ICS 65S B 6 广 Tech n 2022-02 0.20 6 2 西 壮 n ical co-01-26 发 壮族金 花 de of p r 发 布 广西 壮 族 自 花 茶 组 r actice f(M 壮 族自治 区 自 治 组 织 培 f or tissM errill)区 市场监 督 区 培 养技ue cult u Sealy 督 管理局 地 D B 术规 程 u re of C a 发 布 45方 标 B 45/T 24 5 程 a melli a p 2022-0 布 5 标准5 6 202 2 p etelot i 0 2-28 实 准 2 ii 实 施DB 45/T 2 45 6 20 22 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引 用文件.1 3 术语和定 义.1 4 组织培养 方法.1 5 组培苗移栽.2 6 苗期管理.2 附录 A（资料 性）培养 基配方.4 附录 B（资料 性）金花 茶病虫害化学防治方法.5 DB 45/T 2 45 6 20 22 II 前言 本文件按照GB/T 1.12 0 20标准化工作导则 第1部分：标 准化文件的 结构和起草 规则的规 定 起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由广西壮族自治区林业局提出、归口并宣贯。本文件起草单位：广西壮族自治区林业科学研究院。本文件主要起草人：林茂、王华新、唐庆、杨舒婷、李进华、陈尔、孙利娜、孙开道、廖美兰、杜铃、黄欣、汪小玉。DB 45/T 2 45 6 20 22 1 金花茶组织培养技术规程 1 范围 本文件规定了金花茶（Ca me ll ia pe tel ot ii(Me rr i ll)S ea ly）组织培养的术语与定义、组织培养 方法、组培苗移栽以及苗期管理。本文件适用于广西区内金花茶的组织培养。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。GB/T 83 21(所有部分)农药合理使用准则 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。4 组织培养方法 4.1 无菌播种 4.1.1 种子采收 10月 12月 采收优良单株的成熟果实，选取粒大、饱满、未开裂、无霉变和虫害的种子。种子宜随 采随播，未及时播种的宜在5 8 下冰箱保湿冷藏。4.1.2 表面灭菌 种子先用0.1中性洗涤 剂水溶液浸 泡2 0 m in 3 0 min，然后在自来 水下流 水 冲 洗4 0 min 6 0 m in。在超净工作台上，将种子先用75 酒精浸泡40 s 60 s，无 菌水冲洗35 遍，再用0.1 氯化汞溶液浸泡 16 mi n2 0 m in，无菌水 冲洗35遍。4.1.3 种子处理及播种 种子放进盛有经高温高压灭菌锅灭菌河沙的组培瓶中，埋入无菌河沙中，倒少量无菌水，以无菌河 沙湿润为宜。4.1.4 外植体的获得 待种子萌发后，选择具有2片子叶、真叶尚未展开的无菌苗，切取子叶和胚轴作为外植体。DB 45/T 2 45 6 20 22 2 4.2 培养条件 各 培养 阶段 的培养 温度为 25，光 照 强度为 2 000 l x，光周 期1 4 h 1 6 h。4.3 愈伤组织诱导培养 将 子 叶 和 胚轴接入愈伤 组织 诱 导培养基(参见 附 录A中的A.1)上 进 行诱 导培养，培养3 0 d 3 5 d。4.4 愈伤组织分化培养 将胚 性 愈伤 组织 接入 分化培养基(参见 附录A中的 A.2)上 进 行 培养，培养3 0 d 3 5 d。4.5 生根培养 从 分化培养 获得 的不定 芽 中 切 取 生长健 壮、高度为 3 cm 4 cm 的组培 芽，接入生根 培养基(参见 附录A中的A.3)上 进 行 培养，培养20 d 3 0 d。4.6 炼苗 选 择根、茎、叶俱全，株 高 4.0 cm 5.0 cm，叶片 4 6 片，根数 3条以 上，根长 3 cm 4 cm 的组培苗，先 带瓶放置 于 室温为 15 28、光 照 强度为 3 00 0 l x 5 000 l x、空气相 对湿 度 85 的 环境 中5 d 7 d，然后除 去瓶盖继续放置 1 d 2 d 以进 行炼 苗。