ICS 71.100.70 Y 42 DB37 山东省地方标准 DB37/T 30362017 化妆品中 邻苯二酚、间苯二 酚、对苯 二酚的测定 高 效液相色 谱法 Determination of o-benzenediol,m-benzenediol,p-benzenediol in Cosmetics by High Performance Liquid Chromatography 2017-10-25 发布 2017-11-25 实施 山东省质量技术监督局 发布 DB37/T 30362017 前 言 本标准 按照GB/T 1.12009 给出 的规 则起 草。本标准 由山 东省 质量 技术 监督局 提出。本标准 由山 东化 工标 准化 技术委 员会 归口。本标准 起草 单位：山 东省 产品质 量检 验研 究院、山 东省食 品药 品检 验研 究院。本标准 主要 起草 人：宿 书 芳、张 娟、刘睿、杨 昊、于文江、卢 兰香、薛 霞。I DB37/T 30362017 化 妆品中 邻苯二酚、间苯 二酚、对 苯二酚 的测定 高效液 相色谱法 1 范围 本标准 规定 了高 效液 相色 谱法测 定化 妆品 中邻 苯二 酚、间 苯二 酚、对苯 二酚 的方法。本标准 适用 于染 发类 化妆 品中邻 苯二 酚、间苯 二酚、对苯 二酚 的测 定。本标准 检出 限对 苯二 酚1 mg/kg，间 苯二 酚1 mg/kg，邻 苯 二酚2 mg/kg。2 规范性 引用 文件 下 列 文件 对于 本文 件的 应用 是 必不 可少 的。凡是 注日 期 的引 用文 件，仅所 注日 期 的版 本适 用于本文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 6682 分析 实验 室用 水规格 和试 验方 法。3 原理 用甲醇 提取 样品 中的 苯二 酚，经 反相 色谱 分离 后，二极管 阵列 检测 器检 测，依据保 留时 间定 性，峰面积定 量。4 试剂和 材料 除非另 有说 明，所有 试剂 均为分 析纯，水 为GB/T 6682规 定的 一级 水。4.1 甲醇（色谱 纯）。4.2 乙腈（色谱 纯）。4.3 三种苯 二酚 类物 质标 准品：邻苯 二酚、间 苯二 酚、对苯二 酚，纯度 均大 于 95%。4.4 标准储 备溶 液：分别 准确 称取适 量邻 苯二 酚、间苯 二酚、对苯 二酚 标准 物质（精确 至 0.0001 g），用甲醇 溶解，配 置成 浓度 为1 mg/mL 的标 准储 备溶 液，4 避 光保 存。4.5 混合标 准工 作溶 液：分别 依次准 确移 取邻 苯二 酚、间苯二 酚、对苯 二酚 标准 储备溶 液（4.4）2.00 mL、于 10 mL 容量 瓶中，加 甲醇至 刻度。混 合标 准工 作溶液 中邻 苯二 酚、间苯 二酚、对苯 二酚 的含 量分别为200 g/mL。依次 移取该 标 准溶液 0.5 mL、1.00 mL、2.00 mL、5.00 mL 于 10 mL 容量 瓶中，用 甲醇 定 容至 刻度。得到 混合 标准 工 作溶 液中 邻苯 二酚、间苯 二 酚、对 苯二 酚的 浓度 分别 为 10 g/mL、20 g/mL、40 g/mL、100 g/mL。4.6 微孔滤 膜：有机 相，0.45 m。5 仪器和 设备 5.1 高效液 相色 谱仪：具 二极 管阵列 检测 器。5.2 超声波 清洗 器。5.3 高速离 心机：最 大转 速 10000 r/min。1 DB37/T 30362017 5.4 涡旋混 合器。5.5 电子天 平，精度 为 0.0001 g。6 分析步 骤 6.1 样品制 备 称取约1g（精 确至0.0001 g）试 样于10 mL比色 管中，加 甲醇8.00 mL，于 漩涡 混合器 上漩 涡至 混合均匀，超声提 取20 min，待试样 溶液冷 至室 温，用 甲醇定 容至10 mL。于8000 r/min 离心10 min，上清液经0.45 m滤膜（4.6）过 滤，作 为待 测溶 液。6.2 标准工 作曲 线 将标准 工作溶 液（4.5），按照浓 度由低 到高 的顺序 进样测 定，以 待测 物质的 浓度为 横坐标，对 应色谱峰 的峰 面积 为纵 坐标，绘制 标准 工作 曲线。标 样谱图 见附 录A。6.3 测定 6.3.1 推荐色 谱条 件 推荐色 谱条 件如 下：色谱柱：C 18 柱，150 mm4.6 mm(i.d.),5 m，或 性能相 当者；流 动 相：流动相 A（乙 腈），流动相 B（水），梯度 见 附录 B；流速：1.0 mL/min；柱温：35；进样体 积：10 L；检测波 长：278 nm。6.3.2 样品测 定 取10 L 待测 试液（6.1）注入 液 相色 谱仪，以保 留时间 定 性，根 据目 标物 的峰面 积 从工作曲 线上 查取对应 的浓 度，计算 样品 中邻苯 二酚、间 苯二 酚、对苯二 酚的 含量。7 结果计 算 7.1 按式（1）计算 试样 中邻 苯 二酚、间苯 二酚 或对 苯二 酚的含 量：1000 mc=VX.(1)式中：X 试样 中待 测物 质的 含量，单位 为克 每千 克(g/kg)；c 试样 中邻 苯二 酚、间苯二 酚或 对苯 二酚 的浓 度，单 位为 微克 每毫 升（g/mL）；V 定容 体积，单 位为 毫升(mL)；m 试 样质 量，单位 为克(g)。7.2 计算结 果保 留两 位有 效数 字。8 精密度 2 DB37/T 30362017 同一样 品在 重复 性条 件下 获得的 两次 独立 测定 结果 的绝对 差值 不得 超过 算术 平均值 的10%。3 DB37/T 30362017 A A 附 录 A（资料 性附 录）标样的 色谱 图 图A.1 标样色 谱图 4 DB37/T 30362017 B B 附 录 B（资料 性附 录）流动相 梯度 表 表B.1 流动相 梯度 表 保留时间 t/min 流动相 A（乙腈），%0 5 9 10 11 25 15 25 20 5 30 5 _ 5