ICS 65.020.01 CCS B23 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 21552021 马铃薯黑 痣病田间 抗性鉴定 技术规程 Technique standards for resistant identification of stem canker and black scurf by Rhizoctonia solani in potato in fields 2021-04-15 发布 2021-05-15 实施 内蒙古自治 区市场 监督管理 局 发 布 DB15/T 21552021 I 前 言 本文件 按照GB/T 1.12020 标准 化工 作导则 第1 部分：标准化 文件 的结构 和起草 规则 的规 定起草。本文件 由内 蒙古 自治 区马 铃薯生 产与 种植 标准 化技 术委员 会（SM/TC42）归口。本 文 件起 草单 位：内 蒙古农 业 大学、中国 农业 科学院 农 业资 源与 农业 区划 研究 所、兴安 盟农 牧业 科学研究 所。本 文 件主 要起 草人：张笑宇、于 卓、李得 宙、于肖 夏、卢艳 丽、尤艳 华、张冬 梅、李宇 晨、刘雨 薇、王野、冯亚 艳、王丽 玮、修志君、宋 亚迪、邢 星。DB15/T 21552021 1 马 铃薯黑 痣病田间 抗性鉴 定技术规 程 1 范围 本文件 规定 了田 间马 铃薯 抗黑痣 病鉴 定材 料的 选择 与鉴定 方法。本文件 适用 于马 铃薯 黑痣 病田间 抗性 鉴定。2 规范性 引用 文件 本文件 没有 规范 性引 用文 件。3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。3.1 马 铃薯黑 痣病 black scurf of potato 由丝核 菌侵 染马 铃薯 引起 的一种 病害，症状 为在 幼 芽、匍匐 茎及 地下 茎上 出 现褐色 坏死 斑，影 响幼苗、匍匐 茎和 地下 茎的 生长，严重 的引 起烂 芽，造成 匍 匐茎 和地 下茎 生长 势减 弱 甚至 死亡；在块茎表面形成黑 色菌 核，称为 黑痣。3.2 马 铃薯蔗 糖琼脂 培养基 Potato-Saccharose-Agar（PSA）主要用 于普 通真 菌的 培养。4 鉴定材 料 4.1 马铃薯 抗病对 照品 种底 西芮、感 病对照 品种 大西 洋、被鉴 定材料。4.2 病原菌 取 自 内蒙 古马 铃薯 主产 区黑 痣 病发 病植 株，经病 原菌 分 离，致病 性测 定和 鉴定 得 到的 黑痣 病致病菌株，于4 的 冰箱 保存。4.3 培养基 PSA培养 基。5 鉴定方 法 DB15/T 21552021 2 5.1 PSA 培养 基平 板制 备 将马铃 薯去 皮切 成1 cm3 左右 的 小块，取200 g加入1000 mL 蒸馏 水，在容 器内 煮沸20min左右，至 马铃薯块 软而不 烂时，用2 层 纱布过 滤，滤 液加 入琼脂 粉15 g 18 g，加 热搅拌 至融化，再加 蔗糖20 g 搅拌溶解，然后 定容 至1000 mL，分 装到三 角瓶 内，121 高压 湿热 灭菌20 min，冷却至 室温倒 入培 养皿内，制 成PSA 平板。5.2 病原菌 活化 将保存 的黑 痣病 病原 菌接 种在PSA 培养 基平 板中 央，置25 恒温 培养 箱中 黑暗培 养4 d。5.3 接种体 的制 备 100 g麦麸 加200 mL 蒸馏 水 搅拌均 匀，装 入500 mL的 三角瓶 中，121 高 压 灭菌40 min，冷却 后每瓶接种 活化后 的病 原菌菌 饼10片（直径0.8 cm），置25 恒 温培 养 箱中 黑暗培 养30 d，直至 产生 大量菌丝和 菌核，取 出晾 干，搓成粉 末，混匀 备用。5.4 田间鉴 定 取马铃 薯黑 痣病 菌接 种体2 g4 g，接种 在播 种穴 内，然后 播种 覆土。按 照常 规的马 铃薯 栽培 模式进行管 理，采用 滴灌 或喷 灌的灌 溉方 式，避免 大水 漫灌。重复2年。5.5 地下茎 病情 调查 和抗 性评 价 在播种 后55 d60 d，对 地 下茎发 病情 况进 行调 查，每个品 种调 查20 株，重复3 次。按 照表1的分 级标准调 查病级，计 算发病 率、病 情指数 和相 对抗病 指数，用相对 抗病 指数进 行抗性 评价，见表2，感病对照品 种大 西洋 病情 指数 大于40 数 据有 效。表1 马铃薯 黑痣 病地 下茎 病情 分级标 准 级别 代号 茎部病斑面积占地下茎面积的比例（%）1 0 0 2 1 1 5 3 2 6 25 4 3 2650 5 4 5175 6 5 76100 计算公 式：发病率（%）=发病 植株 数/调查植 株总 数100 病情指 数=（各级 病薯 数 各级 代表 值）/（调 查总薯 数 最 高一 级代 表值）100 相对抗 病指 数=1-所测 品种病 情 指数/发病 最重 品种 病 情指数 DB15/T 21552021 3 表2 相对抗 病指 数评 价标 准 分级 相对抗病指数 抗性评价 1 1.00 免疫（I）2 0.990.80 高抗（HR）3 0.790.60 中抗（MR）4 0.590.40 中感（MS）5 0.390.00 高感（HS）5.6 块茎病 情调 查及 抗性 评价 马铃薯 成熟收 获后，在阴 凉处放 置2 d，使马 铃薯 块 茎上的 菌核干 燥，用清水 冲洗表 面泥土（清 洗时注意 不要 用手 搓，以防 菌核脱 落），按 表3 的分 级 标准调 查病 级，每个 处理 调查100 个块 茎，计算 病情指数和 相对 抗病 指数，利 用相对 抗病 指数 进行 评价，感 病对 照品 种大 西洋 病 情指数 大于40数据 有效。病情指数、相 对抗 病指 数计 算方法 同上，抗 性评 价方 法见表3。表3 马铃薯 黑痣 病块 茎病 情分 级标准 级别 代号 块茎表面菌核面积占块茎总面积的比例（%）1 0 0 2 1 1 3 2 1 10 4 3 1120 5 4 2150 6 5 51100