5 组培苗移栽 5.1 环境条件 环境温度为 15 2 8，空气相 对湿 度 85。5.2 基质 基 质 采用1 000 倍高锰酸钾 溶液 消毒 的黄 心土，pH值 为 5.56.5。移栽容 器 采用50 或7 2 孔育 苗 穴盘，穴盘 规 格为 54 cm 28 cm。将 基 质填充到育 苗 穴盘。5.3 清洗 从 培养 瓶 中取出组培苗，洗 净根 部培养基，用50 多菌灵 可湿性 粉 剂80 0 1 00 0 倍 药液 浸泡10 m i n，在 阴凉处晾 10 m i n 1 5 m i n。5.4 移栽 每穴 种 植 1株，将 小苗种 植 在基 质 中，浇透 定 根 水。5.5 移栽后管理 移栽 后 的组 培苗 置 于苗 床，覆膜，并采用 遮光 率为7 08 0的 遮阳网 进 行遮光。白天喷雾 6 次，每次喷雾 60 s，每间隔 2 h喷 雾 1 次。移 栽40 d后，去 除薄膜。6 苗期管理 DB 45/T 2 45 6 20 22 3 6.1 水分管理 宜在早晚进行，保持土壤湿润，空气湿度保持在85以上。6.2 施肥管理 每隔10 d 1 5 d 用0.1磷酸二氢钾水溶液 叶面喷施1 次，或每隔10 d 1 5 d 用0.10.3 尿素、复合肥N-P 2 O 5-K 2 O（1 5-15-15）水溶液 交替淋施1次。6.3 病虫害防治 预防为主，综合防治。主要病害为炭疽病，病虫害化学防治方法参见附录B，农药 使用应符合 GB/T 8 32 1（所有部分）的规定。DB 45/T 2 45 6 20 22 4 A A 附录A（资料性）培养基配方 A.1 愈伤组织诱导培养基配方 WP M+2.00 mg/L 6-BA+0.50 mg/L 2,4-D 30 g/L 白砂 糖7.0 g/L琼 脂，pH值 为 5.45.8。A.2 愈伤组织分化培养基配方 WP M+2.00 mg/L 6-BA+0.10 mg/L N AA 30 g/L 白砂糖 7.0 g/L 琼脂，pH值为 5.4 5.8。A.3 生根培养基配方 1/2 WP M+0.5 0 1.00 mg/L IB A 30 g/L 白砂糖7.0 g/L 琼脂，pH值 为 5.45.8。表B 病虫 害 炭 疽 白 绢 藻 斑 赤 叶 根 腐 茶 吹 绵 茶小 绿.1 给出了 金 花 害名称 疽 病 绢 病 斑 病 叶 枯病 腐 病 茶 蚜 绵 蚧 绿 叶蝉 花 茶病虫害 化 50 50 4 75肟 菌 70 甲 60 福 1 20 1 25 5 0 2 25 金花 茶 化 学防治的 方 表B.1 金 农药名称 多菌灵可湿 性 甲基硫菌灵 悬 4 5代森铵水 剂 石灰 硫酸铜 菌 戊唑醇水 分 甲 基硫菌灵可 湿 福 福锌可湿 性 硫酸铜 1 5噁霉灵水 剂 啶虫脒可溶 粉 1 0吡虫啉乳 油 噻嗪酮可湿 性 0 杀螟硫磷 乳 2 0异丙威乳 油 速灭威可湿 性 B B 附录 B（资料性）茶 病虫害化 学 方 法。金 花茶病虫 害 性 粉剂 悬 浮剂 剂 分 散粒剂 湿 性粉剂 性 粉剂 剂 粉 剂 油 性 粉剂 乳 油 油 性 粉剂 B）学 防治方法 害 化学防治 方 1 0 8 8 2 2 0 1 0 1 0 4 0 1 0 2 0 1 0 1 0 8 6 方 法 稀释倍数 0 001 200 倍 001 000 倍 001 000 倍-2 00500 倍 0 003 000 倍 0 001 200 倍 0 001 200 倍 1 000 倍 0 005 000 倍 0 001 200 倍 0 003 000 倍 0 001 200 倍 0 001 200 倍 001 000 倍 6 00800 倍 DB 45/T 施 叶 叶 根 24 56 202 2 5 施 药方法 叶 面喷雾 灌施 撒施 叶 面喷雾 喷洒 根 部灌注 喷洒 喷洒 喷洒 2 中华人民共和国广西地方标准 金花茶组织培养技术规程 DB 45/T 2456 2022 广西壮族自治区市场监督管理局统一印刷 版权专有 侵权必究