绑坠 子。9.2 附苗器消毒 投放 前 淡 水 浸泡 2 d 3 d，高 锰酸钾消毒，淡 水 冲洗后备 用。9.3 附苗器投放 20%3 0%的 幼虫出 现眼点时，投放附 苗 器，2 d 3 d 内 分批 投 完。9.4 附苗后管理 每 天 换 水 1/3；连续充气；投饵 量 参 照8.3.2。1 0 收苗 附着后 20 d 3 0 d，贝苗壳高达2 m m3 mm 就 可收苗。对于 塑料板 或 胶丝网布附 苗 器 上的贝苗，采用0.02%0.0 2 5%氨 海水 浸泡 12 m in 1 5 m in，贝苗会 自动脱落，即 可收集；对于 附着绳附 苗 器 上的贝苗，将 贝苗 连同附着绳一 起 直接 移 至海区 进行 养 成。_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 中华人民共和国广西地方标准 珠母贝人工繁殖技术规范 DB45/T 1651 2017 广西壮族自治区质量技术监督局统一印刷 版权专有 侵权必究