ICS 65.020.01 B 10 备案号：59984-2018 DB15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 1475 2018 加速溶剂 萃取-液相 色谱串联 质谱法 测定土壤 中13 种除 草剂残留 量 Detection of 13 herbicide residues in soil by ASE-LC-MS-MS 2018-08-15 发布 2018-11-15 实施 内 蒙 古 自 治 区 质 量 技 术 监 督 局 发布 DB15/T 14752018 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本标准由内蒙古自治区农牧业科学院提出。本标准由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（SAM/TC20）归口。本标准起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、赤峰市农畜产品质量安全监督站。本标准起草人：张欣昕、张福金、姚一萍、李国银、张三粉、王文曦、连海飞、刘广华、刘建平、邵海。DB15/T 14752018 1 加速溶剂 萃取-液 相色谱串 联质谱 法 测定土壤 中13 种 除草剂残 留量 1 范围 本标准规定了土壤中砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁草胺、异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于土壤中砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁草胺、异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆残留量的测定。2 规范性 引用 文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 NY/T 52 土壤水分测定法 NY/T 1121.1 土壤检测 第1部分：土壤样品的采集、处理和贮存 3 原理 用2%的甲酸乙腈溶液，通过快速溶剂萃取土壤样品中的砜嘧磺隆等13种除草剂，经液相色谱-串联质谱仪进行测定，外标法定量。4 试剂和 材料 4.1 除另有规定外,所有试剂均为分析纯,实验用水应符合 GB/T 6682 一级水的标准。4.2 乙腈：色谱纯。4.3 甲酸：色谱纯。4.4 2%甲酸乙腈溶液（体积分数）：取 2.0 mL甲酸加乙腈稀释至100 mL。4.5 0.1%甲酸溶液（体积分数）：0.1 mL甲酸加水稀释至 100 mL。4.6 0.1%甲酸水-乙腈溶液（90+10，体积比）。4.7 标准 品 砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁草胺、异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆标准品：纯度均大于 98%。4.8 标准溶 液 DB15/T 14752018 2 4.8.1 标准储 备液 准确称取适量的砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁草胺、异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆标准品，用甲醇分别配制成100 g/mL的标准储备液，保存于-18 冰箱内，可使用6个月。4.8.2 混合标 准储 备 液 分别准确吸取1.00 mL 砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁草胺、异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆标准储备液至10 mL容量瓶内，用甲醇稀释至刻度，配制成10 mg/L的混合标准储备液，于-18 冰箱内避光保存，可使用3个月。4.8.3 基质混 合标 准工 作液 根据需要，用阴性样品基质系列稀释混合标准工作液，使用前临时配制。4.9 硅藻土：二氧化硅含量大于 90%，密度2.0 g/cm3 2.3 g/cm3。4.10 微孔过滤膜（尼龙）：13 mm 0.2 m。5 仪器和 设备 5.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。5.2 加速溶剂萃取仪：配有 34 mL 萃取池。5.3 分析天平：感量0.01 mg和0.01 g。5.4 旋转蒸发仪。5.5 涡旋混合器。