ICS 65.020.20 CCS B 05 黑龙江省地方标准 DB23 DB23/T 3129 2022 欧石竹组 培育苗技 术规程 2022-03-03 发布 2022-04-02 实施 黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB23/T 31292022 I 前 言 本 文件 依据 GB/T 1.1 2020 标 准化 工作 导则 第 1 部分：标 准化 文件 的 结构和 起草 规则 的 规定起草。请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利。本文 件的 发布机 构不 承担 识别 专利 的责任。本文件 由 黑 龙江 省农 业农 村厅提 出。本文件 起草 单位：东 北农 业大学。本文件 主要 起草 人：王金 刚、张 海珍、杨 雅涵、钮 志勇、乔坤、周 爱民、龚 束芳。DB23/T 31292022 1 欧 石竹组 培育苗技 术规程 1 范围 本文件规定了欧石竹（Dianthus carthusianorum L.）组培育苗的 环境与设备消 毒、培养基配制、外植体制 备、培养 条件、初 代培养、继 代培 养、壮苗 培养、生根 培养、炼 苗、温 室移栽 与管 理及 生产 档案。本文件 适用 于欧 石竹 的组 培育苗。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日 期的引 用文 件，仅注 日期 的 版本适 用于 本文 件。凡是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有 的修改 单）适用 于本 文件。GB/T 8321（所 有部 分）农药 合理 使用 准则 LY/T 1882-2010 林木 组 织培养 育苗 技术 规程 NY/T 1276 农药 安全 使 用规范 总则 NY/T 2306-2013 花 卉种 苗组培 快繁 技术 规程 3 术语 和 定义 本文件 没有 需要 界定 的术 语和定 义。4 环境 与 设备 消毒 4.1 接种 室消 毒 接种室 消毒 按 NY/T 2306-2013 中 8.6 进行。4.2 培养 室消 毒 培养室 消毒 按 NY/T 2306-2013 中 8.7 进行。4.3 超净 工作 台消 毒 超净工 作台 消毒 按 NY/T 2306-2013 中 8.5、8.6 进行。4.4 接种 器具 消毒 接种器 具消 毒 按 NY/T 2306-2013 中 8.4 进 行。5 培 养基 配制 5.1 母液 配制 培养基 母液 配制 按 NY/T 2306-2013 中 7.3 执行。DB23/T XXXX XXXX 2 5.2 培养 基配 制 5.2.1 培 养基 配方 培养基 配制 成分 如下：a)初代 培养 基：MS 蔗糖30 g/L 琼脂 粉8 g/L，pH 值5.8 6.0；b)继 代培 养基：MS 0.5 mg/L 6-BA 1.5 mg/L 2,4-D 0.1 mg/L NAA 蔗糖30 g/L 琼脂 8 g/L，pH 值5.8 6.0；c)壮苗 培养 基：1/2 MS 1.0 mg/L IBA 蔗糖30 g/L 琼脂粉8 g/L，pH 值5.8 6.0；d)生 根培 养基：1/2 MS 蔗糖30 g/L 琼脂 粉8 g/L，pH 值5.8 6.0。5.2.2 培 养基 配制 方法 培养基 配制 方法 按 NY/T 2306-2013 中 7.4 执行。5.3 培养 基灭 菌 及 保存 培养基 灭菌 及保 存方 法 按 LY/T 1882-2010 中 4.2 进行。6 外 植体 制备 6.1 外植 体选 择 选取当 年生 的嫩 茎作 为外 植体，宜晴 天剪 取。6.2 外植 体处 理 取 10 cm 的茎 段，流水 冲洗 3 h，在超 净工 作台 中，先 用 75%乙 醇溶 液消 毒 10 s 后，用 无菌 水冲洗 3 次，加 2%次 氯酸 钠溶液 消 毒 5 min，再用 无 菌水冲 洗 4 5 次，用滤 纸 吸干 外植 体表 面水 分。7 培 养条 件 无菌 培 养室 温度 控制 在21 25，相 对空 气 湿度控 制在60%80%，光 照强度 为2000 Lux 3000 Lux，光照时 间为12 h/d 14 h/d。8 初 代培 养 将 消毒 后的 外植 体 切 成 1 cm 2 cm 的茎段，每段 至 少带 有 1 个2 个 叶芽，将切好 的外 植体 接种到初代 培养 基中，培 养 21 d28 d。9 继 代培 养 将分化 的不 定芽 转接 入继 代培养 基中，6 个/瓶 10 个/瓶，培 养 28 d35 d，分割 新长 出的 不定芽，可 按需 求重 复继 代。10 壮 苗培 养 切取继 代培 养高 度 1.0 cm 的不定芽，转接 至壮 苗 培养基 中，6 个/瓶8 个/瓶，培 养 14 d21 d。DB23/T 31292022 3 11 生 根培 养 壮苗培 养基 中组 培苗 高度 2.0 cm 时，将小 苗转 入 生根培 养基 中 8 株/瓶 10 株/瓶。当 小苗 基部长出健 壮的 3 条不 定根，根长 为 0.5 cm 2.0 cm 时，可 进行 炼苗。12 炼苗 将生根 培养 组培 苗转 移到 过渡培 养间，半 开瓶 口1 d 2 d 后，敞开 瓶口 炼苗2 d 3 d 后可 移栽。13 温 室移 栽与 管理 13.1 基质 制备 将草炭 土和 蛭石 按体 积比 为1:1 混 合，装入50 孔的 穴盘中。栽植 前用 多菌 灵 可湿粉 剂0.5 g/L 溶液浇透消毒24 h。农 药使 用 应 符合GB/T 8321 和NY/T 1276 的规 定执 行。13.2 组培 苗移 栽 炼苗后 取出幼 苗,用清水 洗净根 部培养 基,将 幼苗栽 入淋透 水的基 质中，压实 小苗周 围的基 质，浇透水，覆70%遮 阳网。13.3 移栽 苗管 理 适时浇 水，保 持基 质湿 润；移栽5 d7 d 后，去 掉遮 阳 网，浇1/2 MS 营养 液1 次；温度控 制在20 28，空 气相 对湿 度60%80%。14 生 产档 案 应建立 生产 档案，内 容包 括：环 境与 设备 消毒、培 养基配 制、外植 体制 备、培养条 件、初代 培养、继代培 养、壮苗 培养、生 根培养、炼 苗、温室 移栽 与管理 等。