ICS 65.020.20 CCS B 31 DB 42 湖北省地方标准 DB42/T 1687 2021 萝卜根肿 病抗性种 质鉴定技 术规程 Code of practice for radish germplasm resistance to clubroot disease 2021-05-12 发布 2021-07-12 实施 湖 北 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB42/T 1687 2021 I 目 次 前言.III 1 范围.1 2 规 范性 引用 文件.1 3 术 语和 定义.1 4 接 种前 准备.1 4.1 接种 体制 备.1 4.2 培养 土制 备.1 4.3 鉴定 材料 制备.1 5 接 种方 法.1 5.1 接种 时期.1 5.2 接种 浓度.2 5.3 鉴定 条件 设置.2 5.4 鉴定 对照.2 5.5 鉴定 设计.2 5.6 接种 方法.2 6 接 种后 管理.2 7 病 情调 查.2 7.1 调查 时间.2 7.2 病情 分级.2 7.3 病情 指数 计算 方法.2 8 抗 病性 评价.3 8.1 抗病 性评 价标 准.3 8.2 鉴定 结果 的有 效性 判 别.3 附录A（资 料性）萝卜 根肿病 病原 菌.4 DB42/T 1687 2021 III 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标准 化工 作导则 第1 部分：标准化 文件 的结构 和起草 规则 的规 定起草。请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利。本文 件的 发布机 构不 承担 识别 这些 专利的 责任。本 文件 由湖 北省 农业 科学 院提出。本文件 由湖 北省 农业 农村 厅归口。本 文件 起草 单位：湖 北省 农业科 学院 经济 作物 研究 所，鹤 峰县 蔬菜 办公 室。本 文件主要起草人：甘彩 霞、邓晓 辉、崔 磊、於校 青、黄云、张成、宋 志红、孟 祥生、周青 龙、龙志华、王丽 娅、胡阳、蔡 美仲、张友 华、艾姝 智。本 文件实 施 应 用 中 的 疑 问，可 咨 询 湖 北 省 农 业 农 村 厅，联 系 电 话：027-87665821，邮 箱：；对 本文件 的有关 修改 意见 建议 请反 馈至湖 北省 农业 科学 院经 济作物 研究 所，联系 电话：027-87380819，邮箱：。DB42/T 1687 2021 1 萝 卜根肿 病抗性种 质鉴定 技术规程 1 范围 本 文件 规定 了萝 卜（Raphanus sativus L.）抗 根肿 病（Plasmodiophora brassicae Woron.）抗性种质鉴 定技 术中 的术 语与 定义、接种 体制 备、接种 方法、病情 调查 和 抗 性评 价等进 行了 规范。本 文件 适用 于湖 北地 区萝 卜种质 抗根 肿病 的鉴 定及 评价。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款。其 中，注日 期的 引用 文件，仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件；不注 日期 的引 用文件，其 最新 版本（包 括所有 的修 改单）适 用 于 本文件。NY 525 有 机肥 料 DB42/T 1106 萝 卜抗 黑腐 病种质 鉴定 技术 规程 3 术语和 定义 DB42/T 1106 界 定的 术语 和 定义适 用于 本文 件。4 接种 前 准备 4.1 接种体 制备 接种鉴 定量 小时 采集 发病 萝卜根 部根 瘤进 行接 种；接种鉴 定量 大时，采集 大 白菜根 瘤进 行接 种。采集发病 萝卜/大 白菜 根部 根 瘤冲洗 干净，用 塑料 膜包 裹沤烂 并捣 碎，用净 水冲 洗根肿 菌孢 子并 用8 层纱 布过滤备 用；根肿 菌浓 度测 定采用 血球 板进 行显 微镜 检计数；根 肿菌 采用 超低 温冰箱 保存 的样 本解 冻 后 研磨使用。4.2 培养 土 制备 供试培养 土取 灭 过菌 的土 壤，过 筛，加 入有 机肥混 匀，应 符合NY 525 的要 求。将接种 土装 入32 孔深孔穴盘（53 cm 27 c m6 cm）中 备用。4.3 鉴定 材 料制 备 鉴定 鉴 定材料种 子经5%次氯酸钠 溶液浸种10 min 后，用清 水冲洗，放入垫 有两层滤 纸的培养皿中，然后于 恒温 培养 箱中28 催芽。种子 露白 时，播于 装有基 质的 穴盘 中。5 接种方 法 5.1 接种时 期 萝卜种 子萌 发出 芽后 和幼 苗两叶 一心 期，两个 时期 各接种 一次。DB42/T 1687 2021 2 5.2 接种浓 度 宜为 1 108个孢子/mL。5.3 鉴定 条 件设 置 接种宜 在大 棚进 行，土壤 保持湿 润，温度 保持 在18 25。