ICS 65.020.20 CCS B05 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 2484 2021 胡萝卜小 孢子培养 技术规程 Technical code of practice for microspore culture of carrot 2021-12-25 发布 2022-01-25 实施 内蒙古自 治区市 场 监督管理 局 发 布 DB15/T 2484 2021 I 前 言 GB/T 1.1 2020 1 SAM/TC 25 DB15/T 2484 2021 1 胡萝卜小 孢子培 养技术规 程 1 范围 2 规范性 引用 文件 GB/T 6682 NY/T 2306 3 术语和 定义 小孢子 microspore 小孢子 培养 microspore culture 单倍体 haploid 4 试剂 超纯水 GB/T 6682 DB15/T 2484 2021 2 药品 EDTA 2,4-D 6-BA 5 仪器设 备 pH 6 培养基 配制 灭菌 与分 装 B5 NLN MS 1/2MS A A pH 5.8 A NY/T 2306 55 60 7 小孢子 培养 技术 流程 采样 15 d 25 d 1%外植体 消毒 10 min 75%50 s 0.1%4 min 6 小孢子 分离 1 400 10 mL 700 r/min 3 min 1 mL 2 1 105 mL-1 2 ml 诱导胚 状体 DB15/T 2484 2021 3 33 2 d 25 50 d 120 d 胚状体 分化 1500 lx 16 h d-1 26 30 d 诱导生 根 2 3 1500 lx 16 h d-1 26 2 4 炼苗与 移栽 1 cm 3 d 7 d 25 3 12 3 8 倍性鉴 定 9 DB15/T 2484 2021 4 A A 附录A（资料 性）培养基 成分 及用 量 A.1 A.1 表A.1 商品 基本 培养 基成 分及 用 量表 B5 NLN MS 1/2MS KNO3 2500 125 1900 950 NH4NO3 0 0 1650 825(NH4)2SO4 134 0 0 0 CaCl2 2H2O 150 0 440 220 Ca(NO3)2 4H2O 0 500 0 0 MgSO4 122.09 61.04 180 90 KH2PO4 0 125 170 85 NaH2PO4 130.44 0 0 0 MnSO4 H2O 10 18.94 22.3 22.3 H3BO3 3 10 6.2 6.2 ZnSO4 7H2O 2 10 8.6 8.6 Na2MoO4 2H2O 0.25 0.25 0.25 0.25 CuSO4 5H2O 0.025 0.025 0.025 0.025 CoCl2 6H2O 0.025 0.025 0.025 0.025 KI 0.75 0 0.83 0.83 FeSO4 7H2O 27.8 27.8 27.8 27.8 Na2EDTA 2H2O 37.3 37.3 37.3 37.3 100 100 100 100 10 0.5 0.1 0.1 1 0.5 0.5 0.5 1 5 0.5 0.5 0 2 2 2 0 0.5 0 0 0 0.05 0 0 L-0 800 0 0 L-0 100 0 0 0 30 0 0 DB15/T 2484 2021 5 A.2 A.2 表A.2 培养 基其 它添 加物 成分 及 用量表 B5 NLN MS 1/2MS 2,4-D 0 0.0005 0 0 6-BA 0 0 0.0005 0 0 0.02 0 0 30 130 30 30 0 7 7 7