6 试样制 备 按照NY/T 1121.1 中有关规定采集土壤,去杂质后充分混匀,保存在-18 冷冻冰箱中。按照NY/T 52 标准要求，取新鲜土壤，1052 烘干冷却称重，测定土壤的水分含量（a）,再计算土壤换算至烘干的水分换算系数F（F=1-a）。7 测定步 骤 7.1 提取 称取10 g新鲜土壤试样(精确到0.01 g)与10 g硅藻土（4.8）充分混匀后，移入加速溶剂萃取仪的34 mL萃取池中，设定加速溶剂萃取仪萃取条件：萃取溶剂为2%甲酸乙腈溶液（4.3），80 加热，静态萃取时间5分钟，循环次数2次，冲洗体积为60%，氮气吹扫100 s。提取结束后，提取液转移至250 mL梨形瓶中，在40 水浴中，旋转浓缩至近干，用5.00 mL 0.1%甲酸水-乙腈溶液（4.4）定容，过0.2 m微孔过滤膜后，待测。7.2 阴性样 品提 取液 的制 备 DB15/T 14752018 3 取不含待测物的阴性马铃薯和土壤样品，按7.1步骤制备阴性样品提取液，用于配制基质混合标准工作液。7.3 测定 7.3.1 液相色 谱-串联 质谱 法测 定 条件 具体如下：a)色谱柱：C18，100 mm 2.1 mm（内径），粒径 1.7 m；b)流动相：0.1%甲酸溶液（4.5），B：乙腈（4.1），梯度洗脱见表1；表 1 梯度 洗脱 表 时间/min 流速/（mL/min）A/%B/%0.00 0.35 95 5 1.00 0.35 70 30 3.00 0.35 20 80 4.00 0.35 5 95 6.60 0.35 95 5 10 0.35 95 5 c)柱温：40；d)进样量：1 L；e)离子源：电喷雾电离（ESI）；f)扫描方式：正离子扫描模式；g)检测方式：多反应监测（MRM）；h)电离电压：2500 V；i)离子源温度：120；j)雾化温度：450；k)锥孔气流速：50 L/h；l)雾化气流速：650 L/h；m)待测物保留时间、定性定量离子对及锥孔电压、碰撞能量见表 2。表2 13 种 除草 剂保 留时 间、定 性 定量 离子 对及 锥孔 电压、碰撞 能量 待测物名称 保留时间 min 定性离子对 m/z 定量离子对 m/z 锥孔电压 V 碰撞电压 V 烟嘧磺隆 2.36 411.21182.04411.21213.21 411.21182.04 20 15 10 氯磺隆 2.75 358.04140.91358.04166.85 358.04140.91 12 18 16 砜嘧磺隆 2.71 431.99181.97431.99325.20 431.99181.97 25 25 25 苯磺隆 3.62 413.12147.92413 413.12147.92 24 32 DB15/T 14752018 4.12371.97 12 表2（续）待测物名称 保留时间 min 定性离子对 m/z 定量离子对 m/z 锥孔电压 V 碰撞电压 V 扑草净 2.91 242.14157.89 242.14115.76 242.14157.89 52 22 28 莠去津 2.91 216.16174.09 216.16104.20 216.16174.09 40 20 20 嗪草酮 2.65 214.98187.03 214.98130.99 214.98187.03 10 15 20 甲草胺 3.61 286.27253.97286.27176.02 286.27253.97 12 18 22 乙草胺 3.61 270.07147.93270.07237.96 270.07147.93 12 18 10 丁草胺 4.29 312.12162.04312.12238.15 312.12162.04 25 20 20 异丙草胺 3.82 284.15223.97 284.15148.00 284.15223.97 25 10 15 二甲戊乐灵 4.32 282.11211.91 282.11117.90 282.11211.91 16 14 18 异丙甲草胺 3.61 284.01252.00284.01175.95 284.01252.00 16 12 24 7.3.2 定性测 定 在相同实验条件下进行样品测定时，如果样品中待测物质的色谱峰保留时间与标准品色谱峰保留时间相差在 2.5%以内，且样品色谱图中定性离子的相对离子丰度与浓度相近的基质标准工作液色谱图中对应的定性离子相对丰度进行比较，相对偏差不超过表3 规定的范围，则可判定样品中存在该种待测物。表 3 定性 确证 时相 对离 子 丰度的 最大 允许 误差（%）相对离子丰度 K 50 20K50 10K20 K10 允许最大偏差 20 25 30 50 7.3.3 定量测 定 在仪器最佳工作条件下，对基质混合标准工作液（4.8.3）进行色谱分析，以峰面积为纵坐标，基质混合标准工作液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，基质混合标准工作液和试样中响应值均应在仪器测定的线性范围内。