5.4 鉴定对照 鉴定 时 设雪 单一 号、白玉 春 等 萝卜 为抗病 对照品 种，喜诺 青、301 等萝 卜为 感 病对照品 种。5.5 鉴定设计 鉴定材 料随 机区 组排 列，3 次重复，4 4孔 为一 个重 复。5.6 接种方 法 播种后，种子萌发出芽 具 两片 子叶时，采用灌根 法 沿苗根部浇灌10 mL菌液进 行接种；待幼苗长 到两叶一 心时，在 距植 株根 颈2 cm 半径 范围 内浇 灌10 mL菌液 再次 接种。6 接种后 管理 保 持鉴 定环 境温度 在18 25 之 间；光照强 度不 低于10000 Lux，日照/黑 暗处 理为16 h/8 h；土壤相 对湿 度80%以 上，不 能渍水 或过 干，尤其 忌忽 干忽湿，两 次接 种同 样管 理。7 病情调 查 7.1 调查时 间 两叶一 心期 接种 后 第7周调 查病情。7.2 病情分级 病情分 级及 其对 应的 症状 描述见 表1。表1 萝 卜根 肿病 病情 级别 划分 病情级别 症状描述 0 根部没有根瘤 1 侧根或主根有轻微根瘤，1/3 1/2的侧根和须根上有根瘤 2 侧根或者主根有较大根瘤，1/2 2/3的须根和侧根上有不规则 根瘤 3 主根上有明显大块的根瘤，2/3 以上的须根和侧根上有较大不规则 4 根瘤组织发黑开始腐烂或者植株死亡 7.3 病情指 数 计 算方 法 调查每 份鉴 定材 料根 部发 病情况，根 据病 害症 状描 述，逐 份材 料进 行调 查，记载病 情级 别，计算 出病情指 数(DI)。DB42/T 1687 2021 3 病情 指数 按公 式计 算：=（）100 式中：DI 病情 指数；S 各病 情级 别代 表数 值；n 各病 情级 别病 株数；N 调查 总株 数；S 最高 病情 级别 代表 值。8 抗病性 评价 8.1 抗病性 评价 标准 依据鉴 定材 料的 发病 程度（病情 指数）确 定其 对萝 卜根肿 病的 抗性 水平，划 分标准 见 表2。表2 萝卜 黑腐 病抗 性评 价 标准 病情指数 抗性评价 0 免疫（I）0 DI5 高抗（HR）5 DI30 抗病（R）30 DI 60 感病（S）DI 60 高感（HS）8.2 鉴定 结 果的 有效 性判别 当感病 对照 的病 情指 数DI 50，该批 次的 抗病 性鉴 定结果 即为 有效。DB42/T 1687 2021 4 A A 附录A（资料 性）萝卜根 肿病 病原 菌 A.1 学名 芸薹根肿 菌（Plasmodiophora brassicae Woron.），为原生 动物 界根肿 菌门 根肿菌纲 根肿 菌目根肿菌科 根肿 菌属 芸苔 根肿 菌。A.2 为害 部 位及 症状 主要发 生在 根部，通 常苗 期即可 受害，严 重时 幼苗 枯死。成株 受害 初期 地上 部症状 不明 显，而后 生长逐渐 迟缓、矮 小并 表现 缺水症 状，基部 叶片 常在 中午萎 蔫，早晚 恢复，后 期基部 叶片 发黄、枯 萎、严重时全 株枯 死。发病 植株 根部细 胞因 受病 菌刺 激而 加速分 裂，部分 细胞 膨大，最终 形成 肿瘤。根 肿 肿 瘤一般为 纺锤 形、手指 形、不规则 形，主根 上的 肿瘤 个大而 数量 少，侧根 上的 个小而 数量 多。肿瘤 初 期 表面光滑，后 期常 发生 龟裂、粗糙，易 被其 他杂 菌侵 入而引 起腐 烂。A.3 生物学 特性 根肿菌 以休 眠孢 子囊 在土 壤中越 冬，其可 在土 中存 活5年 8年，孢 子囊 借雨 水、灌 溉水、害 虫及农事操作 等传 播，也可 粘附 在种子 表面 上，随着 播种 进行传 播，但种 子内 部一 般不携 带根 肿菌。休 眠 孢 子囊在12 27 均 可萌 发，适 宜温 度24，适 宜相 对湿度 为98%，土壤 含水 量 低于45%时 病菌 死亡，适宜pH值6.2，pH 值8以 上发 病少。休眠 孢子 囊萌 发产 生游动 抱子 侵入 寄主，经15 天20 天 开始 显病。十 字花科蔬 菜各 生育 期均 会感 染根肿 病，发病 的早 晚、轻重与 当年 的温 度、降雨 和土壤 的酸 碱度 等有 关。一般阴蔽 潮湿 的低 洼田 发病 较干燥 向阳 地块 重；适期 播种田 发病 较重，而 适当 延迟播 种期 可减 轻病 害 的 发生；病 菌侵 染莲 瘤芥 植株 越早为 害越 重，无病 菜苗 显著轻 于有 病菜 苗定 植大 田的发 病程 度；同时，不 同的品种 抗病 程度 不同。A.4 湖北省 根肿 菌生 理小 种 2012 年 汪维红 等根 据被鉴 定的根 肿病菌 对4个Williams 鉴别 寄主的 抗性 反应类 型，鉴 定长阳 县贺 家坪的大 白菜 根肿 病菌 为4 号 生理小 种。A.5 鉴定记 载表 格 萝卜根 肿病 鉴定 结果 记载 内容见 表A.1。DB42/T 1687 2021 5 表A.1 萝卜根 肿病 抗病 性鉴 定结 果记载 内容 编号 品种名称 来源 病情级别 病情指数 平均病指 抗性评价 0 级 1 级 2 级 3 级 4 级 备注 1.播种日期：2.播种地 点：3.根肿菌生理小种类型：4.接种时 间：5.调查日期：鉴定技 术负责人（签字）：