ICS 65.020.40B 64黑 龙 江 省 地 方 标 准DB23 DB23/T 2370 2019花楸无性繁殖配套技术规程2019-06-05发布 2019-07-04实施黑龙江省市场监督管理局发 布DB23/T 2370 2019I前 言 本标准依据GB/T 1.12009的编写规则起草。本标准由黑龙江省林业和草原局提出并归口。本标准起草单位：黑龙江省林业科学研究所、黑龙江省森林植物园。本标准主要起草人：张妍妍、卢慧颖、张文达、吕跃东、朱万才、白卉、田新华、邢亚娟、李长海、徐英华、白吉福、韩贤波、黄俊杰、李念森、毛洪波、于晓杰、于腊梅。DB23/T 2370 20191花楸无性繁殖配套技术规程 1 范围 本标准规定了花楸(Sorbus)的组织培养、嫩枝扦插技术和生产档案。本标准适用于花楸的无性繁殖配套生产。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6001 育苗技术规程 LY/T 1882 林木组织培养育苗技术规程 3 组织培养 3.1 培养条件 培养基的制备均采用常规的配制方法，按照LY/T 1882的规定执行。在121下高压蒸汽灭菌20min。并按试验设计要求添加不同的激素。继代培养时，光源采用日光灯，光强为3000lx，光照10h/黑暗14h。培养温度为2428。3.2 外植体采集及处理 3.2.1 休眠芽 每年的1月3月，选取5cm10cm花楸优树健壮无病虫害带芽枝条。采集后即可在室温下水培催芽，2d 换一次清水，水培温度宜为 2025，待休眠芽膨大萌发至 2cm3cm，即可接种。3.2.2 萌动芽 取材时间宜在每年5月初，顶芽和腋芽刚刚萌动至2cm3cm，流水冲洗2h后备用接种。3.3 外植体灭菌 将处理后的外植体在超净工作台上先用 75%乙醇消毒 10s20s，再用 0.1%的氯化汞溶液进行表面灭菌4min，无菌水冲洗3次4次即可备用。3.4 诱导培养 将灭菌处理后的嫩芽，在超净工作台中，剪去基部，保留芽长 1.0cm2.0cm，竖直插入诱导培养基 MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.05 mg/L内 0.5cm左右，琼脂 6g/L，蔗糖 30 g/L，pH值 5.86.0。每瓶宜接种 3个5个芽，10d20d后形成丛生芽。3.5 继代增殖培养 DB23/T 2370 20192将诱导后的丛生芽，转到 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L 增殖培养基中，其中琼脂6g/L，蔗糖 25g/L，pH 值 5.86.0。培养 20d 后，丛生芽基部即可平均生长出 4 个5 个不定芽。3.6 生根培养 剪取高度在 2.0cm以上的不定芽单株，转接到 1/2MS+IBA0.2mg/L生根培养基中，其中琼脂 6g/L，蔗糖 20g/L，pH 值 5.86.0。培养第 7d10d，形成不定根，培养 30d左右，获得完整再生植株。3.7 移栽与管理 选取苗高约 3.0cm5.0cm左右的花楸生根苗，用清水将其根部培养基洗净，在 0.1%高锰酸钾溶液中速蘸灭菌后栽培到基质中。花楸生根苗移栽基质为腐殖土+珍珠岩+蛭石（1:1:1）。浇足定根水，移栽至棚室内扣小棚，育苗水分管理按照 GB/T 6001 的规定执行。温度控制在 282，湿度控制在 75%5%，应定期喷水保持基质湿度。移栽后，适时施肥，及时除草。4 嫩枝扦插技术 4.1 材料选取 每年6月,采集当年生的生长健壮、无病虫害的半木质化枝条，剪取直径在0.3cm0.5cm、长15cm左右、带有一个以上腋芽及叶片的茎段为插穗。剪口应光滑，上斜下平。本着随采随插的基本原则，如果不能及时扦插，应保湿保鲜、当天扦插。4.2 激素处理 用多菌灵溶液将插穗洗净，嫩枝扦插时应用的激素为IBA+NAA（1:1）500 mg/L，采用速蘸的方式进行激素处理。4.3 扦插 嫩枝扦插基质选用沙子+草炭土（1:1），使用前经0.5%高锰酸钾消毒。插前向基质表面喷一次水，将插穗插入基质中2cm3cm。插后将基质按实并立即喷水保湿。4.4 温湿度条件 扦插后，定时定量喷雾，空气湿度保持在90%左右，温度控制在35以下。4.5 扦插管理 育苗盘用塑料薄膜密封，摆放整齐搭好棚，生根后，待新梢长至1.0cm后，逐渐放风直至完全揭去拱棚，去棚后定期进行人工雾状喷水保湿。5 生产档案 应建立生产档案，内容包括：培养条件、外植体的采集与处理、外植体灭菌、外植体诱导培养、继代增殖培养、生根培养、移栽与管理、嫩枝扦插材料选取、激素处理、扦插、温湿度条件、扦插管理。DB23/T 2370 20193