在上述色谱和质谱条件下，基质混合标准工作液中的各特征离子多反应监测（MRM）色谱图参见附录A中的图A.1。7.4 平行试 验 按上述步骤，对同一试样进行平行试验测定。DB15/T 14752018 5 7.5 空白试 验 除不称取试样外，均按上述分析步骤进行。8 结果计 算 试样中待测组分的测定结果可由仪器工作软件计算，也可按式（1）计算：FmVc X 10001000（1）式中：X 试样中待测组分残留量，g/kg；c 从标准曲线得到的试样中待测组分的浓度，g/L；V 试样溶液定容体积，mL；m 试样的质量，g；F 土壤水分换算系数；计算结果应扣除空白值，保留两位有效数字。9 检出限、回 收率 和精 密度 9.1 检出限 砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁草胺、异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆在土壤中的检出限和定量限参见附录B中的表B.1。9.2 回收率 在10 g/kg200 g/kg 添加浓度范围内，本标准土壤试样中砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁草胺、异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆残留量的平均回收率参见附录C中的表C.1。9.3 精密度 在实验室内重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算数平均值的10%，在实验室间再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算数平均值的20%。DB15/T 14752018 6 附 录 A（资料 性附 录）13种除 草剂 多反 应监 测（MRM）色 谱图 13种除草剂多反应监测（MRM）色谱图A.1如下：1.砜嘧磺隆 2.氯磺隆 3.扑草净 4.莠去津 5.苯磺隆 6.甲草胺 7.丁草胺 8.异丙草胺 DB15/T 14752018 7 图A.1 13 种 除草 剂多 反应 监测（MRM）色 谱图 9.二甲戊乐灵 10.异丙甲草胺 11.烟嘧磺隆 12.乙草胺 13.嗪草酮 图A.1 13 种除 草剂 多反 应 监测（MRM）色 谱图（续）DB15/T 14752018 8 附 录 B（资料 性附 录）13种除 草剂 检出 限和 定量 限 数据 表 13种除草剂检出限和定量限数据表见表B.1。表B.1 13 种除 草剂 中文 与 英文名 称、方法 检出 限和 定量限 数据 序号 中文名称 英文名称 检出限 g/kg 定量限 g/kg 1 砜嘧磺隆 rimsulfuron 0.4 4.0 2 氯磺隆 chlorsulfuron 1.0 10 3 扑草净 prometryne 1.0 10 4 莠去津 atrazine 2.4 24 5 苯磺隆 tribenuron-methyl 3.0 30 6 甲草胺 alachlor 10 100 7 丁草胺 butachlor 6.0 60 8 异丙草胺 propisochlor 3.5 35 9 二甲戊乐灵 pendimethalin 9.0 90 10 异丙甲草胺 metolachlor 5.0 50 11 烟嘧磺隆 nicosulfuron 3.0 30 12 乙草胺 acetochlor 1.0 10 13 嗪草酮 metribuzi 0.5 5.0 DB15/T 14752018 9 附 录 C（资料 性附 录）13种除 草剂 平均 回收 率 数 据表 13种除草剂平均回收率数据表见表C.1。表C.1 13 种除 草剂 平均 回收率 数据 序号 名称 添加浓度 g/kg 平均回收率%添加浓度 g/kg 平均回收率%1 砜嘧磺隆 20 82.0 100 97.6 2 氯磺隆 20 75.3 100 91.6 3 扑草净 20 88.3 100 93.0 4 莠去津 20 89.7 100 96.8 5 苯磺隆 20 84.0 100 85.0 6 甲草胺 20 82.3 100 88.0 7 丁草胺 20 83.1 100 89.2 8 异丙草胺 20 86.2 100 93.6 9 二甲戊乐灵 20 72.5 100 73.0 10 异丙甲草胺 20 95.2 100 93.6 11 烟嘧磺隆 20 91.2 100 93.6 12 乙草胺 20 87.3 100 92.0 13 嗪草酮 20 88.0 100 88.2