ICS 71.100.01 Y 42 DB37 山东省地方标准 DB37/T 30392017 化妆品中 溴硝丙二 醇的测定 高效液相 色谱法 Determination of bronopol in cosmetics by high performance liquid chromatography method 2017-10-25 发布 2017-11-25 实施 山东省质量技术监督局 发布 DB37/T 30392017 前 言 本标准 按照GB/T 1.12009 给出 的规 则起 草。本标准 由山 东省 质量 技术 监督局 提出。本标准 由山 东省 化工 标准 化技术 委员 会归 口。本标准 起草 单位：山 东省 产品质 量检 验研 究院、山 东省食 品药 品检 验研 究院。本标准 主要 起草 人：薛霞、周莉 莉、杨昊、任 雪梅、宿书 芳、尹丽 丽、卢兰 香、别 梅。I DB37/T 30392017 化 妆品中 溴硝丙二 醇的测 定 高效 液相色 谱法 1 范围 本标准 规定 了化妆 品中 溴硝 丙 二醇 的 高效 液相 色谱 测定方法。本标准 适用 于膏 霜类、乳 液和液 体化 妆品 中溴 硝丙 二醇的测 定。本标准 方法 检出 限为0.01 g/kg。2 规范性 引用 文件 下 列 文件 对于 本文 件的 应用 是 必不 可少 的。凡是 注日 期 的引 用文 件，仅所 注日 期 的版 本适 用于本文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 6682 分析 实验 室用水 规 格和 试验 方法 3 原理 试样中的 溴硝 丙二 醇用甲 醇水溶 液超 声波 提取，经液 相 色谱 分离 后，用二极 管阵列 或紫外 检测器进行检 测，二极 管阵 列检 测器 依 照保 留时 间和 二极 管阵 列 检测 器给 出的 光谱 图定 性，紫 外检 测器依照保留时间定 性，外标 法定 量。4 试剂与 材料 除非另 有说 明，所有 试剂 均为分 析纯，水 为GB/T 6682规定 的一 级水。4.1 甲醇：色 谱纯。4.2 乙酸铵：分 析纯。4.3 乙腈：色谱 纯。4.4 0.02 mol/L 乙酸 铵溶 液：准 确 称取 1.54 g 乙酸 铵，用 水 溶解 并定 容至 1 L。4.5 甲醇+水（7+3）：准确 量取 甲醇 350 mL，水 150 mL，两者 充分 混匀。4.6 标准物 质：溴硝 丙二 醇（CAS 号52-51-7），纯度 不低 于 99.0%。4.7 溴硝丙 二醇 标准 储备 溶液：称取 适量 溴硝 丙二 醇标 准品（精确 至 0.1 mg），用 甲 醇溶 解配 制成浓度为1.0 mg/mL 的标 准储 备液2 8 冷藏 保存，有 效期 3 个 月。4.8 标准工 作溶 液：将溴 硝丙 二 醇标准 储备 液用 甲醇 水溶 液（4.5）依 次稀 释成 1.0 g/mL、10.0 g/mL、50.0 g/mL、100.0 g/mL、200.0 g/mL 的系 列标 准溶液。使 用前 配制。4.9 微 孔 滤膜：有 机相，孔径0.45 m。5 仪器和 设备 5.1 高效液 相色 谱：配有 二极 管阵列 检测 器或 紫外 检测 器。5.2 电子分 析天 平：感量 分别 为0.1 mg 和 0.01 g。1 DB37/T 30392017 5.3 超声波 清洗 器。5.4 涡旋混 合器。5.5 离 心 机，不低于 8000 r/min。6 分析步 骤 6.1 试样处 理 6.1.1 膏霜类 化妆 品 称取1.0 g（精确至0.01 g）试样 于研钵 中，加入5 g 无水硫 酸钠研 磨分 散均匀，全部 转入50 mL 具塞离 心管 中，准确 加入25.00 mL 甲 醇水 溶液（4.5），涡 旋 混合 均匀，超声 提取15 min，4 8000 r/min离心5 min，取上 清液 经微 孔滤膜（4.9）过 滤后 上机测定。若样 品中 溴硝 丙二 醇含量 较高，需 用甲醇 水溶液（4.5）适当 稀释 后测定。6.1.2 乳液和 液体 化妆 品 称取1.0 g（精确至0.01 g）试 样于25 mL 容 量瓶 中，用甲醇 水溶液（4.5）定 容，涡旋 混合均 匀，以下步 骤同6.1.1“超 声提取 适当 稀释 后测 定”。6.2 仪器参 考条 件 仪器参 考条 件如 下：色谱柱：Atlantis T3 C18 柱，250 mm4.6 mm(i,d),5 m，或性 能相 当者；流动相：乙腈:乙 酸铵 溶液（4.4）=5:95（体积 比）；流速：1.0 mL/min；柱温：35；进样体 积：10 L；二极管 阵列 检测 器：检测 波长扫描 范围190 nm 400 nm，定量 波长208 nm；紫外 检 测器：208 nm。6.3 测定 将标准 工作溶 液（4.4）按 照浓度 由低到 高的 顺序进 样测定，以溴硝 丙二 醇 峰 面积对 其浓度 绘制 标准曲线。试样溶 液测定后，以 其在208 nm 波 长下 色谱峰 的 保留 时间 定性（二 极管 阵 列检 测器 还有 相应的光谱图 辅助 定性），标准 曲线定 量。经 测定 超出 标准 曲 线样 品经 适当 稀释 后再 进 样分 析，标样谱图参见附录A。6.4 结果计 算 6.4.1 试样中 溴 硝丙 二醇 的 含量 按式（1）计 算：mV cX=1000n.(1)式中：X 试样 中溴 硝丙 二醇 的含量，单 位为 克每 千克（g/kg）；c 由标 准曲 线得 到的 试样溶 液中 溴硝 丙二 醇的 浓度，单位 为微 克每 毫升（g/mL）；V 试样 溶液 的体 积，单位为 毫升（mL）；n 试样 的稀 释倍 数；m 试样 质量，单 位为 克（g）。2 DB37/T 30392017 6.4.2 以重复 性条 件下 获得 的两 次独立 测定 结果 的算 术平 均值表 示，结果 保留 两位 有效数 字。7 精密度 在重复 性条 件获得 的两次 独立测 定结 果的 绝对 差值 不得超 过算 术平 均值 的10%。3 DB37/T 30392017 A A 附 录 A（资料 性附 录）溴硝丙 二醇 标样 的色 谱图 图A.1 溴硝丙 二醇 标准 品的 色谱 图 _ 4